Антигельминтные препараты фенотиазин, гексахлорэтан (фасциолин), дертил «О», «Б» (нихлофолан) – 1–4 таблетки полностью подавляют первоначальную чувствительность кожи к туберкулину у крупного рогатого скота в пределах 6–9 мм. Частичное восстановление чувствительности кожи к туберкулину проявляется через 30–35 дней. Внутримышечное введение четыреххлористого углерода в форме 50% раствора в минеральном масле в дозе 0,1 мг/кг у коров не вызывает появлений реакций на туберкулин, а у ранее реагирующих животных на аллерген подавляет чувствительность.
Из вышеуказанных данных следует, что не эффект дезинвазии фасциолеза, а различная фармакодинамика антигельминтных средств является депрессирующей (причиной снижения) для аллергической реактивности животных к туберкулину.
Одновременное введение формолвакцин против ящура или паратифа полностью подавляет первоначальную реакцию в пределах 10–14 мм у коров на туберкулин в течение 35 дней.
С учетом того, что для дезинфекции и инактивации вирусов и др. микроорганизмов при изготовлении вакцин и анатоксинов используется формалин, β-пропилактон, глутаровый альдегид и полиэтиленгликоль было проведено изучение влияния указанных препаратов на аллергенные свойства туберкулина. Установлено, что аллергенная активность туберкулина ППД для млекопитающих в объеме 1 мг/мл полностью инактивируется в смеси с указанными препаратами при исследовании на реагирующем крупном скоте на туберкулин. При этом такой туберкулин способен десенсибилизировать чувствительность животных к аллергену.
Для дифференциации аллергических реакций рекомендовано использование сенситинов из атипичных микобактерий и комплексного аллергена из атипичных микобактерий (КАМ), а также одновременне применение туберкулина для млекопитающих и птиц удается дифференцировать парааллергические реакции [25].
По заключению ряда авторов [22; 42; 55] использование симультанной пробы с одновременным применением сенситинов из атипичных микобактерий дает возможность дифференцировать аллергические реакции.
По данным А. Н. Шарова с соавт. [45] животные, сенсибилизированные атипичными микобактериями в большей степени реагируют на КАМ, а в неблагополучных по туберкулёзу хозяйствах крупный рогатый скот преимущественно реагирует на ППД-туберкулин для млекопитающих.
С целью улучшения специфичности и активности туберкулинов В. П. Урбаном с соавт. [43] из штамма № 1165 был изготовлен аллерген ЛВИ, а безальбумозный туберкулин А. А. Евглевским [12], которые по специфичности и активности превосходили стандартный ППД-туберкулин Курской биологической фабрики.
Из приведенных литературных данных можно сделать вывод, что проблема дифференциации неспецифических аллергических реакций в связи с их многопричинностью выходит на первый план и её безотлагательное решение может значительно сократить экономические затраты на диагностические исследования. Более глубокое изучение механизмов аллергических реакций поможет в будущем решить эти проблемы.
Механизмы развития аллергических реакций при туберкулезе
Необходимо отметить, что туберкулёз относится к заболеваниям, при которых аллергия участвует как обязательный компонент основного патологического процесса. Поэтому диагностика аллергического состояния организма есть диагностика основного заболевания. Клиническое проявление аллергического процесса весьма разнообразно, механизм его пока недостаточно изучен. Кроме специфической аллергии, организм в одних случаях проявляет одновременно повышенную чувствительность к некоторым химическим родственным аллергенам – пример поливалентной аллергии, в других случаях проявляется чувствительность к чужеродным аллергенам – пример псевдоаллергии, а в некоторых случаях наблюдается аллергия к «своим» органам, тканям, которая получила название ауто-, или эндоаллергия.
Следовательно, в ответ на контакт с антигенами микробов, вирусов, паразитов у животных может развиться повышенная чувствительность различных типов. Повышенная чувствительность замедленного типа характерна для инфекций при которых возбудитель находится внутриклеточно.
Вследствие все еще недостаточности знаний о структуре аллергизирующих соединений – точная стандартизация аллергенов затруднена. В иммунном ответе главную роль играют лимфоциты, которые с помощью рецепторов распознают антигены, точнее антигенные дерминанты (эпитопы).
У белков замена даже одной единственной аминокислоты может изменить специфичность аллергена. Для аллергенной и антигенной специфичности белков имеет значение их конформация.
