«Медицинская вирусология» 3 страница

При суперинфицировании (наслоении гепатита D на гепатит В) развиваются среднетяжелые и тяжелые формы, часто переходящие в хронический гепатит.

6. 7. Лабораторная диагностика гепатита В.

Лабораторная диагностика гепатита В проводится только серо­логическими и молекулярно-генетическим методами. Исследуемым материалом является сыворотка крови. Для выявления антигенов ВГВ и специфических антител применяются ИФА, РИА, РНГА, РОНГА, реакция преципитации в геле (РПГ), встречный иммуноэлектрофорез.

Серологическая диагностика. В организме больных к каждому из вирусных антигенов на разных стадиях заболевания образуются спе­цифические антитела, поэтому основой серодиагностики являются зна­ния о динамике появления и исчезновения основных маркеров ВГБ.

HBsAg является основным маркером заболевания, он появляет­ся в крови в инкубационном периоде (через 4-6 недель после зараже­ния задолго до появления клинических симптомов), постоянно обнаруживается в безжелтушном и желтушном периодах. К концу пер­вого месяца желтушного периода при остром течении болезни он ис­чезает из сыворотки крови и при последующей сероконверсии это указывает на выздоровление. В то же время длительное присутствие его после заболевания указывает на развитие хронического гепатита или свидетельствует о бессимптомном вирусоносительстве.

Антитела к HBsAg начинают циркулировать через 3-4 месяца после исчезновения из крови HBs-Ag. Они указывают на выздоровле­ние после острого гепатита и появлении протективного иммунитета и сохраняются всю жизнь.

HBeAg появляется после HBsAg, максимальная концентрация определяется в конце инкубационного периода и в преджелтушном периоде. С появлением желтухи его количество резко уменьшается и через 2-3 недели от начала заболевания он исчезает. Присутствие HBeAg указывает на активную репродукции вируса и, следовательно, высокую инфекционность крови. Если антиген длительно циркулиру­ет в крови, это указывает на формирование затяжной или хронической формы гепатита.

Антитела к HBeAg появляются после спустя 1-2 недели после исчезновения из крови соответствующего антигена и указывают на доброкачественное течение заболевания. У переболевших циркулиру­ют от 2 до 5 лет.

HBeAg находится только в ядрах инфицированных гепатоцитов, в свободной крови, как правило, не появляется, его обнаруживают с помощью МИФ.

Антитела к HBeAg циркулируют в крови в преджелтушном, весь желтушный период и в начале реконвалесценции. При уменьшении активности репродукции вируса снижается титр антител, их полное исчезновение указывает на клиническое выздоровление. Особенно показательным и надежным маркером активно-текущего гепатита В является наличие в крови анти-HBcAg IgM.

Антитела к HBeAg класса IgG выявляются как при остром, так и при хроническом гепатите, сохраняются в течение всей и указывают на ранее перенесенный гепатит В (ретроспективная диагностика) или на имеющуюся инфекцию.

Таким образом, основными серологическими маркерами острого гепатита В являются: HBsAg, HBeAg и анти-HBcAg IgM

Молекулярно-генетический метод. Метод применяется как для диагностики заболевания, так и для оценки эффективности противо­вирусной терапии. В сыворотке крови больных можно обнаружить ДНК ВГВ в острый период заболевания и при хроническом гепатите при помощи ПЦР, реже методом молекулярной гибридизации. Количест­венный метод ПЦР применяют для определения уровня вирусемии.

8. 1. «Вакцина гепатита В рекомбинантная дрожжевая жидкая» (Россия) — содержит сорбированный на гидроксиде алюминия поверх­ностный HBs-антиген, выделенный из рекомбинантного штамма-про­дуцента Saccharomyces cerevisiae,B который был встроен этот антиген.

Вакцина против гепатита В включена в национальный календарь профилактических прививок РФ. Вакцина против гепатита В, как и всякая адсорбированная вакцина, вводится внутримышечно.

В России зарегистрированы и применяются аналогичные отечест­венные и зарубежные рекомбинантые дрожжевые вакцины гепатита В:

- «Комбиотех В» (Россия);

- «Recovbivax HB» (США);

- «Энджерикс В» (Бельгия);

- «H-B-Vax П» (Нидерланды);

- «Эувакс В» (Франция);

- «Эбербиовак НВ» (Куба).

