Т. Маниатис Э. Фрич Дж. Сэмбрук 21 страница

Таблица П.6. Определение нуклеотидной последовательности ДНК с концевыми метками¹*

' Этап

О

G и А

Т и С

А>С

Смешайте

200 мкл буфера 10 мкл И₂0 10 мкл Н₂0 15 мкл 5 М NaCl 100 мкл j

5 мкл [³²Р] ДНК Ю мкл [³²Р] ДНК 10 мкл [³²Р] ДНК 5 мкл [³²Р] ДНК 5 мкл [³²Р] ДНК

Охладите до

0°С

о°с

о°с

о°с

Прогрейте 6 мин при 90 °С

Добавьте

Инкубируйте

Добавьте

1мкл DMS

50 мкл муравьи- 30 мкл HZ цой кислоты

20 °С, 3—4 мин 20°С_} 5 мии

20 °С, 5 мин

30 мкл HZ

20 °С, 5 мин

50 м к л D S-стоп 1S0 м кл 11Z * сто п 200 м к л I^-! 2 - стоп 200 м к л I^-! 2 - стоп

750 мкл этанола 750 мкл этанола 750 мкл этанола 750 мкл этанола

150 мкл 1 н. уксусной кислоты

5 мкл тРНК (1’мг/мл)

750 мкл 95% -ного этанола

Выдержите при —70 ^СС, 10—15 мин —70 °С, 10—15 мин—70 °С, 10—15 мин—70 °С, 10— 15 мин 70 °С, 10 IS^mhh

Центрифугируйте 10 мин

10 мин

10 мин

10 мин

10 мин

;эвьте к осадку 250 мкл 0,3 М аце- 250 мкл 0,3 М аце^ 250 мкл 0.3 М.ап.с- 250 мкл 0,3 М аце- 250 мкл 03 М

тата натрия тата натрия тата натрия, тата натрия ацетата натрия

750 мкл этанола 750 мкл этанола 750 мкл этанола 750 мкл этанола 750 мкл этанола

£3 Выдержите при —70°С, 10—15мин—70^бС, 10—*15мин—70^йС, 10—15мин—70°С, 10—15мин

*

Центрифугируйте 10 мин 10 мин 10 мин 10 мин

Осадок промойте 70%-ным этанолом70%-ным этанолом 70%-ным этанолом 70%-ным этанолом

Высушите под ва­куумом

К осадку добавьте 100 мкл 1,0 М пи­перидина

Прогрейте при 90°, 30 мин Лиофилизуйте

100 мкл 1,0 М пи- 100 мкл 0,1 М пи перидина псридина

90 °С, 30 мин

90 °С, 30 мин

100 мкл 1,0 М пи­перидина

90 °С, 30 мин

Добавьте

Лиофилизуйте

Добавьте

Лиофилизуйте

Добавьте

Прогрейте при Охладите во льду Нанесите па гель

10 мкл Н₂0

10 мкл Н₂0

10 мкл Н₂0

10 мкл Н₂0

10 мкл Н₂0

10 мкл П₂0

10 мкл Н₂0

10 мкл Н₂0

10 мкл буфера 10 мкл буфера 10 мкл буфера для 10 мкл буфера для для нанесения для нанесения нанесения нанесения

90 °С, 1 мин

90°С, 1 мин

90°С, 1 мин

90°С, 1 мин

*) Реакции следует проводить в силинонировяниых зппендорфовеки.ч нроПщжазс,

—70 °С, 10—15 МИН

10 мин

70%-ным этанолом

100 мкл 1,0 М пипе­ридина

90 °С, 30 мин 10 мкл Н₂0

10 мкл Н_гО

10 мкл буфера для нанесения

90 °С, 1 мин

ПРИЛОЖЕНИЯ 419

420 ПРИЛОЖЕНИЯ '

Чтобы приготовить 8%-ный гель, смешайте в небольшой колбе

20%-ный акриламид 20 мл

Смесь с мочевиной 30 мл

10%-ный персульфат аммония (све- 0,4 игл

жераствореиный в воде)

Налейте раствор в 50-мл шприц и добавьте 50 мкл TEMED* Быстро размешайте и вылейте содержимое шприца (надевать иглу не надо) в заранее подготовленную форму для геля.

ПРИЛОЖЕНИЕ Б. ПЛАЗМИДА pBR322

НУКЛЕОТИДНАЯ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ ПЛАЗМИДЫ pBR322

Общая длина плазмиды pBR322 составляет 4362 нуклеоти­да; в последовательности, приведенной ниже, нуклеотиды про­нумерованы по часовой стрелке, начиная с единичного fcoRI- сайта. Нуклеотид 1 — первый тимидиновый остаток в fcoRI- сайте: _в

G—А—А—Т—Т—С *

Нуклеотидная последовательность плазмиды pBR322 опре­делена Сатклиффом (Sutcliffe, 1978, 1979).

