45. Шаров А.Н., Шевырев Н.С. Гринев А.А., Плотников Э.С. Препараты применяемые для диагностики туберкулёза животных // Ветеринария.-1978, №10.-С.43-50
46. Шишков В.П., Урбан В.П. Туберкулёз с/х животных //-М.-Агропромиздат.-1991.-с.254.
47. Chapinal N, Elkin BT, Joly DO, Schumaker BA, Stephen C. The primary use in indirect ELISA of secreted proteins Mb1761c and Mb2277 of M. bovis//J Immunoassay Immunochem.– 2012.Vol.33, N 3. –P 269-274.]
48. Cocle P.J. Fied evaluation of a novel differential diagnostic reagent for detection of Mycobacterium bovis in cattle clinical and vaccine//Immunology.-Vol. 13, N 10.- P. 119-1124
49. Doda K. Estimation of the sensitivity specificyand predictive valye of the intradermal tuberculin test // Iris ce veter.f., 1978,.325 p.
50. Downs, S.h., Meta-analysis of diagnostic test performance and modelling of testing strategies for control of bovine tuberculosis. /Downs, S.H. [et. all.]// Proceedings of the Society for Veterinary Epidemiology and Preventive Medicine., 2011. – P. 139-153.
51. Evaluation of gamma interferon (IFN-γ)-induced protein 10 responses for detection of cattle infected with Mycobacterium bovis: comparisons to IFN-γ responses./ W.R. Waters, [et.all] // Clin Vaccine Immunol. 2012. Vol. 19, N 3. – P. 346-351.
52. Jones G. J. Improved skin test for differential diagnosis of bovine tuberculosis by the addition of Rv3020c-derived peptides./ G. J. Jones A.Whelan, D. Clifford, M. Coad, H.M. Vordermeier//Clin Vaccine Immunol.–2012.– Vol. 19, N 4. P. 620-622.
53. Lepper A.V. Allergy to tuberculin in beef cattle./ A.V. Lepper, C.W. Pearson, L.A. Corner// Aust.Vet.J.–1977.– Vol. 53, N 5. – P. 214-216.
54. Liu, S. A novel fusion protein-based indirect ensmelinked immunosorbent assay for the detection of bovine tuberculosis // Tuberculosis. 2007. – Vol. 87, N 3. – P. 212-217.
55. Mikolajczek K.Krzyzaniak J., Lubenska B. Zastosowanie chromatografii cienkowarswowej do typowania mycobacterii.-Pneumol.Pol., 1980, N 6.-Vol.48, 375-381.
56. Pesciaroli M. Evaluation of the interferon-gamma (IFN-γ) assay to diagnose Mycobacterium bovis infection in pigs./Pesciaroli M Russo M, Mazzone P// Vet Immunol Immunopathol.– 2012. –Vol. 15. – P. 369-372.]
57. Plum N. Sur la little cintre la tuberculose // Dull.off.Internat.Epizoot.,1954, 42, 297-303.
58. Rapid Molecular Detection of Tuberculosis and Rifampin Resistance./ C.C. Boehme [at all.]. – New England Journal of Medicine. – 2010, Vol. 363/ – P. 1005-1015.
59. Screening of recombinant proteins as antigens in indirect ELISA for diagnosis of bovine tuberculosis../ I.I Souza [at. all.].// Springerplus.– 2012, 1:77 at: http://www.springerplus.com/content/1/1/77.
60. Strain, S.A. Bovine tuberculosis: A review of diagnostic tests for M. bovis infection in cattle/ S.A. Strain, J. McNair, S. W. J. McDowell// Agri-Food and Biosciences Institute, 2011.– 45 с. http://www.dardni.gov.uk/afbi-literature-review-tb-review-diagnostic-tests-cattle.pdf
61. Wilkinson D., Smith G.C.et al The effects of bovine tuberculosis (Mycobacterium bovis) on mortality in a badger (Meles meles) population in England // J.Zoology.-2000, 250: 3. – Р. 389-395.