2. «Бубо-Кок» (Россия) и «БубоМ» (Россия). Вакцины являют­ся ассоциированными препаратами. «Бубо-Кок» содержит, кроме HBs-антигена вируса гепатита В, АКДС (коклюшно-дифтерийно-столбнячная вакцина). В состав «БубоМ» входит АДС-М (дифтерийно-столбнячный анатоксин).

3. Иммуноглобулин человека против гепатита В (Россия). Препарат представляет собой очищенную фракцию иммуноглобулинов выделенную методом фракционирования этанолом из плазмы или сы­воротки доноров, содержащих специфические антитела к поверхно­стному антигену вируса гепатита В. Препарат предназначен для пассивной профилактики в группах «высокого риска».

9. Лечение. Больным острыми и хроническими формами гепатита В назначают щадящий режим, диетическое питание, симптоматичес­кую и этиотропную терапию. Этиотропные препараты применяют для Прекращения репродукции вируса и уменьшения активности воспалительных процессов печени. Для это цели используют 2 группы про­тивовирусных препаратов:

- препараты интерферона, например реаферон, роферон А, виферон, интрон А, реальдирон и др. Возможно использовать индук­торы интерферона (циклоферон, неовир, амиксин и др.);

- аналоги нуклеозидов - ламивудин, ацикловир, ганцикловир, зидовудин и др.

При необходимости для активации иммунитета назначают иммуномодуляторы (тимозин, непон, полиоксидоний и др.).

Задача 6.

1. 2. 3. 4. Вирусный гепатит С - антропонозная вирусная инфекция, по­ражающая печень и передающаяся парэнтерально, реже половым пу­тем. Может иметь бессимптомное, легкое или более тяжелое течение с частым переходом в хроническую форму и возможным развитием опас­ных для жизни осложнений - цирроза или первичного рака печени.

Вирус гепатита С(ВГС, HCV) включен в семейство Flaviviridae, выделен в род Hepacivirus. Он был идентифицирован в 1989 г. и ока­зался наиболее часто встречающимся среди возбудителей сборной группы гепатитов «ни А, ни В», в которую входили ранее неизвестные гепатиты С, D, E, G и др.

Строение вириона. Вирион имеет сферическую форму, его диа­метр около 50 нм. Вирион покрыт липопротеидным суперкапсидом, содержащим поверхностные гликопротеины Е1 и Е2, ответственные за прикрепление к чувствительной клетке и проникновение в нее. Под суперкапсидом расположен капсид икосаэдрический симметрии, в со­став которого входит капсидный белок С.

Внутри капсида находится геном вируса - линейная однонитевая плюс-РНК, кодирующая 11 белков: 4 структурных (Е1, Е2, белок С и небольшой интегральный белок Р7 с функцией ионного канала) и 7 неструктурных, обладающих ферментативными свойствами. Среди них 6 белков, обозначаемых NS, обеспечивают репродукцию вируса, в том числе 2 вирусные протеазы - NS2, NS3 и РНК-полимераза (NS5). F-белок (7-й белок) отвечает за альтернативное считывание генома. Геномная РНК на 5' и 3- концах имеет стабильные нетранслируемые участки - 5NTR и 3NTR. Наибольшей изменчивостью обладают области, кодирующие гликопротеины Е1 и Е2. В состав генома входит уча­сток, содержащий 329-340 нуклеотидов, который присутствует у всех вариантов ВГС и используется при постановке ПЦР.

Антигены. Различают несколько антигенов, связанных с белка­ми ВГС: сердцевинный (cor) антиген, гликопротеиновые поверхност­ные антигены и антигены неструктурных белков.

Вирусные антигены обладают значительной изменчивостью, что связано с генетической неоднородностью вируса, возникающей вследст­вие частых мутаций геномной РНК в процессе ее репликации, которая не сопровождается коррекцией ошибок (в отличие от репликации ДНК). В результате образуются измененные генотипы и субтипы, называе­мые квазивидами или псевдоштаммами. В организме инфицирован­ных ВГС пациентов обнаруживается набор таких квазивидов. Один из вариантов преобладает, остальные находятся в небольших количест­вах (минорные квазивиды). В процессе инфекции, особенно хрониче­ской, которая отличается длительностью, соотношения квазивидов значительно меняются, возникают новые, что способствует выжива­нию» вирусов в организме.

