Общие сведения

Лабораторная работа №11

Тема: Возбудитель пастереллеза и гемофилезов.

Цель занятия: изучить морфологию, культурально-биохимические свойства возбудителей пастереллеза и гемофилезов, а также лабораторную диагностику и биопрепараты.

Оборудование и материалы. Культуры P. multocida на МПА и в МПБ, Н. Parasuis на кровяном МПА с феноменом сателлитного роста, красители для окраскимазков по Граму;микроскопы; биопрепараты.

Общие сведения

По современной классификации пастереллы объединены в секцию 5, семейство Pasteurellaceae, в котором один род Pastenrella. Род представлен шестью видами. Название рода дано в честь Пастера, который впервые выделил одного из представителей данной группы (1879) – возбудителя холеры кур. Существует много видов пастерелл. Все они имеют общие морфологические, культуральные и атигенные свойства. Их дифференцируют по степени патогенности для лабораторных животных и по биохимическим свойствам. Основной возбудитель болезни – Pasteurella multocida. Микроб вызывает остропротекающее септическое заболевание сельскохозяйственных и диких животных (включая птиц).

1.1 Пастереллёз животных характеризуется явлениями септицемии, наличием множественных геморрагии (кровоизлияний) во внутренних органах, на слизистых и серозных оболочках.

Возбудитель пастереллеза – P. multocida (P. septica).

Устойчивость у пастерелл не высокая. При нагревании до 70-80°С они погибают через 5-10 мин, при кипячении -мгновенно; в воздухе живут 2-3 дня; в трупах, воде и почве сохраняются 1-3 мес, иногда до года: под действием дезинфицирующих веществ гибнут через несколько минут.

Морфология (микроскопия). Препараты-отпечатки из тканей и органов высушивают, фиксируют и окрашивают часть препаратов по Граму, часть по Романовскому - Гимза (или по методу Муромцева фуксин-синью или синью Леффлера с последующей обработкой в течение нескольких секунд 1 %-м раствором уксусной кислоты) или разведенным фуксином. Пастереллы - бактерии овоидной формы, величиной от 0,25...0,5 до 2мкм, неподвижные, споры не образуют. Многие вирулентные свежевыделенные штаммы формируют капсулу. Грамотрицательны. При окраске по методу Муромцева или Романовского - Гимза (или синью Леффлера) в мазках из крови или органов окрашиваются биполярно, то есть более интенсивная окраска по полюсам клетки, центральная часть окрашена очень слабо.

Материал для исследования. Для бактериологического исследования от крупных животных направляют кусочки паренхиматозных органов, трубчатую кость (костный мозг). Трупы мелких животных посылают целиком.

Определение культурально - биохимических свойств (выделение и идентификация культуры возбудителя). Возбудитель из патологического материала выделяют путем посева на питательные среды МПБ и МПА (рН 7,2...7,4) лучше с добавлением кровяной сыворотки. Оптимальная температура роста 37°С. Аэроб. На жидких средах в первые дни роста отмечают незначительное помутнение среды, затем образуется слизистый осадок, среда просветляется. При встряхивании осадок не разбивается, а поднимается в виде «косички». На МПА пастереллы образуют гладкие, слегка выпуклые серовато-белые колонии S-формы, края ровные, слегка опалесцирующие. Колонии R-формы матовые, с голубоватым отливом, шероховатые с неровными краями. На МПЖ возбудитель вначале растет отдельными колониями, затем в виде белого стержня без отростков. Пастереллы ферментируют глюкозу, сахарозу, сорбит и маннит с образованием кислоты без газа. Лактозу и дульцит не ферментируют.

Антигенная структура изучена недостаточно. Установлено наличие соматического и капсульного антигенов.

Патогенность (биопроба). Определяют путем заражения голубей, белых мышей или кроликов чистой культурой или суспензией растертых тканей исследуемого материала. Голубям взвесь инъецируют внутримышечно в дозе 0,3 мл, белым мышам подкожно - 0,2 мл, кроликам подкожно - 0,5 мл. У кроликов перед заражением следует исключить пастереллоносительство. Для этого им в течение трех дней до заражения в каждое носовое отверстие вводят по 2 капли 0,5 %-го водного раствора бриллиантовой зелени. Появляющееся гнойное истечение из носовой полости свидетельствует о бактерионосительстве. При заражении пастереллам и гибель кроликов наступает через 18...26 ч. Из органов павших животных производят посевы на питательные среды для выделения чистой культуры возбудителя.

Лабораторная диагностика. Включает в себя обнаружение возбудителя в исходном материале методом световой микроскопии (разработаны и другие методы), выделение чистой культуры посевом на питательные среды и методом биопробы, идентификацию возбудителя по культурально-морфологическим, ферментативным и серологическим свойствам. Для дифференциации микроба ставят пробу с бактериофагом; разработана реакция нарастания титра фага (РНФ), которую используют для постановки ускоренного ориентировочного диагноза. У переболевших животных образуется нестерильный иммунитет, а после вакцинации животные (особенно птицы) могут оставаться пастереллоносителями.

Биопрепараты. С целью профилактики пастереллеза у крупного рогатого скота, овец и свиней применяют эмульгированную в минеральном масле или преципитирванную квасцами формолвакцину. -.В птицеводческих хозяйствах используют вакцины из слабовирулентных штаммов: французских и отечественных -АВ и К.

Лечение пастереллезов проводят антибиотиками (тетрациклин, эритромицин, стрептомицин и др.), а также сульфаниламидными препаратами. Эффективность лечения усиливается, если выше указанные препараты применяют совместно со специфической противопастереллезной сывороткой.

Дата добавления: 2015-11-30