В связи с этим достаточно незначительных структурных вариаций в аллергенной детерминанте, чтобы изменить его специфичность. Специфичность аллергенной детерминанты проверяется по реакции взаимодействия с гомологичным антителом.
Изменение последовательности молекул и конформационных детерминант аллергена существенно влияет на его специфичность. Например, денатурация белков приводит к потере некоторых конформационных тереминант. В то же время проявляются новые детерминанты, которые были ранее скрыты внутри молекулы. Денатурированные белковые молекулы аллергена полностью или частично теряют свою аллергенную специфичность и приобретают новую, которая отражается на аллергической реакции. Специфичность выражается в том, насколько точно аллергенная детерминанта «признана» к аллергенсвязывающему центру антитела или рецепторам лимфоцитов. Комплементарность антидерминанты у специфического (гомологичного) аллергена выше, чем у перекрестно реагирующего. В основе взаимодействия перекрестно реагирующих аллергенов лежит структурное подобие или полное сходство с детерминантами специфического аллергена. Отсутствие теоретического освещния и знаний о молекулярной структуре аллергизирующего комплекса микобактерий, а многократное применение концентрации и очистки туберкулиновых аллергенов, с помощью трихлорукусной и уксусной кислот, сернокислого аммония, аммиака, нарушающие химический состав и конфигурацию детерминант аллергена нуждается в необходимости использование щадящих средств воздействия на аллерген при его изготовлении.
Гиперчувствительность (синоним – аллергия) замедленного типа считается проявлением клеточного иммунитета, поэтому она переносится не сывороткой, а лимфоцитами.
В целом разделение аллергии на гиперчувствительность замедленного и немедленного типов имеет лишь историческое значение. В связи с разнообразием изотипов иммуноглобулинов (антител) широкое применение реакций четырех типов, разработанные английскими иммунологами Джел и Кумбс. В реакции первого типа, именуемой анафилактической, участвуют антитела (реагины), связанные с тучными клетками, в реакции второго типа (цитоксической) взаимодействуют антитела и комплемент. В реакциях третьего типа участвуют преципитирующие локальную реакцию – феномен Артюса или васкулит. Патологические реакции четвертого типа обусловлены функциональной активностью Т-лимфоцитов, макрофагов, базофилов и т.д.
В настоящее время известно свыше 15 тысяч веществ, обладающих аллергизирующими свойствами в отношении организма людей, животных и птиц с различной степенью выраженности и длительности.
В то же время при туберкулёзе у животных развивается стойкая длительная аллергия, которая может утрачиваться под воздействием различных физиологических состояний и внешних стрессовых воздействий и вновь появляется.
Как правило, состояние пара- и псевдоаллергии со временем пропадают и не обнаруживаются при повторных исследованиях. На ответную реакцию кожи на туберкулин может оказывать значительное влияние общее состояние животных, температура окружающей среды, вакцинации, инфицированность вирусами, грибами, медикаментозное лечение, микроклимат. Установление истинной этиологии сенсибилизации организма возможно путем одномоментного применения набора видовых туберкулинов и других аллергенов и использование методов серодиагностики и аллергодиагностики вне организма.
Все вышеуказанное свидетельствует, что разные виды аллергии создают трудности в распознавании истинной этиологии аллергического состояния организма приемами моноаллергодиагностики, ввиду того, что в эпизоотической ситуации туберкулёзный процесс нельзя рассматривать как инфекцию, вызываемую только однокачественными видовыми возбудителями. Инфицированность, а следовательно, и сенсибилизация людей, животных, птиц происходит различными микобактериями и другими возбудителями. Об этом свидетельствуют перекрестные реакции на туберкулин. Достоверность аллергической диагностики туберкулёза животных зависит не только от формы течения инфекции, специфических свойств и активности аллергена, но и от той эпизоотической обстановки, в которой происходит взаимодействие организма с возбудителем, формируется инфекционный процесс, а также от физиологического состояния организма.
Применяемые туберкулиновые аллергены по содержанию туберкулиновых единиц различны и использование таких препаратов в симультанной пробе может вызывать недостоверные показатели в дифференциальной диагностике.
