Простые реакции.

Обычно реагируют 2 комп-та – Ag и At. Виды:

1. р-ции агглютинации (РА)

а) РА с неадсорбированным Ag

б) РА с Ag, адсорбир-ным на корпускулярн. носителях (эр-тах, бактериях, нераств. красителях, бентонитах и т.д.)

2. р-ции преципитации (в жид-тях и гелях)

3. р-ции непрямой (пассивной)

гемагглют-ции (Р(Н)ПГА)

4. опсоно-фагоцитарные реакции

5. косвенные (трехкомпонентн.) реакции, в состав которых входят реагирующие системы (животные, эритроциты и т.д.)

а) р-ции нейтр-ции (РН) возб-ля

б) РН Ag (токсины, метаболиты)

в) р-ции тормож-я гемагглют-ции (РТГА)

Принципы РА были заложены Грубером и Дюрэмом (1896).

Агглютинация – это процесс, при котором взвешенные бактерии, клетки или другие частицы сопоставимого размера слипаются с образованием скоплений.

Бактериогенная а. – агрегация эритроцитов под возд-вием бактерий или продуктов их жизнед-ти.

Групповая (перекрестная) а. – а. At, специфичными к минорным групповым Ag, общим для различных видов бактерий, каждый из которых обладает собственным (мажорным) Ag

Иммунная а. – а., вызванная At (агглютининами),специфичными для присутствующих м/о, клеток или Ag

Кислотная а. – а. различных м/о в прис-вии высоких конц-ций Н⁺

Пассивная а. – а. различных корпускулярн. частиц, покрытых Ag после вз-вия с At, специфичным к адсорбир-му Ag

Спонтанная а. – неспециф-ая а. м/о или клеток, обусловленная дефицитом полярн. группировок в среде

Холодовая а. – а. эритроцитов собственной сывороткой или любой другой сывороткой после охлаждения крови ниже t тела.

РА. Мех-м РА описывает th решетки, согласно которой двухвалентное At вз-вует одним акт. центром с детерминантой одного Ag, а другим – с детерминантой второго Ag. В рез-те подобного вз-вия обр-ся агглютинат. Его образование невозможно при дефиците или избытке At. Визуально реакция проявляется склеиванием корпускулярных Ag At (агглютининами) и реализуется в изотоническом р-ре NaCl.

Термостабильные соматические О-Ag выдерживают кипячение в теч. ч.,; ч/з 18-24 ч. при 37^оС образуют мелкозернис. агрегаты

Термолабильные жгутиковые Н- Ag разрушаются при 100^оС и под д-вием этанола; в р-циях с Н-антисыв-кой ч/з 2 ч инкубации дают рыхлые крупные хлопья, образованные бактериями и склеившимися жгутиками.

Vi-Ag (Ag Феликса-Питта) брюшнотифозных бактерий отностиельно термостабилен (выдерживает 60-62^оС); при инкубации с Vi-антисыв-кой обр-ет мелкозернис. агглютинат.

Титр сыв-ки. РА недостаточно специфична; ее чувствит-ть и специфичность можно повысить разведением исследуемой с-мы до ее титра или до ½ титра. Титром сыворотки называют max разведение, дающее агглютинацию Ag.

Р-ция адсорбции агглютининов.

Если различные по систематич. положению бактерии имеют одинаковые или похожие по стр-ре Ag, то их агглютинируют одни и те же сыворотки. Для облегчения их идентификации используется р-ция адсорбции агглютининов, основанная на способности Ag родственных бактерий адсорбировать из сыв-ки только группов. At, сохраняя в ней типоспецифические At. Полученные антисыв-ки называют монорецепторными, т.к. они содержат At только к одному Ag. Для сорбции агглютининов применяют взвесь убитых бактерий; если они убиты нагреванием, то адсорбируются О-агглютинины, а если формалином, то Н-аггл-ны

Непрямые р-ции. Методы, использующие иммунологически инертные частицы (адсорбенты), обработанные Ag, называют непрямыми (пассивными) р-ми. Исходное разведение сыв-ки 1:20 В кач-ве Ag используются живые и убитые бактерии из S-колоний в физ.р-ре

РН(П)ГА основана на способ-ти At вз-вать с Ag, фиксированными на различных эритроцитах, которые при этом агглютинируют. Разновидность этого метода – р-ция латекс-агглютинации. Принцип метода основан на вз-вии Ag, присутствующего в образце, с частицами латекса, нагруж-ми специфическими моноклональн. At, что ведет к образованию видимых агрегатов. Учет рез-тов проводят ч/з 10-15 мин при косом освещении на темн. фоне. Разработаны коммерческие диагностикумы для индикации Streptococcus pneumoniae, стрептококков группы В, Haemophilis influenzae типа b и капсулированных штаммов менингококка (NB Ag менингококков группы b дают перекрестные реакции с Ag E. coli) в различных тканевых жид-тях (СМЖ, сыв-ке, моче). Также имеются наборы для выявления Ag стрептококков группы А в мазках из зева; для первичной экспресс-идентификации колоний стрептококков группы A, B, C, F, энтерококков, Streptococcus pneumoniae, Haemophilis influenzae типов a-f, St. aureus, Neisseria meningitides и Neis. gonorrheae. «-» метода: высок. стоим-ть диагностикумов; возможность получения артефактов, особенно в присут-вии ревматоидных факторов и продуктов фибринолиза.

NB Если на частицах фиксир-ся не Ag, а At, то это обратная РПГА.

Р-ция торможения пассивной гемагглютинации (РТПГА) является дальнейшим развитием РПГА и контролирует ее специфичность. Включает 3 комп-та: Ag, At и At (Ag), адсорбир-ые на эритроцитах

Дата добавления: 2015-08-02