Отбор животных-продуцентов и гипериммунизация

Для приготовления диагностических сывороток чаще всего исполь­зуют кроликов и морских свинок. Для приготовления преципитирующей сыворотки для постановки реакции Асколи используют лошадей.

Животные-продуценты должны быть клинически здоровыми, средней и выше средней упитанности, свободными от накожных паразитов.

На активность выработки животным антител влияют тип нервной дея­тельности животного-продуцента, реактивность организма, порода, пол, конституция, возраст.

Лошадей используют в возрасте от 3 до 12 лет, помеси донской и ка­захской пород, массой 450-500 кг; волов - в возрасте от 3 до 8 лет, мас­сой не менее 350 кг, симментальской, швицкой пород; свиней - в воз­расте 5-6 месяцев, массой не менее 80 кг, крупной белой породы; овец, баранов и валухов - в возрасте 2-3 лет и массой 30-45 кг (для получения диагностических сывороток и сывороточных сред); кроликов и морских свинок – при достижении ими половозрелого возраста.

На качество гипериммунных сывороток влияют:

- чистота, объем и концентрация антигенов, применяемых для гипе­риммунизации животных;

- неспецифические раздражители и адъюванты;

- индивидуальные особенности животных-продуцентов, в частности способность их организма к иммунобиологической перестройке;

- метод и схемы гипериммунизации;

- содержание и кормление животных в период их подготовки к гипе­риммунизации.

Для приготовления антигенов должны использоваться штаммы мик­роорганизмов, обладающие хорошо выраженными антигенными и имму­ногенными свойствами.

При изготовлении гипериммунных сывороток применяют антигены, специфическое действие которых усилено адьювантными веществами, в качестве которых используют гель гидроокиси алюминия, алюминиевые квасцы и др. В практике производства антитоксических сывороток широко исполь­зуют хлористый кальций и алюмокалиевые квасцы.

Получение диагностических сывороток осуществляется в несколько этапов:

1. Отбор животных - продуцентов.

2. Грундиммунизация (грундирование) - создание у животных-проду­центов основы иммунитета.

3. Гипериммунизация животных-продуцентов.

4. Приготовление сывороточных препаратов.

Животных выдерживают в карантине 45 суток. За это время их все­сторонне обследуют с ежедневным (утром и вечером) двукратным изме­рением температуры тела, проверяют на пораженность гельминтами и при необходимости дегельминтизируют.

Лошадей исследуют на сaп, трихомоноз, бруцеллез, туберкулез, пи­роплазмидозы, инфекционную анемию; крупный рогатый скот - на тубер­кулез, бруцеллез, лептоспироз; свиней - на туберкулез, бруцеллез; овец – на бруцеллез, туберкулез, паратуберкулез; кроликов – на пастереллез; морских свинок – на бруцеллез, листериоз и др.

При отборе животных-продуцентов учитывают их физиологические и иммуннобиологические показатели.

Кормление животных-доноров осуществляется по специально разра­ботанным рационам. Такие рационы должны содержать по 11-12 кормо­вых единиц и по 1000-1200 г переваримого протеина, а также включать сочно-витамин-ные корма и быть строго сбалансированными по мине­ральному составу.

Для восстановления крови после крововзятия важно правильно орга­низовать минеральное кормление животных.

На 1 кг сухого корма лошадей должно приходиться железа - 145-165 мг; меди - 15-18 мг; кобальта -1,2-1,4 мг; марганца - 9 мг.

Для восстановления красной крови лошадям вводят в рацион эритро­циты, фибрин, кормовые антибиотики, проращенный овес. Иногда про­водят реинфузию эритроцитов.

Кормят животных-продуцентов 3-5 раз в день, водопой - вволю, соль лизунец - вволю (кроме свиней).

Крупных животных содержат индивидуально, мелкий рогатый скот и свиней - группами.

Грундиммунизация животных продуцентов. Теоретически обосно­ванно и практически целесообразно отбирать животных-продуцентов по иммунологическим показателям. При отборе животных их проверяют на наличие антител к тому или иному антигену серологическими методами.

При проведении грундиммунизации животным вводят убитый антиген или живые атенуированные микроорганизмы (убитые или живые вак­цины). Эти антигены вводят дважды, с интервалом в 2-3 недели, внутри­мышечно или подкожно.

До начала грундиммунизации и через 7-8 суток после последнего введения антигена у животных берут кровь и определяют в ее сыворотке наличие антител к тому антигену, с помощью которого в последующем готовят гипериммунную сыворотку.