ПРИЛОЖЕНИЯ

TTCTCATGTT AAGАСТАСАА

TGACAGCTTA ACTGTCGAAT

. 30

TCATCGATAA AGTAGCTATX

GCTTTAATGC

CGAAATTACG

5 gr, GGTAGTTTA.T CCATCAAATA

60 70 80 90 100' CACAGTTAAA TTGCTAACGC AGTCAGGCAC CGTGTATGAA атстаасааг

GTGTCAATTT AACG ATTGCG TCAGTCCG.TG GCACATACTT TAGATTGTTJfc

GCGCTCATCG

CGCGAGTAGC

120 TCATCCTCGG AGTAGGAGCC

CACCGTCACC

GTGGCAGTGG

140 CTGGATGCTG GACCTACG AC

15 ft'¹

TAGGCATAGC

ATCCGTATCC-

CTTGGTTATG

GAACCAATAC

■CGGGTACTGC

GGCCATGACG

180 CGGGCCTCTT GCCCGGAGAA

GCGGGATATC

CGCCCTATAG

2(№

CTCCATTCCG

CAGGTAAGGt?

210 220 230 240 25Q*

ACAGCATCGC CAGTCACTAT GGCGTGCTGC TAGCGCTATA TGCGTTGATC

TGTCGTAGCG GTCAGTGATA CCGCACGACG ATCGCGATAT ACGCAACTAC:

260 270 280 290 30W

CAATTTCTAT GCGCACCCGT TCTCGGAGCA CTGTCCGACC GCTTTGGCCG

GTTAAAGATA CGCGTOGGCA AGAGCCTCGT GACAGGCTGG CGAAACCGGC

. '310 320 330 340 350

CCGCCCAGTC CTGCTCGCTT CGCTACTTGG AGCCACTATC GACTACGCGA

GGCGGGTCAG GACGAGCGAA CCGATGAACC TCGGTGATAG CTGATGCGCT

360 370 38o 390 пт

1CATGGCGAC CACACCCGTC CTGTGGATCC TCTACGCCGG ACGCATCGTG

AGTACCGCTG GTGTGGGCAG GACACCTAGG AGATGCGGCC TGCGTAGCAC-

CCCGGCATCA

CGGCCGTAGT

CCGGCGCCAC

GGCCGCGGTG

AGGTGCGGTT

TCCACGCCAA

GCTGGCGCCT

CGACCGCGGA

450'