В настоящее время выделяют 6 основных, клинически значимых, генотипов и около 100 субтипов, которые различаются, по тяжести вызываемых заболеваний, интенсивности вирусемии, по чувствитель­ности к лечению интерфероном и географическому распространению. В России преобладает генотип 1 в, в убывающей последовательности встречаются генотипы За, 1а, 2а.

Особенности репродукция. Вирус гепатита С посредством гликопротеина Е2 присоединяется к рецептеру CD81, находящегося на поверхности гепатоцитов и некоторых других клеток, например, лим­фоцитов крови, эпителиоцитов ЖКТ и др. Проникновение вируса в клетку происходит путем слияния мембран, при этом нуклеокапсид вируса попадает внутрь клетки, в цитоплазме которой происходит депротеинизация капсида и освобождение геномной плюс-РНК.

Вирусная РНК выполняет несколько функций. В качестве и-РНК присоединяется к полирибосомам, на которых происходит трансля­ция гигантского полипептида-предшественника, нарезаемого протеазами на 11 белков - неструктурных и структурных. Геномная плюс-РНК служит матрицей для синтеза комплементарной минус-РНК, на кото­рой формируются многочисленные копии плюс-РНК с функциями ге­номов для нового поколения вирусов или информационных РНК. После достаточного накопления структурных белков и молекул РНК осуще­ствляется сборка капсида при участии белка С и упаковка в него ге­номной РНК. Далее нуклеокапсид покрывается суперкапсидом из мембраны цитоплазматического ретикулума, в которую встроены гликопротеины Е1 и Е2, и освобождается из клетки путем почкования.

Резистентность. Устойчивость вируса во внешней среде неве­лика, однако в инфицированной сыворотке крови он сохраняет жизне­способность несколько лет. Вирус выдерживает нагревание до 50°С, инактивируется жирорастворителями и УФ-облучением. По своей резистентности он занимает среднее положение между более устойчи­вым вирусом гепатита В и менее устойчивым ВИЧ.

Вирусный гепатит С является одним из самых распространен­ных инфекционных заболеваний. По современным данным ВОЗ коли­чество людей, инфицированных ВГС, достигло 1 млрд. Несколько лет назад их было 200 млн. Такое резкое увеличение заболеваемости и, прежде всего, среди людей в возрасте 15-30 лет, связано со значитель­ным ростом «шприцевой» наркомании. Нельзя исключить и совершен­ствование методов диагностики гепатита С.

Источником инфекции являются люди с бессимптомной, мани­фестной и, особенно хронической формой инфекции. У них ВГС об­наруживается в крови, сперме, секрете шейки матки, в меньшей концентрации в других биологических жидкостях.

Основной механизм передачи - парэнтеральный. Менее акту­альны половой, вертикальный и очень редко встречающийся быто­вой пути передачи.

Таким образом, способы передачи инфекции такие же, что и у гепатита В. Отличие заключается в том, что для инфицирования ВГС требуется более высокая доза вируса, поэтому преимущественно за­ражаются люди, многократно контактирующие с инфицированной кровью. К группе риска относятся прежде всего шприцевые наркома­ны, пользующиеся общим шприцем, на долю которых приходится 70% и более случаев заражения.

Риску заражения подвергаются люди, которым регулярно пере­ливают донорскую кровь и препараты крови. Долгое время этот путь передачи преобладал и гепатит С называли посттрансфузионным ге­патитом. После того как распространилась инъекционная наркомания, а также был налажен контроль на зараженность ВГС крови доноров, процент трансфузионных заражений снизился и составляет около 4%. Инфицирование ВГС иногда происходит в результате транспланта­ции органов, после повторных процедур гемодиализа и других ме­дицинских манипуляций (при нарушении техники безопасности). В группе риска находятся и медицинские работники, постоянно кон­тактирующие с кровью.

Половой путь передачи имеет меньшее значение и составляет 5-10% инфицированных. Заражаются преимущественно люди, веду­щие беспорядочную половую жизнь и гомосексуалисты.

Следует отметить, что примерно у 40% инфицированных ВГС людей точно выявить пути передачи инфекции не удается.

5. 6. Патогенез и клинические формы.