ИММУНИТЕТ И СПЕЦИФИЧЕСКАЯ ПРОФИЛАКТИКА
Механизмы защиты организма при внедрении МБТ
Как известно, неспецифический иммунитет обеспечивается рядом защитных механизмов, эффективных против различных патогенов [31, 68]. Для его развития не требуется первичной индукции и направлен он на поддержание постоянства внутренней среды организма (гомеостаза). Этот вид иммунитета включает в себя ряд физических, физиологических и клеточных барьеров, регуляция и кооперация которых осуществляется значительным пулом медиаторов иммунного ответа (в том числе глобулины, циркулирующие иммунные комплексы, серомукоиды) [85, 106].
При хронических инфекциях решающую роль играют реакции клеточного иммунитета. Макрофаги млекопитающих являются связующим звеном между различными защитными механизмами иммунной системы и осуществляют влияние на пролиферацию иммунокомпетентных клеток. Их роль сводится к процессу подготовки антигена. Установлено, что существует группа монокинов, влияющих на дифференцировку и пролиферацию B-клеток.
Итог встречи макроорганизма с возбудителем туберкулёза в значительной мере определяется функциональным статусом фагоцитирующих и иммунокомпетентных клеток, реализующих реакции защиты.
Основным защитным звеном организма при внедрении в него МБТ является фагоцитоз. Поглотившая микроб клетка реализует свой бактерицидный эффект в первую очередь посредством кислородного взрыва, в процессе которого образуются активированные формы кислорода (АФК), инициирующие в мембранных структурах возбудителя процесс пероксидации липидов (ПОЛ) с последующим разрушением мембран. Избыток АФК способен обусловить повреждение не только микроба, но и самого фагоцита, поэтому фагоцитирующие клетки обладают собственной ферментативной системой антиоксидантной защиты (АОЗ).
Первым продуктом кислородного взрыва является высокотоксичный супероксиданион, который под влиянием супероксиддисмутазы (СОД) трансформируется в менее агрессивную перекись водорода (Н2О2). Однако в присутствии ионов железа и хлора из Н2О2 под действием пероксидаз генерируются наиболее токсичные АФК – гидроксил-радикал и гипохлорный анион. Поэтому активность каталазы, разлагающей Н2О2 на воду и молекулярный кислород, представляется ключевым фактором в системе внутриклеточной АОЗ. Соотношение между способностью клетки развивать кислородный взрыв при встрече с возбудителем и характером ответа со стороны АОЗ на гиперпродукцию АФК определяет как бактерицидный эффект, так и степень повреждения самого фагоцита в ходе конфликта.
По мере утяжеления процесса снижается способность клеток развивать кислородный взрыв при встрече с МБТ. При введении МБТ в организм животных в течение первых суток в альвеолярных макрофагах (АМ) возникает состояние окислительного стресса в виде резкого роста базального окислительного метаболизма при почти полной утрате клетками способности развивать кислородный взрыв в ответ на дополнительную стимуляцию. К моменту появления первых специфических изменений АМ становятся полностью ареактивными. В терминальный период инфекции в них нарастает концентрация конечного продукта ПОЛ – малонового диальдегида (МДА) и многократно увеличивается активность СОД и каталазы, способных выступать в роли биологических синергистов МБТ. В нефракционированном клеточном осадке (НФКО) бронхоальвеолярного смыва после заражения происходит мобилизация бактерицидного потенциала клеток при устойчивом балансе в системе ПОЛ–АОЗ, однако к моменту появления специфических изменений в органах показатели функционального статуса АМ и НФКО становятся идентичными.
Быстрой функциональной декомпенсации изолированных АМ сопутствует инертный уровень фактора активации тромбоцитов (ФАТ), тогда как в НФКО и циркулирующих лейкоцитах он значительно нарастает.
В литературе имеются данные, раскрывающие механизмы естественной резистентности животных разных видов к МБТ, связанные с различиями в метаболических реакциях фагоцитирующих клеток. Так, у морских свинок на ранних этапах развития инфекции в легочных фагоцитах возникает окислительный стресс с быстрой декомпенсацией клеток, приводящей к их полной ареактивности, а в циркулирующих лейкоцитах значительно снижаются их функциональные резервы. При этом во всех клетках интенсифицируются процессы ПОЛ с нарастанием активности СОД и каталазы. На фоне функциональной декомпенсации легочных и циркулирующих фагоцитов синтез ФАТ в них стабильно растет.