При аллергических исследованиях часто выявляются реагирующие животные на туберкулин, но туберкулёз у них не подтверждается. Такие реакции называют неспецифическими. Природа ложных аллергических реакций на туберкулин, внешне сходных с истинными, остается невыясненной. В то же время имеются сообщения о недовыявлении больных туберкулёзом животных при туберкулинизациях, в связи с чем возникают трудности в достоверности туберкулиновой пробы.
В исследованиях под электронным микроскопом установлено, что после выброса гранул сенсибилизированные тучные клетки полностью сохраняют жизнеспособность и об их повреждении говорить не приходится. Таким образом, одна и та же сенсибилизированная тучная клетка может по много раз вовлекаться в аллергические реакции. Рядом авторов были проведены повторные аллергические исследования не через 30 дней, как предусмотрено в наставлении по применению туберкулинов, а через 5-7 дней и получены адекватные реакции на аллерген у коров и у морских свинок после 4-х туберкулинизаций. Полученные результаты дают возможность проводить повторные туберкулинизации и в том числе симультанные в сокращенные сроки. Подтверждением вышеизложенному является проведение двойной туберкулинизации через 72 часа.
Следовательно, фасциолез, некробактериоз и мастит у коров, а у свиней лептоспироз, пастереллез и синдром гипогликемии не являются причиной неспецифических реакций на туберкулин, а формолвакцины и ряд антигельминтных препаратов подавляют чувствительность кожи к туберкулину свыше 30 дней.
Представленные результаты экспериментов необходимо иметь в виду при планировании и разработке регламентации сроков и действия противопоказаний к проведению аллергической диагностики туберкулёза у животных.
В связи с вышеизложенным при проведении аллергической диагностики туберкулёза крупного рогатого скота на практике надо рассматривать реагирующих на видовые туберкулины как подозреваемых в заражении их туберкулёзом. В этих случаях подтверждают диагноз данными паткартины и бактериологическим исследованием с биопробой. Только весь комплекс исследований поможет поставить правильный диагноз на туберкулёз у крупного рогатого скота.
Микобактерии туберкулёза, поглощенные макрофагами, попадают в лизосомы, в которых, происходит их полное или частичное расщепление. При полном распаде антиген теряет способность образования антител и к нему развивается иммунологическое толерантность, а при не полном антиген из лизосом вновь появляется на поверхности макрофагов с помощью информационной РНК. Такой видоизмененный аллерген вступает в контакт с рецепторами, находящимися на поверхности определенных клонов В-лимфоцитов и запускает синтез специфических антител.
Сенсибилизирующие антитела или иммуноглобулины типа «Е-реагины» (иногда называют кожносенсибилизирующими), бивалентны: одним концом они соединяются с клетками кожи, макрофагов или внутренних органов, а другим способны присоединять соответствующий аллерген.
Простой контакт аллергена с реагином на поверхности макрофага вызывает через систему циклических нуклеотидов усиление его секреторной функции и выделение гистамина, серотонина, брадикинина, гранул в тканевую среду.
Другие непрямые методы диагностики туберкулеза
По данным отечественных и зарубежных ученых аллергический метод диагностики со временем теряет значение в оценке наличия инфекции у разных видов животных [8; 29]. В настоящее время наиболее активно развивается направление, связанное с применением для диагностики туберкулеза серологических методов, в первую очередь иммуноферментного анализа (ИФА) для широкого внедрения в ветеринарную практику [42; 53] и иммунохроматографии [38]. Показано [47] что применение ИФА с использованием высокоиммуногенных пептидов из микобактериальных антигенов позволяет выявлять туберкулезную инфекцию до появления позитивной реакции в кожной пробе. Одним из новых подходов в диагностике инфекционных заболеваний животных, в том числе и туберкулеза, является анализ статистического распределения в стаде уровней антител, определяемых с помощью ИФА. Кроме того, как указывают Т.А. Редчук и соавт. (2010), [38] такой подход к оценке эпизоотологического статуса стада позволяет избежать методологической проблемы выбора контролей в связи с тем, что статус отдельного животного не играет определяющей роли. Исследователи питают большую надежду на повышение специфичности иммуноферментного анализа, в том числе с использованием рекомбинантных белков [38; 54]. Авторами были получены рекомбинантные аналоги антигенов МРВ63 и МРВ83 M. bovis, которые являются высокоиммуногенными и могут оказаться перспективными при разработке средств диагностики туберкулеза.