ВГС непосредственно попадает в ток крови, заносится в печень и инфицирует гепатоциты, оказывая непосредственное цитотоксическое действие вследствие нарушения внутриклеточных процессов. В частности, вирусный белок С, проникнув в ядро клетки, нарушает ген­ную транскрипцию. Некоторые вирусные белки, воздействуя на мито­хондрии, лишают инфицированную клетку способности к апоптозу (механизм «самоубийства» инфицированной клетки, которая погиба­ет вместе с репродуцирующимися вирусами), что способствует дли­тельному сохранению вирусов в организме.

Но основная причина длительного выживания ВГС в организме - их способность к уклонению от иммунологического надзора, что свя­зано с генетической неоднородностью вируса и его выраженной из­менчивостью. Защитные механизмы, главным образом, образующиеся специфические антитела, направленные на доминирующий генотип, приводят к уничтожению этого варианта вируса. Но его место занима­ет один из многочисленных минорных квазивидов, иммунитет к кото­рому оказывается несостоятельным. После формирования антител к этому варианту и его элиминации, на смену приходит следующий квазивид с измененными свойствами и так продолжается длительное вре­мя. Происходит избыточное накопление антител (большей частью малоэффективных) и постепенное истощение иммунной системы.

С изменчивостью ВГС связана и недостаточная реализация кле­точных звеньев иммунитета. Вирусспецифические Т-лимфоциты CD4+ и CD8+ появляются поздно и не способны подавить вирусемию, в то же время при активной пролиферации этих клеток гепатит С реже пе­реходит в хроническую форму.

Таким образом, ВГС способен персистировать в организме в те­чение многих лет, хотя у него и отсутствует механизм интегративной инфекции (как у вируса гепатита В или ВИЧ).

Существенное значение в патогенезе заболевания имеют разви­вающиеся аутоиммунные процессы и профиль антигенов главного комплекса гистосовместимости (ГКГС, HLA) у конкретного больно­го, влияющий на качество иммунного ответа. Например, присутствие антигена HLA-DR5 способствует бессимптомному течению гепатита С с незначительными изменениями в ткани печени.

Развитие аутоиммунной патологии свойственно хроническому гепатиту, для которого характерны некрозо-воспалительные повреж­дения печени (аутоиммунный гепатит П типа с наличием печеночно-почечных микросомальных антител) и прогрессирующая внепеченочная патология - полиартриты, полиневриты, миокардит и др. Выраженность аутоиммунных процессов связана с антиген­ной гомологией белков ВГС и некоторых мембранных пептидов (клеточных рецепторов) организма человека и с циркуляцией в кро­ви значительного количества перекрестно реагирующих антител, в том числе и аутоантител.

Клинические формы гепатита С. Попавший в организм вирус мо­жет вызвать острую манифестную или бессимптомную форму инфекции.

Манифестная форма возникает после инкубационного периода длительностью, в среднем, 6 месяцев и сопровождается симптомами гепатита - интоксикацией, диспептическим синдромом, увеличением печени и селезенки, в 25% случаев наблюдается желтуха. Чаще забо­левание протекает легко, но бывает и среднетяжелое и тяжелое тече­ние, иногда затяжное. В печени - диффузное поражение паренхимы, дистрофические и некротические изменения гепатоцитов, а также выраженные процессы регенерации.

Бессимптомная форма, при которой отсутствуют жалобы и симп­томы гепатита, возникает, примерно, в 70% случаев инфицирования и, как правило, не диагносцируется. Однако, если лабораторное исследование было проведено, то обнаруживаются вирусемия и наличие антител, в том числе класса IgM, а также изменения биохимических показателей крови, указывающие на лизис гепатоцитов.

Как манифестная, так и бессимптомная формы могут завершить­ся выздоровлением (в 15-25% случаев), но чаще инфекция приобрета­ет хроническое течение.

Хронический гепатит С обычно проявляется незначительными клиническими симптомами, жалобами на утомляемость и слабость, наблюдается увеличение печени. Диагноз устанавливается лаборатор­ным путем.

Реже встречается хроническая форма гепатита С с высокой ак­тивностью инфекционного процесса, протекающая с периодически­ми обострениями и ремиссиями и постепенно развивающейся аутоиммунной патологией. Обострения характеризуются выраженны­ми симптомами гепатита, который иногда сопровождается желтухой.

Хронический гепатит С может длиться 10-20 лет, но бывают и более скоротечные тяжелые формы. В результате значительного по­вреждения печени и нарастания некротических изменений постепен­но формируется цирроз печени (у 20% больных) или развивается первичный рак - гепатоцеллюлярная карцинома (в 5% случаев). Сле­дует отметить, что многие больные хроническим гепатитом не дожи­вают до развития этих осложнений и умирают раньше от других сопутствующих болезней.