У крыс при аналогичной дозе заражения развитие базального окислительного метаболизма в фагоцититах, приводящее к критическому истощению функциональных резервов клеток, не наблюдается. На протяжении инфекционного процесса легочные фагоциты сохраняют способность адекватно отвечать на дополнительную специфическую стимуляцию развитием кислородного взрыва. Во всех видах фагоцитов через 1,5 месяца после заражения возрастает коэффициент стимуляции при встрече со специфическим возбудителем. Состояние АОЗ во всех видах клеток в течение первых двух недель после введения МБТ характеризовалось снижением активности одного или обоих ключевых её ферментов (СОД и/или каталазы), а в период возрастающей резистентности осуществлялась за счёт роста активности каталазы. Уровень МДА в легочных фагоцитах в ходе развития инфекционного процесса достоверно снижался, а в лейкоцитах крови стабильно сохранялся в пределах физиологической нормы. Уровень ФАТ в легочных фагоцитах возрастал в период инвазии и падал ниже контрольных значений при сформировавшейся резистентности. Наблюдалось повышение уровня ФАТ в циркулирующих лейкоцитах в момент максимального развития неспецифических воспалительных реакций с постепенным их снижением.
Особенности иммунитета при развитии туберкулёзной инфекции
Ряд авторов рассматривает иммунопатогенез различных хронических заболеваний, как иммуномодулирующее действие разных вакцин с позиций современных представлений о гетерогенности механизмов иммунного ответа. В 1986 г. T. Mosmann с соавт. [89] описали две альтернативные субпопуляции Т-хелперов (Th): Th1, продуцирующие ИЛ-2, ɤ-ИФН и лимфотоксин ФНОβ, основная функция которых – активация клеточно-опосредованной формы ответа в виде ГЗТ и цитотоксических Т-лимфоцитов (ЦТЛ), и Th2 – хелперы антителообразования, продуцирующие ИЛ-4, ИЛ-5, ИЛ-6, ИЛ-10 и ИЛ-13. Позднее были выделены дополнительные клоны: Th0, одновременно продуцирующие цитокины Th1 и Th2, а также Th3 – продуценты трансформирующего фактора роста (ТФРβ), которые регенерируются при энтеральном введении антигена в иммунной системе синтез Ig А.
Конкурентные отношения Th1 и Th2 обусловлены взаимным негативным влиянием основных дискриминативных цитокинов этих клонов – ɤ-ИФН и ИЛ-4. Важно, что Th1 и Th2 не только направляют антигенспецифический иммунный ответ по клеточному или гуморальному пути, но и инициируют в месте введения патогена воспалительные реакции двух типов ГЗТ с участием макрофагов, синтезирующих провоспалительные монокины ИЛ-1, ФНО и другие медиаторы воспаления, а также индуцируют гиперчувствительность немедленного типа с вовлечением тучных клеток, базофилов и эозинофилов.
Концепция гетерогенности Th сыграла значительную роль в расшифровке протективных механизмов иммунного ответа при инфекциях, вызванных различными возбудителями. Решающим условием эффективности того или иного типа иммунного ответа считают локализацию возбудителя – внутриклеточную или внеклеточную. Внутриклеточные патогены успешнее элиминируются с помощью клеточных механизмов иммунного ответа – триадой «естественные киллеры–ЦТЛ–макрофаги. Установлено, что CD14-связывающие молекулы грамотрицательных и грамположительных бактерий, а также их эндо- и экзотоксины индуцируют в макрофагах синтез ИЛ-12 – основного медиатора дифференцировки Th1 из нативных Т-лимфоцитов. Именно с индукцией ИЛ-12 и активацией клеточного иммунитета связывают как адъювантное действие M. tuberculosis, так и лечебный эффект вакцины БЦЖ. Уровень отвечаемости Т-лимфоцитов на ИЛ-12 рассматривают как важный фактор генетической предрасположенности к Th1-ответу или Th2-ответу на инфекционный агент.