При проведении скрининга рекомбинантных белков ESAT-6, Mb0143, MPB83, PE5, PE13, TB10.4, TB15.3 и химеры ESAT-6/MPB70/MPB83 (слитый белок) в непрямом варианте ИФА наивысшую степень совпадений с внутрикожной аллергической пробой продемонстрировал последний антиген, при этом чувствительность теста составляла 83,2%, а специфичность –85,6% [58].
Для подтверждения или исключения наличия туберкулезного процесса у людей и животных могут использоваться также верифицирующие методы. Наибольшее значение придается так называемому провокационному тесту. О.Т. Титаренко и соавт. (2006) [4] утверждают, что в последние 20 лет к числу наиболее перспективных маркеров туберкулезного процесса стали относить показатель активности фермента аденозиндезаминазы (АДА), повышение уровня которого по диагностической ценности превосходит большинство биохимических показателей, использующихся во фтизиатрии. Это связывается с ролью АДА в пролиферации и дифференциации лимфоцитов и созревании моноцитов, формировании клеточного иммунного ответа, в пользу чего свидетельствует ряд факторов: антигенная стимуляция сопровождается повышением активности АДА, увеличение ее активности в сыворотке крови свойственно заболеваниям, характеризующимся напряженностью клеточного иммунитета.
Заслуживает внимания используемая в медицинской практике градуированная накожная туберкулиновая проба Гринчар–Карпиловского, котрая проводится с различными разведениями цельного туберкулина [6]. Сущность этого метода состоит в том, что детям с положительными пробами Манту проводилась индивидуальная туберкулинодиагностика – накожная градуированная проба Гринчар–Карпиловского, с 100%, 25%,5% и 1% растворами туберкулина. Для этого проводили скарификацию кожи оспенным пером, а также прик-ланцетом, который имел ограничитель глубины укола, с последующим нанесением капель разных разведений туберкулина. В результате проведенных исследований был сделан вывод, индивидуальная туберкулиновая диагностика по накожной градуированной пробе Гринчар–Карпиловского повышает возможность установить инфекционную природу аллергической реакции, а использование прик-теста позволяет получить более объективные результаты.
Кроме этого, для прижизненной диагностики туберкулеза рекомендуют реакцию пролиферации лимфоцитов [27], определения иммуноглобулина G и интерлейкина-4, разрабатываются и другие методы – микросферных тестов, и спектрофотометрии гемолизатов. Важным условием успешного применения этих методов является использование тех антигенов микобактерий, которые являются наиболее иммуногенными и характерными только для патогенных штаммов M. bovis, что позволяет дифференцировать их от вакцинных и сапрофитных штаммов.
Гамма-интерфероновый тест широко применяется за рубежом в качестве вспомогательного метода для диагностики туберкулеза крупного рогатого скота При инкубации с антигенами M. bovis иммунные клетки, присутствующие в крови сенсибилизированного микобактериями организма, реагируют выбросом химических медиаторов. При этом наиболее интенсивно продуцируется γ- интерферон, который рассматривается как ключевой цитокин при туберкулезном процессе и продуцируется разнообразными типами клеток, но главным образом – Т-лимфоцитами, что приводит к каскаду иммунных реакций, в первую очередь активации макрофагов.
В последнее время активно возвращаются к разработке серологических методов прижизненной диагностики туберкулеза. При сравнительной оценке этих тестов (флюресцентный анализ, мультиантигенный иммуноферментный анализ) с показателями внутрикожной туберкулиновой пробы не получено однозначных ответов о наличии инфекции M. bovis у животных.
Существующие различия в сравниваемых показателях, по мнению Chapinal N, и соaвт. (2012) [47] обусловлены тем, что указанные диагностические тесты определяют различные иммунологические реакции: серологические определяют состояние гуморального иммунитета, а внутрикожный – клеточного. При этом нужно учитывать и влияние на эти показатели состояние иммунного статуса животных на различных стадиях инфекции. В связи с этим исследователи считают необходимым не прекращение, а продолжение дальнейших исследований для создания диагностических тестов, которые в сочетании позволят эффективно контролировать эпизоотическую ситуацию.
В диагностике человека и крупного рогатого скота обещающе показал себя гамма-интерфероновый тест (INF-) Waters WR и соавт. установили, что с помощью этого метода можно устновить состояние инфицирования уже на 29-й день после заражения при высокой кореляции (r=0,87) [51].