7. Лабораторная диагностика гепатита С.

Диагноз гепатита С не может считаться установленным без лабо­раторного подтверждения. Применяют серологический метод и полимеразную цепную реакцию (ПЦР). Вирусологическое исследование не проводят, так как ВГС, как правило, не удается выделить и культи­вировать на клеточных культурах. Серологический метод. Заключается в обнаружении специфи­ческих антител в исследуемой сыворотке с помощью ИФА. Первона­чально проводят скрининговое исследование для определения общих антител - анти-HCV-total.

Используют тест систему ИФА третьего поколения, в которой в качестве антигена применяют иммунореактивные синтетические пеп­тиды. Эта реакция является ориентировочной и позволяет установить факт инфицирования, она может применяться и при массовом обсле­довании людей. Но по наличию общих антител, которые находятся в организме неопределенно долгое время, нельзя судить о сроке инфек­ции, ее прогрессировании и завершении.

Поэтому следующим этапом исследования является определение наличия специфических антител класса IgM, используя ИФА. Их об­наружение указывает на острую фазу инфекции или обострение хро­нической формы гепатита С. Как правило, IgM появляются в крови через 1-3 месяца после начала заболевания.

В сомнительных случаях в качестве подтверждающего теста при­меняют иммуноблотинг. В системах 3-го поколения антигенами явля­ются рекомбинантные и/или синтетические пептиды, кодируемые генами С, NS4 и NS5. Тест считается положительным при обнаруже­нии антител к двум и более пептидам (антигенам).

Полимеразная цепная реакция (ПЦР). Позволяет обнаружить специфическую РНК возбудителя гепатита С уже во время инкубаци­онного периода или в начале заболевания. Обычно исследуют сыво­ротку крови или эритроциты, в которых содержание вирусной РНК оказалось выше. С помощью ПЦР устанавливают генотип и подтип вируса, а также концентрацию вируса в крови (по титру РНК). Коли­чественная ПЦР дает возможность оценивать активность инфекцион­ного процесса и его прогноз, судить об эффективности лечения. Необходимо отметить, что применение ПЦР для диагностики гепати­та С еще не приобрело массового характера и остается недоступным для многих лабораторий.

9. Профилактика и лечение.

Специфическая профилактика отсутствует. Меры общей профи­лактики такие же, что и при вирусном гепатите В и ВИЧ-инфекции.

Лечение гепатита С проводится традиционными симптоматичес­кими и патогенетическими методами, а также с помощью противови­русных средств. Показано длительное лечение (в течение 6 месяцев) препаратами А-интерферона и, особенно, ПЭГ-интерфероном, который вводят одни раз в неделю. Также используют индукторы интерферона.

Применяют противовирусные препараты с различным механиз­мом действия: нуклеозиды (рибовирин, ламивудин и др.), препараты глицерризиновой кислоты (виусид, фосфоглив) и амантодины.

Раннее проведение комплексного лечения при острой форме ви­русного гепатита С оказалось довольно успешным, так как увеличил­ся процент выздоровления и резко снизился переход в хроническую форму инфекции.

Значительно менее эффективным является лечение развившего­ся хронического гепатита С. Практика показывает, что именно в этой стадии инфекции обычно диагностируют и начинают лечение.

Задача 7.

1. 2. 3. Грипп - острая вирусная респираторная инфекция, часто прини­мающая эпидемическое распространение. Грипп характеризуется яв­лениями общей интоксикации, лихорадкой, поражением дыхательного тракта, нервной и сердечно-сосудистой системы.

Возбудители гриппа входят в семейство Orthomyxoviridae, ко­торое включает два рода - род Influenzavirus А, В с типами вирусов А и В, у которых имеются подтипы, и род Influenza virus С содержащий вирус типа С. Наибольшее значение в патологии имеет вирус гриппа типа А, который является типовым представителем семейства ортомиксовирусов.

Строение вириона гриппа типа А. Вирионы имеют округлую форму, их диаметр составляет 80-120 нм; в материале, свежевыделенном от больных, встречаются вирионы нитевидной формы.