При изучении иммунного статуса и неспецифической реактивности пораженных туберкулёзом животных установлено, что активный прогрессирующий процесс с распадом и бактериовыделением сопровождается депрессией Т-клеточного иммунитета, сдвигом соотношения субпопуляций Т-хелперов к Т-супрессорам в пользу последних, подавлением клеточного противотуберкулёзного иммунитета и активацией продукции антипротеиновых клеток. При благоприятном течении туберкулёза и абациллировании, закрытии полостей распада, уменьшении инфильтративных явлений активируется специфический клеточный иммунитет, а продукция антипротеиновых антител снижается.
Ключевую роль в формировании иммунитета к туберкулёзной инфекции играют альвеолярные макрофаги и различные популяции Т-клеток. Исход взаимодействия макрофагов и МБТ зависит от баланса антимикробной активности фагоцитирующих клеток и резистентности микобактерий к бактерицидному действию макрофагов [77].
Активация CD4+-клеток иммунной системы также сопровождается генерацией киллерных клеток, цитотоксическая активность которых реализуется исключительно в результате контактного взаимодействия с инфицированными клетками-мишенями и не связана с действием цитокинов. Такими свойствами обладает особая субпопуляция: γ-Δ-CD4-клетки. Цитотоксические Т-клетки не обеспечивают полную защиту от МБТ, однако обладают способностью ограничивать распространение инфекции. Поэтому развитие анергии γ-Δ-Т-клеток рассматривается как один из факторов неблагополучного течения туберкулёза. Развитие туберкулёзной инфекции сопровождается снижением относительного количества CD4-, CD8- и CD72-лимфоцитов, а также моноцитов, экспрессирующих антигены гистосовместимости. У зараженных особей с неблагоприятным течением инфекции наблюдается угнетение пролиферативной активности Т-клеток и продукции ИЛ-2, умеренное снижение продукции ИЛ-1 и повышенный уровень секреции ФНО.
Одним из факторов возникновения и развития туберкулезной инфекциии является снижение неспецифичской резистентности организма. При изучении биохимических показателей крови у крупного рогатого скота разных физиолого-возрастных групп, положительно реагирующего на туберкулин в неблагополучных по туберкулезу хозяйствах нами было установлено снижение концентрации витамина С и каротина в 2,0 и 2,2 раза соответственно, по сравнению с нижней границей физиологических значений, перераспределение белковых фракций в сторону увеличения глобулинов, а также снижение активности лизоцима. Для этих животных также характерным является также снижение показателя фагоцитарной активности нейтрофилов (до 23,2%) и коэффициента завершенности фагоцитоза (до 13,3%) с повышением фагоцитарного числа (до 15%) относительно значений нереагирующих животных.
Необходимо подчеркнуть, что практически во всех странах мира борьба с туберкулезом крупного рогатого скота основывается на своевременном выявлении и убое больных животных [40]. При этом не акцентируется внимание на выявлении и искоренении факторов биотического и абиотического происхождения, которые повышают риск возникновения и развития микобактериальной инфекции и действуют на организм опосредовано через иммунную систему, которая теряет способность предотвращать размножение и локализировать распространение микобактерий туберкулёза. Наиболее активными иммунодепресантами биологической природы являются патогенные ретровирусы, вызывающие такие заболевания как энзоотический лейкоз, артрит-энцефалита коз и ряд других, развивающихся с иммунодефицитным синдромом [43, 47, 50, 53]. В частности лейкоз – медленно, но прогрессивно развивающаяся инфекция, сопровождающаяся неспецифической манифестацией и вызывает в организме животных гормональный, метаболический и иммунологический дисбаланс [5, 30, 46]. При экспериментальном воспроизведении сочетанной с вирусом лейкоза крупного рогатого скота (BLV) туберкулёзной инфекцией показано, что вирус проявляет иммуноингибирующее действие и влияет на проявление аллергических реакций на ППД-туберкулин [10, 34, 43]. В то же время в доступной литературе отсутствуют данные о влиянии лейкозного процесса на развитие туберкулёзной инфекции при заражении условно-патогенными микобактериями M. аvium, в частности на экспрессию маркеров неспецифической природной резистентности организма животных.