ATATCGCCGA

TATAGCGGCr

460 470 480 490 5Ш

CATCACCGAT GGGGAAGATC GGGCTCGCCA CTTCGGGCTC ATGAGCGCTT

GTAGTGGCTA CCCCXTCTAG CCCGAGCGGT GAAGCCCGAG TACTCGCGAJt

510* 520 530 540 5 50*

GTTTCGUCGT GGGTATGGTG GCAGGC:CCGT GGCCGGGGGA CTGTTGGGCG

CAAAGCCGCA CCCATACCAC CGTCCGGGCA CCGGCCCCCT GACAACCCGC

560 570 580 590 tiOffc

CCATCTCCTT GCATGCACCA TTCCTTGCGG CGGCGGTGCT CAACGGCCTC

GGTAGAGGAA CGTACGTGGT AAGGAACGCC GCCGCCACGA GTTGCCGGAG

422 ПРИЛОЖЕНИЯ

610 AACCTACTAC TTGC ATCATG

660 TCGACCGATG AG CTGGCT AC

CG CGGGGCAT

СГОCCСCGТА

760 CAACTCGTAG. С TTGAGC АТС

620 TGGGCTGCTT ACCCGЛССАА

CCCTTGAGAG

GGGAACTCTC

720 GACTATCGTC CTGAT AGCAG

GACAGGTGCC

CTGTCCACGG

630 CCT AATGCAG GGATTACGTC

680 CCTTCAACCC GGAAGTTGGG

7 30 GCCGCACTT A CGGCGTG A AT

GGCAGCGCTC CCGTCGCG AG

GAGTCGCATA

CTCAGCGTAT

690 AGTCAGCTCC TCAGTCGACC

7 40 TG ACTGTCTT ACTGACAGAA

7 9Г TGGGTCATTT А Г С С A 'j T A A A

650 AGGGAGAGCG TCCCTCTCGC

700 TTCCGGTGGG AAGGCCAC CC

CTTTATCATG

GAAATAGTAC

8 00 TCGCCGAGGA AGCCGCTCCT

CCGCTTTCGC

■GGCGAAAGCG

86П GAATCTTGC A CTTACAACGT

CGTTTCGGCG

CCAAAGCCGC

GGGCTACGTC

,CCCGATGCAG

1010 TTATGATTCT AAT ACT A AG A

fiTGCTGTCCA

TACGACAGGT

TGGAGCGCGA

ACCTCGCGCT

870 CGCCCTCGCT GCGGGAGCGA

920 AGAAGCAGGC TCTTCGTCCG

970 TTGCTGGCGT AACG AC CGC A

TCTCGCTTCC

AGAGCGAAGG

GGCAC.GTAGA

CCGTCCATCT

830 CG ATGATCGG GCTACTAGCC

CAAGCCTTCG

GTTCGGAACC

CATTATCGCC

GTAATAGCGG

98C

TCGCGACGCG

AGCGCTGCGC

1 0 30 GGCGGCATCG CCGCCGTAGC

TGACGACCAT'