Вирусы гриппа - сложные РНК-содержащие вирусы, состоящие из центральной части (сердцевины) и суперкапсида. Сердцевина со­держит геном вируса - линейную, однонитевую, фрагментированную минус-РНК, состоящую из 8 фрагментов. Шесть фрагментов кодирует по одному белку, остальные - по два белка. Каждый фрагмент заклю­чен в белковую оболочку - капсид со спиральным типом симметрии. Фрагменты нуклеокапсидов связаны между собой и образуют общий тяж - рибонуклеопротеид (РНП), уложенный в виде плотной спирали (катушки). В составе РНП, кроме капсидных белков, имеются белки полимеразного комплекса (PI, P2 и РЗ), необходимые для репликации геномной минус-РНК. Вокруг рибонуклеопротеида находится слой матриксного белка (М-слой), придающий вириону прочность. Поверх М-слоя, прилегая к нему, расположен суперкапсид - липопротеиновая оболочка клеточного происхождения со встроенными вирусоспецифическими гликопротеинами - гемагглютинином (Н) и нейраминидазой (N), выступающими на поверхности вириона в виде множества шипиков. На поверхности вириона находятся, в среднем, около 500 шипи ков гемагглютинина и примерно 100 - нейраминидазы.

Гемагглютинин отвечает за способность вируса присоединяться к чувствительной клетке, вызывает агглютинацию эритроцитов, явля­ется тримером, имеет палочковидную форму.

Фермент нейраминидаза участвует в процессе проникновения ви­риона в клетку и способствует выходу дочерних вирионов из клетки после репродукции. Нейраминидаза - тетрамер грибовидной формы.

Вирусы гриппа типа В по своим размерам и строению не отлича­ются от вирусов типа А.

Вирусы типа С имеет наибольшие размеры (диаметр 150-200 нм), геном состоит из 4-7 фрагментов и у него отсутствует нейраминидаза.

Антигены. Вирусы гриппа имеют внутренние и поверхностные антигены. Внутренние антигены (S-антиген) - это антигены белков нуклеокапсида и матриксного белка. Они отличаются стабильностью, являются типоспецифичными, и не дают перекрестных реакций.

Поверхностные антигены (V-антигены) - являются протективными антигенами - это антигены поверхностных гликопротеинов - гемаглютинина (Н-антиген) и нейраминидазы (N-антиген). Антитела к этим антигенам обладают вируснейтрализующими свойствами.

У вирусов гриппа типа А поверхностные антигены отличаются многообразием и изменчивостью. К настоящему времени выявлено 15 вариантов Н-антигенов и 10 вариантов N-антигенов. Для вирусов грип­па человека характерны гемагглютинины HI, Н2 и НЗ и нейраминида­зы N1 и N2. Остальные варианты Н- и N-антигенов выделены от инфицированых вирусом гриппа животных и птиц. Различные сочета­ния вариантов Н- и N-антигенов формируют подтипы вируса типа А, это: A/HI Nl/, A/H2 N2/ и A/H3N2/, характерные для человека.

Антигенная изменчивость обуславливается двумя процессами - антигенным шифтом и антигенным дрейфом.

Репродукция вируса гриппа (на примере вируса типа А).

1. Адсорбция вирусов на чувствительных клетках. Адсорбция вирионов происходит путем присоединения находящихся на их поверх­ности шипиков гемагглютинина (его большой субъединицы) к клеточным рецепторам - гликопротеинам и гликолипидам - содержа­щим сиаловую кислоту. Гемагглютинин должен быть в активирован­ном состоянии: «нарезанным» на большую и малую субъединицы.

2. Проникновение вирионов в клетку происходит путем рецепторного эндоцитоза при участии активированного гемагглютинина (его малой субъединицы) и нейраминидазы, которая модифицирует клеточные рецепторы. Проникающий в клетку вирус находится в эндоцитарной вакуоли. Выход вируса в цитоплазму клетки, сопровождающийся его частичной депротеинизацией, осуществ­ляется путем слияния мембран эндоцитарной вакуоли и супер-капсида вириона при участии малой субъединицы гемагглютинина. При этом в цитоплазме оказывается сердцеви­на вируса - РНП, покрытый М-белком.

3. Транспортировка вируса к ядру клетки и дальнейшая депротеинизация. Депротеинизация завершается на поверхности ядра, куда поступает сердцевина вируса (РНП), и заключается в разруше­нии М-белка протеазами (стадия позднего «раздевания»).