В наших исследованиях была изучена динамика некоторых гуморального неспецифического иммунитета при микобактериальной инфекции, вызванной M. avium, у овец, зараженных BLV. Опыт проведен на трех группах овец 4-6 месячного возраста. На первом этапе опыта животным 1-й группы инокулировали по 1 мл крови (19 Г/л лимфоцитов) больной лимфолейкозом коровы. На втором этапе, через 5 месяцев после заражения BLV, овцы первой и второй групп были заражены культурой M. avium Животные 3-й группы оставались интактными (контроль). Через 30 суток после этого была проведены аллергические исследования всех животных путем введения ППД-туберкулинов для млекопитающих и птицы.
О динамическом развитии лейкозного процесса у инфицированных BLV овец на первом этапе опыта свидетельствует накопление в сыворотке крови специфических вирусу антител: к через месяц после заражения их титр составлял 1:4, через 4,5 месяца - 1:4 -1:16, а перед заражением M. аvium (через 4,5 мес. опыта) - 1:4 -1:8..
Необходимо отметить, что при туберкулинизации, проведенной через 4,5 месяцев после заражения BLV, у всех овец внутрикожных положительных реакций не наблюдали, что указывает на отсутствие ложноположительных реакций на туберкулин у инфицированных BLV животных.
Развитие реакций на туберкулины у животных 1-й и 2-й групп через 1 месяц после инфицирования M. аvium дает основание утверждать, что в организме овец начал развиваться микобактериозный инфекционный процесс.
Анализ результатов исследования факторов неспецифического иммунитета у овец, представленных в таблице 13, свидетельствует, что через 14 суток после инфицирования М. аvium у животных первой опытной группы происходит повышение уровня общего белка на 15,4% относительно показателей контроля (р≤0,05). У овец второй группы в этот период опыта установлена тенденция к повышению этого показателя: рост составляет 12,2%. В последующем уровень общего белка статистически вероятно повышается через 4 месяца после заражения микобактериями, когда этот показатель превышает контрольный уровень на 16,5%. В последующем существенных изменений уровня общего белка зафиксировано не было.
Повышение уровня глобулинов в динамике опыта было более выраженным: через 14 суток после заражения микобактериями у животных первой и второй групп этот показатель повысился на 49,8% и 48,3%, через 1 месяц – на 40,8% и 61,8%, через 4 месяца – на 21,5% и 36,0% соответственно. Через 8 месяцев после инфицирования микобактериями повышение концентрации глобулинов у овец первой группы составило 17,3%, второй – 26,5% (р≤0,05). При этом разница между показателями овец 1–й и 2–й групп в этот период составляет 13,3-7,5%.
Через 10 месяцев у овец, инфицированных BLV (1-я группа) уровень глобулинов был ниже контроля 18, 9% при этом у животных 2-1 группы этот показатель был на контрольном уровне.
Установленное повышение уровня глобулинов на начальных этапах развития инфекций можно расценивать как проявление активации белково-образующей функции клеток ретикулоэндотелиальной системы [86].
Важным показателем, характеризующим состояние гомеостаза белкового профиля организма, является альбумин-глобулиновый коэффициент, а его снижение свидетельствует об усиленном синтезе глобулинов.
Было установлено, что развитие как микобактериального, так и сочетанного ретровирусно-микобактериальных инфекционных процессов сопровождается динамичным изменением соотношения классов протеинов: у овец первой и второй групп максимальное снижение коэффициента А/Г, когда разница составляет 38,9% и 61,1%, соответственно через 1 месяц после инфицирования M. аvium. В последующем этот показатель у овец обеих групп увеличивается и через 6 месяцев после инфицирования микобактериями приближается к контрольным значениям. Дальнейшее развитие инфекционного процесса, вызванного M. аvium, приводит к снижению отношения А/Г, и через 10 месяцев не отличался от уровня в контрольной группе. У животных с сочетанным течением инфекционных процессов наблюдается повышение этого показателя на 50% относительно контроля.
Таблица 13. Динамика показателей неспецифического иммунитета у овец при сочетанном течении лейкозной и туберкулезной инфекции (M±m).