ACTGCTGGTA

CCTGTCGCTT

GGACAGCGAA

TCACTGGTCC

AGTGACCAGG

940 GGC ATGGCGG CCGTACCGCC

990 AGG.CTGG ATG TCCGACCTAC

1040 GGATGCCCGC CCTACGGGCG

1090 CAGGGACACC GTCCCTGTCG

GCGGTATTCG

CGCCATAAGC

CGCCACCAAA

GCOCTOGTTT

950 CCGACGCGCT GGCTGCGCGA

1000 GCCTTCCCCA CGG AAGCGGT

1 050 GTTGCAGGCC СAACGTCCGG

1 100 TTCAAGGАТС AAGTTCCTAG

n

mo

GCTCGCGGCT

CGAGCGCCGA

1 1 20 CTTACCAGCC GAATGGTCGG

1 130 TAACTTCGAT ATTGAAGCTA

1 1 40 CACTGGACCG GTGACCTGGC

• ■ 1150

CTG ATCGTC-A GACT AGCAGT

1 160 1170 1180,11 90 1200

CGGCG ATTT A TGCCGCCTCG GCGAGCAGAT GGAACGGGTT GGCATGGATT

■CCCGCTAAAT ACGGCGG AGC CG CTCGTGT A CCTTGCCCAA CCG TAC СТАA

ПРИЛОЖЕНИЯ*

1210 GTAGGCGCCG СATCCG CGGC

1220 CCCTATACCT GGGAT ATGGA

12 30 TGTCTGCCTC ACAGACGGAG

12U0 CCCGCGTTGC GGGCGCAACG

1260 ATGGAGCCGG TACCTCGGCC

GCCACCTCGA

CGGTGGAGCT

1280 CCTG AATGGA GGACTTACCT

AGCCGGCGGC

TCGGCCGCCG

13Ю

CGGATTCACC

GCCTAAGTGG

1 320 ACTCCAAGAA TGAGGTTCTT

1330 TTGGAGCCAA AAC CTCGGTT

1 3^0 TCAAITCTTG AGTTAAGAAC

1 360 TGAATGCGCA ACTTACGCGT

1370 AACCAACCCT TTGGTTGGGA

1 380 TGGC AG AAC A ACCG TCTTGT

TATCCATCGC

ATAGCTAGCG

TCCAGCAGCC

AGGTCGTCGG

14 20 GCACGCCGCG CGTCCGCCGC

1430 CATCTCGGGC GTAGAGCCCG

¹, 4 40 AGCGTTGGGT TCGCAACCCA

1 460 GGTGCGCATG CCACGCGTAC

1 470 ATCGTGCTCC TAGCACGAGG

1480 TGTCGTTGAG AC AG СAACTС

1 490 GACCCGGCTA CTGGGCCG AT

15Ю GTTG CCTT AC CAACGGAATG

1 -■ 2 0 TGGTTAGCAG ACCAATCGTC

1 5 30 AATGAATCAC TTACTTAGTG

1 5^0 CGATACGCGA GCTATGCGCT

1b60 AGCGACTGCT TCGCTGACGA

15 7 0 GCTGCAAAAC CGACGTTTTG

GTCTGCGACC

CAGACGCTGG

1 5 90 TGAG СAAC AA ACTCGTTG TT

16 10 CTTCGGTTTC GAAGCCAAAG

¹ b? 0 CGTGTTTCG T GCACAAAGCA

U 30 AAAGTСTGG A TTTCAGACCT

16 4 0 AACGCGGAAG TTGCGCCTTC

GCACCATTAT

CGTGGTAATA

1670 GTTCCGGATC CAAGGCCT AG

1 680 TGCATCGCAG ACGTAGCGTC

1 690 GATGCTGCTG CTACGACGAC

1710 GGAACACCTA CCTTGTGG AT

CATCTGTATT

GTAGACATAA

1730 AACGAAGCGC TTGCTTCGCG

17 4 0 TGGCATTGAC ACCGTAACTG

1760 TTTTCTCTGG AAAAGAGACC

TCCCGCCGCA

AGGGCGGCGT

TCCATACCGC

AGGTATGGCG

1790 С AGTTG TTTA GTCAACAAAT

1 250 GTCGCGGTGC CAGCGCCACG

1; 00 ACCTCGCTAA TGG AG CG ATT

1 3 5 O' CGGACAACTG GCCTCTTGAC

1 4 01: GTCCGCCATC CAGGCliU TAG

14 5f

CCTGGCCACG CG AC CGGTGC

¹ - 'j GGCTGGCGGG, CCGACCGCCr

GCG AACGT'GA CGC7TG 'A:

CATGAkTGGT GT AC TTAC ’ A

1 t^c;0

TCAG CGС С СТ ■ AGTCCCGGGА

1 '^г i.>0 GCTACCCTGT ГС АТССGАС А

1? S С CCTGAGTGAT GGACTCAC7A

' 8 О О СССТСАСААС GGG AGTGTTG*

A2A ‘ПРИЛОЖЕНИЯ

' 1810 ^rGTT С CAGTAA CAACGTCATT

1820 CCGGGCATGT GGCCCGTACA

TCATCATCAG

AGTAGTAGTC

1840 TAACCCGTAT ATTGGGCAT A

1850 CGTGAGCATC GCACTCGTAG

1860 ' CTCTCTCGTT CAGAGAGCAA

1 870 TCATCGGTAT AGTAGCCAT A

CATTACCCCC

GTAATGGGGG

1 890 ATGAACAGAA TACTTGTCTT

ATTCCCCCTT

TAAGGGGGAA

19Ю

ACACGGAGGC

TGTGCCTCCG

1 920 ATCAAGTGAC TACTTCACTG

1930 СAAAC AGG AA GTTTGT С CTT

AAAACCGCCC.