Доказано, что этот диагностический тест у свиней экспериментально зараженных M.bovis, по утверждению Pesciaroli M. (2012) [56] имеет специфичность 100%, а чувствительность oт 78.9-84.6%, что позволяет эффективно оценивать эпизоотическую ситуацию и управлять эпизоотическим процессом.
В наших исследованиях было использован метод радиальной иммунодиффузии для исследования динамики индукции преципитинов при экспериментальном заражении морских свинок.
Антигены для постановки РИД готовили следующим образом. Культуру микобактерий (штамм БЦЖ), выращенную на жидкой синтетической питательной среде для выращивания микобактерий туберкулеза в течении 55–60 суток, отделяли от культурального фильтрата и разрушали на ультразвуковой установке «УЗДН» при мощности 22 кВт в течение 30 минут.
Полученная суспензия разрушенных клеток микобактерий с концентрацией белка 9,8 мг/см3 служила в качестве антигена А – «Аг‑а».
В качестве антигенов использовали также нативный фильтрат БЦЖ с концентрацией нуклеотидов 0,02 мг/см3 «Аг‑КФн», а также фильтрат БЦЖ после термической обработки при 2·105 Па (2 атм.) в течение 2 часов, с концентрацией белка 1,1 мг/см3 «Аг‑КФт».
В дальнейшем суспензию «Аг‑а» центрифугировали при 1000 об./мин и получали надосадочную жидкость с концентрацией белка 5,7 мг/см3, которая служила в качестве антигена в – «Аг‑в». Суспензию «Аг‑в» центрифугировали при 2000 об./мин, осадок удаляли, а надосадочная жидкость с концентрацией белка 4,8 мг/см3 использовалась в качестве антигена С – «Аг‑с».
Цитозоль антигена Z «Аг‑g» (надосадочная жидкость) получен при центрифугировании суспензии «Аг‑g» в вакуумной центрифуге при 100000 g, с концентрацией белково-нуклеотидных компонентов 1,4 мг/см3.
При постановке РИД с сыворотками, полученными через 15 суток после заражения, линии от зараженных возбудителем туберкулеза бычьего вида (штамм Vallae), полученных через 15 суток после заражения линии преципитации (по одной дуге) с испытуемыми антигенами обнаружены на антигены «Аг‑а», «Аг‑в», «Аг‑z» и «Аг‑КФт» через 48 часов после постановки реакции
Сыворотки, полученные через 30 суток после заражения давали по 2 линии преципитации через 24 часа после постановки РИД с антигенами «Аг‑а», «Аг‑КФт», тогда как через 48 часов – по одной еле заметной дуге с антигенами «Аг‑в», «Аг‑с», «Аг‑g».
Таблица 12. Результаты постановки РИД на изучаемые антигены с сыворотками животных, зараженных возбудителем туберкулеза бычьего вида
Испытуемые антигены | Результаты РИД | ||
Аг-а | + | + | — |
Аг-в | — | + | — |
Аг-с | — | + | — |
Аг-g | — | + | — |
Аг-z | — | + | — |
Аг-КФт | + | + | — |
На 60-е сутки преципитины в сыворотке крови морских свинок небыли выявлены, что, по-видимому, связано с развитием у животных с диффузным туберкулезным поражением, состояния анэргии.
Эти данные могут служить отправной точкой при разработке серологического теста, контролирующего иммунную реактивность и состояние развития туберкулёзной инфекции у больных животных.
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ
1. Абрамов Л.П. Материалы по аллергической диагностике туберкулёза у крупного рогатого скота // Автор.дис.канд.вет.наук.-Л.,1957.–16 с.
2. Авербах М.М Иммунология и иммунопатология туберкулёза. М., Медицина., 1976.–311 с.
3. Агапова М.Ф. Микобактериальные и немикобактериальные факторы сенсибилизации организма в проявлении неспецифических туберкулиновых реакций. М.Ф. Агапова, М.В. Качкин //Научн. Обеспечение АПК Сибири, Монголии, Казахстана, Беларуси и Башкортостана.–Новосибирск, 2002.– С. 371-373.
4. Аденозинаминаза в комплексной диагностике различных форм внелегочного туберкулеза/ О.Т. Титаренко [и др.].// Проблемы туберкулеза и болезней легких.– 2006. – № 11. –С. 14-18.
5. Благодарный Я.А., Блехман Н.М. Вопросы природной очаговости туберкулёза и микобактериозов.- В кн.: Природно-очаговые антропозоонозы, Омск.- 1976.-С.76-78.