Выявление в сыворотке крови антител в титрах 1:800 и выше указы­вает на то, что данное животное может быть использовано как продуцент гипериммунной сыворотки, т.е. такое животное обладает высокой реак­тивностью организма и иммунная система его способна вырабатывать антитела в необходимых титрах.

Кроме того, организм животного сенсибилизируется («знакомится») антигеном и при последующей гипериммунизации быстро ответит на введение антигена выработкой антител.

Предварительное, правильно проведенное грундирование животных обеспечивает повышение (в 5 paз и более) титров специфических анти­тел при последующей гиперимунизации тем же антигеном, увеличивает выход высокоактивного препарата и создает условия получения сыворо­ток в более короткие сроки.

Гипериммунизация животных - это метод парэнтерального введе­ния животным нарастающих доз соответствующих антигенов с целью получения наивысшей ответной иммунологической реакции организма, а следовательно, и максимального увеличения в крови животных титра специфических антител, который должен обеспечить диагностический эффект препаратов.

При гипериммунизации в сыворотке крови обычно нарастает количе­ство общего белка, увеличивается количество гамма- и бета- глобулино­вых фракций, уменьшается содержание альбуминов.

Так, если в нормальной сыворотке крови лошадей альбумины состав­ляют 50 % от общего количеств белков, то в иммунной сыворотке их бы­вает 35 % и ниже.

Успех гипериммунизации животных-продуцентов зависит не только от тщательного их подбора, качества антигена и адьювантных веществ, но и от правильно выбранной схемы гипериммунизации, пра­вильной технологии выполнения этих схем иммунизации, а также техно­логии кровопускания или обескровливания продуцентов в конце их экс­плуатации.

Антиген вводится обычно подкожно или внутримышечно (иногда внутривенно) в несколько мест с таким расчетом, чтобы точки инъекции находились вблизи лим­фатических узлов. При этом, в иммуногенез быстрее вовлекается боль­шое количество лимфоузлов, что повышает общую и иммунологическую реактивность организма. Введение антигена одновременно в несколько мест, кроме того, обеспечивает лучшую рассасываемость его и появле­ние более равномерных и менее болезненных инфильтратов.

Антигены в небольших дозах (5-25 мл) обычно вводят подкожно в верхнюю часть шеи животного или внутривенно, а в больших количествах - внут­римышечно в область спины и крупа.

Для гипериммунизации чаще всего использую лошадей. Цикл гипе­риммунизации обычно длительный и составляет 1-2 и более месяцев. Впрочем, в каждом случае цикл иммунизации во многом зависит от вида получаемой гипериммунной сыворотки.

В каждом конкретном случае схемы иммунизации могут быть раз­ными. Схемы иммунизаций отличаются одна от другой даже при получе­нии одной и той же сыворотки, т.к. каждое животное отличается индиви­дуальной реактивностью организма и для него необходима своя, от­дельная схема гипериммунизации.

Разнообразие схем иммунизации определяется различием методов введения антигена, дозировкой антигена, количеством инъекций, интер­валами между инъекциями, объемом забираемой у животного крови, кратностью цикловых кровопусканий.

Введение антигенов обычно не вызывает резких отклонений в со­стоянии здоровья крупных животных, лишь иногда наблюдаются мест­ные и общие реакции. Эффективность иммунизации животных повыша­ется при дробном введении антигенов одновременно в различные уча­стки тела с охватом возможно большего количества лимфоуз­лов.

По окончании гипериммунизации, когда в сыворотке крови животного установлен максимальный титр специфических антител, у него берут кровь обычно через 7-10 суток после последней инъекции антигена. Этот период соответствует максимальному накоплению антител в крови жи­вотных и полностью укладывается в закономерности иммуногенеза.

Количество забираемой крови зависит:

- от массы животного;

- от привычки его к кровопотерям с учетом начального и последую­щих циклов;

- количества предполагаемых кровопусканий в данном цикле;

- количества титра антител;

- состояния здоровья животного.

К взятию крови животных приучают постепенно.

Обычно при каждом крововзятии кровь берут из яремной вены из рас­чета 800 мл на каждые 50 кг массы животного (или 13 % к общей массе крови животного).

Тотальное обескровливание проводят при использовании лаборатор­ных животных, а также тогда, когда решается вопрос о прекращении ис­пользования крупных животных как продуцентов. Обычно это делают в момент максимального накопления антител и появления тенденции сни­жения их синтеза.

Дата добавления: 2015-08-27