TTTTGGCGCG

1950 TT AACATGGC AATTGTACCG

I960

'CCGCTTTATC

CGCGAAATAG

AGAAGCCAGA

TCTTCCGTCT

1980 CATTAACGCT GTAATTGCG A

1990 TCTGGAGAAA ACACCTCTTT

200Q- CTCAACGAGC GAGTTGCTCG

2010 ‘TGGACGCGG A.ACCTC CGCCT

TGAACAGGCA

ACTTGTCCGT

20 30 GACATCTGTG CTGT AG AC AC

2040 AATCGCTTCA TT AGCGAAGT

2050 CGACCACGCT GCTGGTGCG A.

2060 iGATGAGCTTT CTACTCGAAA

2070 AC CG СAGCTG TGGCGTCG AC

CCTCGCGCGT

GGAGCGCGCA

2090 TTCGGTGATG AAGCCACTAC

ACCGTGAAAA

TGCCACTTTT

CCTCTGACAC

fGGAGACTGTG

21 20 ATGCAGCTCC T ACGTCG AGC

2130 CGG AG ACGGT GCCTCTCCCA

21 40 CACAGCTTCT GTGTCGAACA

2)50 CTGTAAGCGG GACATTCGCC

ATGCCGCCAG

^TACGGCCCTC

2170 CAGACAAGCC GTCTGTTCGG

21Э0

CGTCAGGGCG

GCACTCCCGC

CGTCAGCGGG

CCAGTCCCCC

TGTTGGCGGG

ACAACCGCCC

22 10 "TGTCGGGGCG.ACACCCCCGC

CAGCCATGAC

GTCGGTACTG

2230 CCAGTCACGT GGTCAGTGCA

22*J0 AGCGAT AGCG TCGCTATCGC

2250 GAGTGTATAC CTCACATATG '

2260 'TGGCTTA ACT.ACCG AATTGA

ATGCGGCATC

TACGCCGTAG

AGAGCAGATT

TCTCGTCTAA

2290 GTACTGAGAG СATGACTCTC

2300 TGCACCATAT ACGTGGTAT A

<£CGGTGTGAA

•CGCCACACTT

2320 AT ACCG СAC A TATGGCGTGT

GATGCGTAAG

CTACGCATTC

GAGAAAATAC

CTciTTTATG

CGCATCAGGC

GCGTAGTCCG

(CCTCTTCCGC

ȣGAGAAGGCG

2370 TTCCTCGCTC AAGGAGCGAG

ACTGACTCGC

TGACTGAGCG

TGCGCTCGGT

ACGCGAGCCA

CGTTCGGCTG

GCAAGCCGA^r

ПРИЛОЖЕНИЯ 4Ш

CGGCGAGCGC

CCCGCTCCCC

ATCAGGGGAT

TAGTCCCCIA

CCAGGAACCG

GGTCCTTGGC

CCCCCTGACG

GGGGGACTGC

CCCGACAGGA

GGGCTGTCCT

TGCGCTCTCC

ACGCGAGAGG

27Ю

CTCCCTTCGG

GAGGGAAGCC

CCGTTCAGCC

CGCAAGTCGG

29Ю

GAXIAGCAGA

CXAAXCGXCT

21120 TATCAGCTCA ATAGTCGAGT

AACGCAGGAA

TTGCGTCCTT

TAAAAAGGCC

ATTTTTCCGG

'2570

AGCATCACAA

TCGTAGTGTT

CTATAAAGAT

GATATTTCTA

2670 TGTTCCGACC ACAAGGCTGG

GAAGCGTGGC

CXXCGCACCG

2820 CGACCGCTGC GCTGGCGACG

2920 GCGAGGXAIG CGCTCCATAC

CTCAAAGGCG

GAGTTTCCGC

AGAACATGTG

TCTTGTACAC

2530 GCGTTGCTGG CGCAACGACC

2580 AAATCGACGC TTTAGCTGCG

ACCAGGCGTT

TGGTCCGCAA

CTGCCGCTTA

GACGGCGAAT

GCTTTCTCAA

CGAAAGAGXI

GCTC.CAAGCT

CG.AGGTICGA

2830 GCCITAXCCG CGGAATAGGC

ATCGCCACTG

XAGCGGXGAC

TAGGCGGIGC

AICCGCCACG

AGAAGGACAG

TCTICCTGTC

GTAATACGGT

CAXTATGCCA

24.90

AGCAAAAGGC

TCGTITTCCG

CGTTXTTCCA

GCAAAAAGGX

TCAAGTCAGA

AGXXCAGICT

TCCCCCTGGA

AGGGGGACCT

, 2690 CCGGAXACCX GGCCTATGGA

TGCXCACGCX

ACGAGTGCGA

GGGCTGIGIG

CCCGACACAC

GXAACXAXCG

CAXXGATAGC

2890 GCAGCAGCCA CGTCGTCGGT

29*10

TACAGAGXTC

AXGXCXCAAG

'2990

XAIXXGGXAT

AIAAACCAIA

TATCCACAGA

ATAGGXGTCT

250®* CAGCAAAACJG. GTCGTTTTCC

255CJ* TAGGCTCCGC i ATCCGAGGCG -

2600*

GGTGGCGAAA

CCACCGCTIT

2650"

agctcccicg;

TCGAGGGAGC

2700» GTCCGCCTJT CAGGCGGAAA

275JP

GTAGGTAXCX

CAXCCAXAGA,

2Й005

CACGAACCCC

GTGCXXGGGG

TCTTGAGTCC.

AGAACXCAGG-

,, 29,00^!

CTGGXAACAG. GACCATTGTC'

29 SO ■

XTGAAGXGGT

ААС1ХСАССЛ

3000 • CXGCGCTCTG GACGCGAGAC.

2960 2970

<JGCCXAACXA CGGCXACACX

CCGGAXXGAX GCCGATGXGA

27бО 277Q

CAGTTCGGTG YAgGTCGTXC GXCAAGCCAC AXCCAGCAAG

2860 2870 JWCCCGGXAA GACACGACXX

TXGGGCCAXX CXGXGCXGAA

ПРИЛОЖЕНИЯ

* ЗСЛО ■CTGAAGCCAG;CACTTCGGTC '