6. Бородулина Е.А. Индивидуальная туберкулиновая проба прик-тестом./ Е.А. Бородулина, Б.Е. Бородулин.// Проблемы туберкулеза и болезней легких.– 2006. – № 3. –С. 33-35.
7. Бусол В.О. Рушійні сили епізоотичного процесу при туберкульозі великої рогатої худоби./В.О. Бусол, В.А. Ситник, В.М. Шевчук// Вісник Сумського національного аграрного університету. Серія Вет. Медицина. – 2004.– № 8.– С.27-30.;
8. Визначення природи на туберкуліну великої рогатої худоби шляхом застостосування симультанної алергічної проби / Ю.Кассіч, [и др.] // Ветеринарна медицина України. – 2001 – № 5. – С. 14-15.;
9. Гутира Ф. Частная патология и терапия домашних животных./ Ф.Гутира, И Марек.//М., 1931.– С.609-755.
10. Гутман Р.Г. Опыты над туберкулёзными коровами с «кохином».-Уч.записки Казанского вет.института. т.8, 1891, с.12.
11. Донченко А.С. Диагностика туберкулеза крупного рогатого скота./А.С. Донченко, Н.П. Овдиенко, Н.А. Донченко// Новосибирск, 2004. –309 с.].
12. Евгевский А.А. Экспериментальное обоснование и практические аспекты диагностики и профилактики инфекцинно-аллергических болезней животных // Дисс.доктора вет. наук.-Л.-1990.-332с.
13. Евглевский А.А. Диагностика и профилактика антропозоонозного туберкулеза./ А.А. Евглевский, М.В. Коломиец.//- Учебное пособие.–Курск, 2004.– 76 с.].
14. Евглевский А.А., Коваленко А.М. Специфическая диагностика и профилактика туберкулеза // Аграрный вестник Причорноморья: сб. научн. трудов.- 1999.- N 2(7).- С. 27-28.
15. Зеленська, М. Особливості внутрішньовенної туберкулінової проби при туберкульозі та мікобактеріальній інфекції великої рогатої худоби./ М. Зеленська, Г. Хільченко, Л. Ковальова та ін. – //Ветеринарна медицина України. – 2003.– № 12.– С. 11-13]
16. Ильина Т.Б. Современное состояние проблем туберкулёзных микобактерий и микобактериозов // Актуальные вопросы лабораторной диагностики туберкулёза.- Труды Ленинградского НИИ туберкулёза.,Л.-1976.-с.23-31.
17. Ильясов А.Ф. Пути профилактики и оздоровления хозяйств мясного направления от туберкулёза крупного рогатого скота: Автор. Дисс...канд.вет.наук..-Новосибирск.-1981.-с.19.
18. Каминская Г.О. и соав. // Проблемы туберкулёза.-1991.-№6.- С.55-58.
19. Кокуричев П.И. Туберкулёз домашних млекопитающих и птиц.- Архив патологии, 1974, т.36, №12, с.83.
20. Кокуричев П.И. Туберкулёз сельскохозяйственных животных, М.-1954.-с.105.
21. Кокуричев П.И. Туберкулёз сельскохозяйственных животных, Сельхозгиз.-М.,1954.-с.253.
22. Кокуричев П.И., Кудрявцев А.И., Юшманов В.В. О применениии туберкулино-симультанной пробы для диагностики птичьего туберкулёза у крупного рогатого скота.-Сб.трудов ЛВИ, Л.,1962,вып.24.-С.20-27.
23. Колокшанский В.А.,Мандрик Р.М. Моделирование на лабораторных животных псевдоаллергических реакций на туберкулин.-В кн.:Животноводство на промышленную основу, Кишенев,1975.-С.110-112.
24. Кузин А.И. Латентная туберкулёзная инфекция и ее значение в эпизоотологии туберкулёза крупного рогатого скота.-дисс...докт.вет.наук., М.-1978.-с.271
25. Кузин А.И., Шлынов Л.А. Парааллергические реакции на туберкулин у крупного рогатого скота // Материалы науч.-произв конф. вет.раб., Вологда,Северозападное кн.изд.,1974.– С.70.