4. Экспрессия вирусного генома и синтез компонентов вириона про-

исходит в ядре клетки, куда поступают фрагменты генома, транс­портируемые в-интегринами и начинается с транскрипции генов вирусной минус-РНК, для которой необходимо участие полимеразного комплекса и присутствие белка РНП. Транскрибированные и-РНК (более короткие, чем соответствую­щий фрагмент генома и не связанные с РНП) для своего функциони­рования нуждаются в «затравке» - присоединении к 5 -концу метилированной «кэп» (шапочки). Эта структура вырезается из вновь синтезированных в ядре зараженной клетки клеточных и-РНК, чем объясняется необходимость ядерной стадии репродукции вируса грип­па. Менее эффективно функцию «затравки» могут выполнять динуклеотиды Ар и ApG.

Функционально активные вирусные и-РНК («ранние» и «поздние») поступают на рибосомы и индуцируют транляцию вирусных белков. Сперва синтезируются белки NS и NP (ранние белки), а затем НА, NA и М (поздние белки). Белки полимеразного комплекса - Р,, Р₂, Р₃ - син­тезируются равномерно на протяжении цикла.

При накоплении достаточного количества вирусных белков, про­цесс транскрипции переключается на репликацию вирусных гено­мов, которая также осуществляется в ядре клетки. Далее эти процессы чередуются.

Репликация генома заключается в полной транскрипции каждо­го фрагмента вирусной РНК, связанного с капсидными белками. На фрагменте минус-РНК формируется промежуточная плюс-РНК с ком­плементарным расположением оснований, которая является матрицей для синтеза многих копий фрагментов вирусных минус-РНК геномов. Таким образом, в ядре происходит накопление генетического матери­ала вирусов - дочерних фрагментов минус-РНК, а на рибосомах син­тезируются вирусные белки РНП, которые затем поступают в ядро.

5. Формирование вирионов и их выход из клетки. Сборка вирионов начинается в ядре клетки, где образуются фрагменты нуклеокапсидов, и происходит их объединение в рибонуклеопротеидный тяж, который принимает вид тесно уложенной спирали. Эта структура по­ступает в цитоплазму и подходит к участку модифицированной кле­точной мембраны, к которой изнутри прилегает слой М-белка. В этот участок мембраны уже встроены шипики гемагглютинина и нейраминидазы. Вирион покидает клетку путем почкования, одновременно «одеваясь» суперкапсидом из модифицированной мембраны и превра­щаясь в полноценный зрелый вирус. М-белок участвует в регуляции процесса формирования вириона и способствует его стабилизации.

Цикл репродукции вируса гриппа продолжается 6-8 часов. Зара­женная клетка погибает не сразу и может продуцировать несколько тысяч вирионов.

4. 5. Патогенез

Входными воротами инфекции является эпителий слизистых обо­лочек верхних дыхательных путей, куда вирусы гриппа заносятся аэрогенно. Во время короткого инкубационного периода вирус интенсивно репродуцируется в эпителиальных клетках, накапливаясь в количестве, достаточном для появления клинических симптомов. При попадании вирионов непосредственно в альвеолы может развиться первичная гриппозная пневмония. Пораженные эпителиальные клет­ки некротизируются и отторгаются, под действием нейраминидазы оголяются базальные мембраны, усиливается воспалительная реакция, что создает условия для массивного проникновения вирусов в кровь и присоединения вторичной бактериальной инфекции.

Вирусы гриппа легко преодолевают защитные барьеры организ­ма и проникают в кровь. Вирусемия возникает еще в инкубационном периоде и продолжается в течение нескольких дней. Проникшие в кровь вирусы распространяются по организму, заносятся в мышцы, сердце, ЦНС, почки и другие органы. Вирусы вызывают повреждение эритроцитов (действие гемагглютинина), эндотелия капилляров, нередко приводят к нарушению электролитного и кислотно-щелочного баланса. Как следствие, нарушается микроциркуляция, возникают множественные геморрагии и тромбоз, может развиться отек мозга и легких, дистрофия миокарда и другие осложнения.

С первых дней болезни наблюдается интоксикация и лихорадка. Основную роль в их развитии отводят поступающим в кровь биологи­чески активным веществам - серотонину, гистамину, простагландинам, кининам, которые образуются при распаде клеток.

Дата добавления: 2015-11-04