3020 TTACCTTCGG AATGGAAGCС

зозо

AAAAAGAGTT

ТТТТТСГСАА

зоао

GGTAGCTCTT

CCATCGAGAA

GATCCGGCAA

CTAGGCCGTT

ACAAACCACC

'TGTTTGGTGG

GCTGGTAGCG

CGACCATCGC

GTGGTTTTTT

CACCAAAAAA

TGTTTGCAAG

ACAAACGTTC

3ioo

CAGCAGATTA

GTCGTCTAAT

iCGCGCAGAAA

(CCGCGT.CTTT

3120 AAAAGGATCT TTTTCCT AGA

CAAGAAGАТС GTTCTTCTAG

31*10 CTTTGATCTT GAAACTAGAA

3150 TTCTACGGGG AAGATGCCCC

3160 TTCTG ACGGTC AGACTGCGAG

3170 AGTGG AACG A TCACCTTGCT

3180 AAACTCACGT TTTGAGTGCA

3190 TAAGGGATTT ATTCCCTAAA

TGGTCATGAG

ACCAGTACTC

3210.ATT АТС A A A A 7XAAT AGTTTT

AGGATCTTCA

TCCTAGAAGT

3230 CCTAGATCCT GGATCTAGGA

TTTAAATTAA

AAATTTAATT

3250 AAATG AAGTT TTTACTTCAA

3260 MTAAATCAAT /AATTTAGTT A

3270 СТАAAGTAT A GATTTCATAT

3280 T ATGACTAAA AT ACTCATTT

3290 CTTGGTCTGA GAACCAGACT

CAGTTACCAA

GTCAATGGTT

7TGCTTAATCA

iACGAATTAGT

GTGAGGCACC

CACTCCGTGG

3330 T ATCTCAGCG ATAGAGTCGC

33«0

ATCTGTCTAT

TAGACAGATA

ЗЗЬО TTCGTTCАТС AAGCAAGTAG

3360 CAT AGTTGCC XiTATCAACGG

3370 TGACTCCCCG ACTGAGGGGC

3380 TCGTGTAGAT AGCACATCTA

3390 AACTACGATA TTGATGCTAT

3400 CGGGAGGGCT GCCCTCCCG A

3«to

■TACCATCTGG

iATGGTAGACC

3^60 fCCTCCAGATT tCGAGGTCTAA

3420 CCCC AGTGCT GGGGTCACGA

3470 T ATCAGCAAT ATAGTCGTT A

3430 GCAATGAT AC CGTTACTATG

AAACCAGCCA

TTTGGTCGGT

CGCGAGACCC

GCGCTCTGGG

3490 GCCGG AAGGG CGGCCTTCCC

3450 ACGCTC ACCG TGCGAGTGGC

CCGAGCGCAG

GGCTCGCGTC

3510 AAGTGGTCCT TTCACCAGGA

3520 GCAACTTTAT CGTTGAAATA

CCGCCTCCAT

GGCGGAGGTA

CCAGTCTATT

GCTCAGATAA

AATTGTTGCC

TTAACAACGG

tGGGAAGCTAG

XCCTTCGATC

3570 AGTAAGT AGT TCATTCATCA

TCGCCAGTTA

AGCGGTCAAT

3590 AT AGTTTGCG TATCAAACGC

3600 CAACGTTGTT GTTGCAACAA

ПРИЛОЖЕНИЯ

3610 GCCATTGCTG CGGTAACG AC

CAGGCATCGT

GTCCGTAGCA

GCTGTCACGC

CCACAGTGCG

TCGTCGTTTG

AGCAGCAAAC

GTATGGCTTC

CATACCGAAG

3660 ATTCAGCTC С ТАAGTCGAGG

GGTTCCCAAC

CCAACGGTTG

GATCAAGGCG.

CTACTTCCGC

AGTTACATGA. TCAATGTACT

- 37 CC-

TCCCCCATGT AGGGGGTACA

3710 TGTGCAAAAA AC ACGTTTTT

3720 AGCGGTT AGC TCGC СAATCG

37 30 T С CTTCGGTC AGG A AGC CAG

37^0

CTCCGATCGT

GAGGCTAGCA

3750' TG TC AC-A AC T ACAGTCTTCA

.3760

AAGTTGGCCG

TTCAACCGGC

3770 С AGTGTT АТС GTCACAATAG

37 80 ACTCATGGTT TGAGTACCAA

37 40 ATGGC AGCAC TACCuTCGTG

3 8 0 г

TGC ATAATTC ACGTATTAAG

TCTTACTGTC

AGAATGACAG

3820 ATGCCATCCG T ACGG TAGGC

38 30 TAAGATGCTT ATTCTACGAA

3840 TTCTGTGACT AAGACACTGA

3&5C GG TG ACT ACT CCACTCAIGA

3860 С AACCAAGTC GTTGGTTCAG

3870 ATTCTGAG AA ТАAG ACTCTT

3880 IAGTGT ATGC ATCACATACG

GGCGACCGAG

CCGCTGGCTC

3 900’* TTGCTCTTGC

A AC GAG A ACS..

39Ю

CCGGCGTCAA

GGCCGCAGTT

3920 CACGGGATA A GTGCCCT ATT

3 Q 3 0 TACCGCGCCA ATGGCGCGGT

3940 CATAGCAGAA GTATCGTCTT

395Ш СТТГ AAAAGT GAAATTTTCA

3960 GCTCATCATT CGAGTAGTAA

401 0 CGCTGTTGAG GCGACAACTC

3970 CG AAAACGTT CCTTTTGCAA

4 0 20 ATCCAGTTCG T AGGTCAAGC

S 9 8 0 CTT CGGGGCG GAAGCCCCGC

ATGTAACCCA

TACATTGGGT

AAAACTCTCA

ITTTGACAGT

CTCGTGCACC

GAGCACGTGG

JJCOO>' AGGATCTTAC TCCIAGAATG,

*t050>

CAACTGATCT

GTTGACTAGA■

TCAGCATCTT

AGTCGTAGAA

4 07 0 TT ACTTTCAC AATGAAAGTG

4080 С AG CGTTTCT GTCGCAAAGA

G G G T G A G С A A

CCCACTCGTT

i| 1 OV AAAC AGGAAG TTTGTCCTTC.