Группа | Общий белок, г/л | Глобу-лины, г/л | А/Г
| ЦИК, мг/мл | Sm, мг/мл |
До заражжения BLV | |||||
1 (BLV) | 57,5±4,6 | 27,2±-1,3 | 1,1±0,1 | 0,16±0,01 | 0,14±0,01 |
К (Контроль) | 58,7±2,5 | 28,3±4,4 | 1,15±0,23 | 0,15±0,01 | 0,16±0,01 |
Через 5 месяцев после заражения BLV | |||||
1 (BLV) | 72,3±2,90 | 41,3±2,3 | 0,75±0,07 | 0,26±0,01 | 0,16±0,01 |
К (Контроль) | 77,3±1,0 | 44,9±2,9 | 0,66±0,12 | 0,20±0,01 | 0,14±0,01 |
Через 14 суток после заражения M. аvium | |||||
1 (BLV+M. avium) | 83,9±3,5* | 49,6±2,0* | 0,69±0,02* | 0,23±0,01* | 0,12±0,01 |
2 (M. avium) | 81,6±2,9 | 49,0±3,3* | 0,67±0,06* | 0,20±0,01 | 0,13±0,01 |
К (Контроль) | 72,7±2,3 | 33,1±2,8 | 1,2±0,11 | 0,19±0,01 | 0,14±0,01 |
Через 1 месяц после заражения M. Avium | |||||
1 (BLV+M. avium) | 78,9±4,60 | 46,9±4,6* | 0,69±0,11* | 0,28±0,01* | 0,23±0,01* |
2 (M. avium) | 77,8±2,80 | 53,9±2,2* | 0,44±0,02* | 0,21±0,02 | 0,18±0,01 |
К (Контроль) | 71,2±0,93 | 33,3±1,1 | 1,13±0,07 | 0,21±0,02 | 0,16±0,02 |
Через 4 месяца после заражения M. аvium | |||||
1 (BLV+M. avium) | 77,8 + 2,6* | 47,9 + 2,0* | 0,55 + 0,05* | 0,22±0,01** | 0,23±0,01 |
2 (M. avium) | 72,3 + 6,2 | 53,6 + 3,3* | 0,48 + 0,05* | 0,27±0,01* | 0,24±0,01 |
К (Контроль) | 67,3 + 2,0 | 39,4 + 1,3 | 0,7 + 0,07 | 0,20±0,01 | 0,18 + 0,02 |
Через 6 месяцев после заражения M. аvium | |||||
1 (BLV+M. avium) | 68,6 + 1,5 | 39,6 + 1,85 | 0,75 + 0,05 | 0,19 + 0,05** | 0,225 + 0,05* |
2 (M. avium) | 71,8 + 3,2 | 43,4 + 4,45 | 0,7 + 0,1 | 0,28 + 0,01* | 0,20 + 0,005 |
К (Контроль) | 68,1 + 1,96 | 39,8 + 1,8 | 0,73 + 0,05 | 0,20 + 0,01 | 0,16 + 0,008 |
Через 8 месяцев после заражения M. avium | |||||
1 (BLV+M. avium) | 70,6 + 5,3 | 37,2 + 1,3* | 0,75 + 0,13* | 0,15 + 0,02* | 0,13 + 0,01* |
2 (M. avium) | 69,7 + 3,7 | 40,1 + 2,7* | 0,9 + 0,1 | 0,19 + 0,01 | 0,15 + 0,01* |
К (Контроль) | 63,3 + 0,9 | 31,7 + 0,8 | 1,03 + 0,07 | 0,23 + 0,01 | 0,18 + 0,07 |
Через 10 месяцев после заражения M. avium | |||||
1 (BLV+M. avium) | 77,8+3,65 | 36,1 + 2,8* | 1,05 + 0,25 | 0,15+0,01* | 0,25+0,005* |
2 (M. avium) | 71,9 + 1,6 | 42,5+4,0 | 0,84+0,09 | 0,17 + 0,05 | 0,12 + 0,01* |
К (Контроль) | 75,8 + 1,93 | 44,5 + 1,1 | 0,7 + 0,09 | 0,18 + 0,01 | 0,17 + 0,02 |
Примечание: * - разница статистически достоверна по отношению к контролю при р≤0,05.
Как известно, одним из медиаторов иммунного ответа являются ЦИК средней молекулярной массы (11-19 S), биологическая роль которых заключается в активации системы комплемента, а также эффекторых механизмов иммунитета посредством взаимодействия с клеточными рецепторами нейтрофильных гранулоцитов, что в результате запускает реакцию фагоцитоза [68].