26. Лебедева, Л.В. Чувствительность к туберкулину и инфицированность микобактериями туберкулеза детей./ Л.В. Лебедева, С.В. Грачева.//Пробл. туберкулеза и болезни легких.– 2007.–№ 1.– С. 5-9.
27. Макаров, М.В. Идентификация микобактерий методом высокоэффективной жидкостной хроматографии./ М.В. Макаров, М.А Краснова, А.М. Мороз// ЖМЭИ. – 2009. – № 3.– С. 64-66.
28. Микобактериоз, вызванный Mycobacterium xenopy, у крупного рогатого скота/ А.А.Лозовская [и др.]// Проблемы туберкулеза и болезней легких.– 2006. – № 3. –С. 50-52.
29. Найманов, А.Х. Актуальные вопросы аллергической диагностики туберкулеза крупного рогатого скота методом внутрикожной туберкулиновой пробы (история применения и современной состояние)/ А.Х. Найманов.// Современное состояние и перспективы исследований по инфекционной и протозойной патологии животных, рыб и пчел. Материалы международной научно-практ. конф. 2008. – М., 2008, – С.173-183.]
30. Найманов А.Х. Совершенствование аллергической диагностики у крупного рогатого скота // Автор.дисс… канд.вет.наук.-М.,1981.-17 c.
31. Нуратинов Р.А., Способы применения туберкулина в аллергической диагностике туберкулеза животных: Обзор/ Р.А., Нуратинов //Вестник ветеринарии. – 2000. – № 15 (1).– С. 71-77
32. Особенности бактериовыделения и лекарственной устойчивости микобактерий при внелегочном туберкулезе/ Б.И. Вишневский [и др.]// Проблемы туберкулеза и болезней легких.– 2006. – № 11. –С. 18-21.
33. Патент на изобретение № 2455364 «Способ идентификации микобактерий с помощью полимеразной цепной реакции», зарегистрирован 10.07.2012, срок действия до 02.07.2030.. Авторы: Коваленко А. М., Сапегин В.М., Шеховцов А.Ю.
34. Поддубский И.В. Успехи и перспективы науки и практики в ускорении туберкулёза // Ветеринария.-1967, №10.-С.38-40.
35. Помыканов В.П. Диагностика туберкулеза крупного рогатого скота индивидуального пользования./ В.П. Помыканов//Ветеринарная патология.–2004.–№ 1-2.– С.153-154.
36. Применение полимеразной цепной реакции для оценки эффективности химиотерапии туберкулеза легких/ А.А. Александров [и др.]//Проблемы туберкулеза и болезней легких.– 2006. – № 1. –С. 52-55.
37. Ротов В.И.и соавт. Туберкулёз с/х животных // Киев.-Урожай.-1978.-с.246.
38. Статистический анализ распределения уровня антител к антигенам Mycobacterium bovis при диагностике крупного рогатого скота./ Т.А. Редчук, [и др.].// Цитология и генетика.– 2010.– № 5.– С. 23–30.
39. Тузова Р.В.Патогенез туберкулёза птичьего типа у млекопитающих // Проблемы туберкулёза.- 1966, №1.-С.65-66.
40. Урбан В.П., Мартма О.В. Аллергические реакции у свиней сенсибилизированных атипичными микобактериями // Сб науч.трудов ЛВИ.Л.,1973, вып.34, С.135-143.
41. Урбан В.П.,Широбокова М.М., Зубков А.П., Калишин Н.М. Аллергические реакции у крупного рогатого скота туберкулёзного изолятора.-Сб.тр.ЛВИ,Л.,1969,вып.30.-С.83-88.
42. Урбан В.П.,Широбокова М.М., Зубков А.П., Калишин Н.М. О специфичности туберкулиновой пробы при диагностике туберкулёза крупного рогатого скота //Претворение в жизнь Ленинского кооперативного плана строительства сельского хозяйства.-Л.-1971.-вып.5.-С.28-29.
43. Урбан В.П.,Широбокова М.М., Калишин Н.И. Диагностика туберкулёза с/х животных // Учебное пособие для ветврачей.-Л.,1974.-с.34.
44. Ускоренная идентификация микобактерий с помощь. Лазерной флюоресценции/ М.А. Иванова [и др.] – ЖМЭИ. – 2009. –№ 3. – С. 81-85.].
Дата добавления: 2015-10-21; просмотров: 18 | Нарушение авторских прав
| <== предыдущая лекция | | | следующая лекция ==> |