4 110 GCAAAATGCC CGTTTT ACGG

4 1 20 G С A A A A A A G G CGTTTTTTCC

4 130 GAATAAGGGC СТТАТТСССГ,

4 1 4 0 •j AC ACGG A A A СTGTGCСITT

& 150'¹ TGTTGAATAC ACAACTTATG'

4160 4 17 0 4 180 4 190 H2Q0I

TCAT ACTCTT СГТТТТТСАA TATTATTGAA G С ATTT АТСA GGGTTATTGT

AGTATG AG AA GGAAAAACTT A T A A T A A CTI CGTA AATAGT СССАЛ7ААСА.

428 ПРИЛОЖЕНИЯ

CTCATGAGCG

fCAGTACTCGC

П2бО

<GTTCCGCGC

CCAAGGCGCG

422 0 GATACATATT CXATGTATAA

ACATTTCCCC

XGXAAAGGGG

TGAATGTATT

ACTTACATAA

GAAAAGTGCC

CXXTXCACGG

TAGAAAAATA

ATCTTTTTAT.

4290 ACCTGACGTC TGGACTGCAG

AACAAATAGG

TTGTTTATCC

430Q

TAAGAAACCA

ATTCTTTGGT

43Ю

TTATTATCAT

AATAATAGTA

4320 G ACATTAAC С CTGTAATTGG

TATAAAAATA

ATATTTTTAT

GGCGTATCAC

CCGCATAGTG

4350 GAGGCCCTTX CTCCGGGAAA

4360 436.

CGTCTTCAAG AA

-fGCAGAAGTTC XX *

САЙТЫ РЕСТРИКЦИИ В ПЛАЗМИДЕ pBR322

В первой колонке даны обозначения сайтов рестрикции в жольцевой ДНК по часовой стрелке, начиная с участка ДНК, «следующего сразу за единичным £со1?1-сайтом. Во второй ко­лонке дан порядковый номер первого нуклеотида последова-

_ о О Т“\ о

тельности, узнаваемой рестриктазои. В четвертой колонке ука­зан порядковый номер крайнего (5⁷) нуклеотида расщепляемо­го участка. В последней колонке приведена нуклеотидная пос­ледовательность узнаваемого сайта.

П 9

i3o

i3o

13^

23?

26 1

2 76

-00

37 5

4 11

4 13

4 1 3

4 14

ПРИЛОЖЕНИЯ 429

curs?	■7	TGTTTG
с и Т S ^6		AG “CT
С UTS0		AT"CGAT
CUTS§		T * С G A
CUTS*^5		A"AGCTT
curse		AG “CT
CUTS?		G “ G С А С С
CUTSfr		GCG'C
с urs?		CCTC
curse	1 19	G"GCACC
■CUTS:	1 26	TCACC
■CUTS?	1 30	CC.NGC,
■ситзе	1 29	" ССTGG
CUTS?		GG..ATG
■CUTS?	1 34	GATCC
curse		С "TGG
CUTS 6		G T “ A С
CUTS?		CCNGG
cuTse		C“ CGG
cuTse		С С “ GGG
ситзе		G “ G N С С
ctiTse	17 4	G G " С С
CUTS?		CCTC
curse		GAT AT'С
CUTS?	20 4	GC АТС
cuTse		GC"NG С
CUTS?	2 26	GCTGC
CUTS?		AGCGC “T
CUTSe		0 С G " С
CUTS?		GATGC
CUTSe	26?	TQC "GCA
curse	26 3	GCQ"C
cuTse		GAGCA"C
CUTSe		T“GGCCG
cuTse		T"GGCCG
cuTse		GG 7 CC
curse		GCCG " С
cuTse		GC"NGC
с и TS §		GCCG" С
cuTse		GC"NGC
cuTse	3 39	T"CGA
cuTse		CG ‘CG
curse		"CATC
curse		G " GATC С
ситзе		G"GATCC
cuTse		"GATC
curs?		CCTC
curse		'C* CGG
curs?		GACGC
CUTS?		'GCATC
cuTse		T"OGCCG
ситзе		T"GGCCG
ситзе		GG~CC
curse		GCC"GGC
curse		С * CGG
cuts?		GCATC
curs?		TCACC
cuTse	41 1	С "CGG
curse		GG ~CG С С
cuTse		GGCGC"С
cuTse	4 1 4	GG“^;CGCC
cutse	4 1 3	G*GCCСС
ситзе	4 1 6	G CG “ С
cuTse		GG"CG С С
cuTse		G G СИ С " С
curse		G G " C G С С
ситзе		G"GCG С С
curse		GCG " С
CUTS?		TCACC
CUTS?		G A AG A
cuTse		"G АТС
cuTse		GGGCT"С