Необходимо отметить, что развитие лейкозной инфекции сопровождается повышением концентрации ЦИК - через 5 месяцев после заражения BLV показатели опытной группы превышают контрольный уровень на 30,0%. Через 14 и 30 суток после инокуляции M. аvium, у овец 1-й группы уровень ЦИК был повышен на 21,0% и 33,3% соответственно. В последующие сроки этот показатель последовательно снижался и к концу исследования был меньше относительно контроля на 16,6%. Микобактериальная инфекция у интактных овец также сопровождалась накоплением этого медиатора иммунного ответа на протяжении 6-ти месяцев после заражения: в этот период их уровень превышает контрольные значения на 40,0% (р≤0,05). Затем происходит снижение интенсивности образования ЦИК: через 8 месяцев превышение составляет лишь 17,4% относительно контроля, а через 10 месяцев показатели 2-й и 3-й групп практически не отличались.
Серомукоиды – мукополисахариды сыворотки крови, которые относятся к белкам острой фазы, по данным литературы, могут блокировать рецепторы В-лимфоцитов, что обуславливает их иммуносупрессирующее действие на гуморальный иммунитет. Как известно, накопление Sm в сыворотке крови наблюдается при различных онкологических и инфекционных заболеваниях [6; 42].
При проведении исследований установлено, что введение M. аvium, вызывает существенное накопление Sm в сыворотке крови через 4 месяца после инфицирования, когда их уровень был повышен на 33,3% относительно контроля. В последующие сроки опыта их концентрация снижается, причем через 10 месяцев после инфицирования установлено статистически достоверное снижение их концентрации относительно контроля, которое составляет 24,4% (р≤0,05).
Анализ полученных данных свидетельствует, что лейкозный процесс оказывает влияние на синтез Sm у животных, инфицированных M. аvium: через 1 месяц их концентрация превышает контрольные показатели на 43,7%, через 4 месяца – на 22,1%, 6 месяцев - 40,6%. 8 месяцев – на 22,7%. а через 10 месяцев - на 47,0 (р≤0,05). Полученные данные изменения уровня Sm могут свидетельствовать о нарушении общего обмена белковых молекул а также указывать на развитие иммунодепрессивного состояния в организме животных [6], особенно выраженного у овец, инфицированных BLV.
Разработка противотуберкулёзных вакцин и их классификация
Вакцинация людей и животных является одним из наиболее эффективных методов специфической профилактики туберкулёза.
Впервые вакцина БЦЖ была использована для противотуберкулёзной иммунизации людей в 1921 г. С тех пор она завоевала признание во многих странах и с начала 90-х гг. вакцинация людей против туберкулёза является обязательной в 64 странах и официально рекомендована в 118 странах и территориях.
Как и в случае с другими убитыми или живыми аттенуированными вакцинами, при введении БЦЖ иммунная система организма сталкивается с исключительно сложным набором антигенов. Цельноклеточные вакцины и сложные по составу смеси (фракции клеточных стенок или цитоплазматическая фракция) иммуногенны и содержат собственные встроенные в мембраны иммуностимулирующие молекулы. Большое количество презентируемых эпитопов обеспечивает эффективность препарата при вакцинации генетически гетерогенной популяции. Многочисленные антигены таких вакцин конкурируют за презентирующие клетки, а иммунодоминирующие антигены не всегда индуцируют максимальную протекцию или их экспрессия транзиторна.
Количество антигенов в вакцине можно свести к ограниченному набору молекул, важных для индукции протективного иммунитета и постоянно экспрессируемых антигенов. Простота строения белковых субъединиц нередко приводит к снижению их иммуногенности, что обуславливает применение в составе вакцин мощных иммуностимуляторов или адъювантов.
Альтернативой субъединичным вакцинам могли бы стать так называемые ДНК-вакцины, в которых вместо микробного антигена используется кодирующая его полинуклеотидная последовательность. К преимуществам этого типа вакцин следует отнести их сравнительную безопасность, дешевизну изготовления и введения, а также и стабильность в организме. Недостатком же является слабая иммуногенность и ограниченное количество антигенных детерминант.
Дата добавления: 2015-10-21; просмотров: 19 | Нарушение авторских прав
| <== предыдущая лекция | | | следующая лекция ==> |