H*iJ II		curse
Hie 1Г		CUTS#»
Hha I		curse
A S li I		ситзе
Hae III		cuTse
Cfr I	5 30	curse
Gdi II		cuTse
Hae III		curse
ScrF I		curs?
Hpa II	53 3	curse
Cau II	5 3 3	aiTse
Na r I		ситзе
Hae II	54?	ситзе
Ac v I	S47	arse
Hgic I		cuTse
Hha I	5^8	ситзе
Sph I		cuTse
M spc I	56 1	ситзе
NspB, II	57 7	с и ts e
F пu 4H I		curse
N 3 p В II	5 80	curse
F n u 4 H I		cuTse
Mg 1 A T		CUTS?
Пае III		curse
Mn I I		CUTS?
F n u 4 H I	b 1 4	cuTse
Bbv I	6 1 4	CUTS?
HinF I		ситзе
Hga I		CUTS?
Acc I		curse
Hind II		curse
Sal I		cuTse
T a q. I		curse
- S-faN- I		curs?
Alu I;		cuTse
Hpa II		curse.
Hha I ^;		curse
FnuD; II		cuTse
N^pB II		ситзе
F n и 4 H I		cuTse
Mbo II		curs?
Hgi- I		curse
Nae:		cuTse
Hpa I I		curse
Bbv!■		CUTS?
Fnu4H I		curse
Hae II		curse
Hha J	77 5	curse
Mn 1 I		curs?
Asu I		ситзе
A va II		cuTse
Hha I		cuTse
FnuD tI	8 16	cuTse
Mbo I		curse
Hae III		cuTse
H 1 nF I	RS 1	cuTse
Mnl f		CUTS?
Asu I		cuTse^1
Ava II		cuTse
Hae I	9 17	cuTse,
Hae f11		ситзе
Bgl I		ситзе'
Nae I ■		curse ■’
Hpa II	9 29	cuTse
fj 5 p В II		curse
F n u 4 H I		ситзе
Xma III		cuTse
Gdi II		ситзе
Cfr I		cuTse
Hae III		cuTse
Hga I		CUTS?
FnuD II		cuTse

	GGGCT“С
	AGCGC"T
	GCG* С
	G “GNCC
	GG * С С
	T' GGCCG
	T"GGCCG
	GG " С С
	CCNGG
5 33	С "CGG
5 3 4	CC‘GGG
S 48	GG*CGCC
	GGCGC“C
	GG " CGCC
	G " GCGCC
	GCG "С
	GCATG"C
	GC ATG“C
	G CGG “ С
	GC “ NGC
58 3	GCGG “ С
	GC " NGC
	GTGCT"C
	GG"CC.
	CCTC
	GC " NGC
b 1 4	GCTGC
	G"ANTC
	GCGTC
	GT "CG AC
	GTC"GAC
	G"TCG AC
	T-CGA
6 57	GATCC
	AG " CT.
	С "CGG'
	GCG "С
	Cp " CG
	GpCG*C
7 22	GC"NG С
7 37	TCTTC
	G "GTGCC
	GCC "GGC
	С " CGG
7 7 2	GCAGC
77 3	GC'NGC
	AGCGC"T
	GCG" С
	GAGG
	G"GNCC
	G * GACC
	GCG* С
	CG “CG
	"GATC
	GG " С С
	G ^лANTC
	ОСТ С
	G"GNC,C ■
	G.^GTCC
	A^G"CCA
91$	GG."CC -
	gccnnnjtnggC
	GCC"GGC
	С "„CGG.
	GC&C’C
	GC‘NG С
	С "GGCCG
	С"GGCCG
	C"GGCCG
	GG “ С С
	GACGG
	CG “ CC

430 ПРИЛОЖЕНИЯ

Hha I	9 6	CUTS0	94 8	GCG~C	FnuD II		CUTS#	14 15	СG “ CG
N r u I		CUTS#		TCG'CGA	MspB II		CUTS#	14 18	GCGG"С
FnuD 11		cuts#	97 3	CG * CG	F n u 4 H I		CUTS#		GC"NGC-
Hga I		CUTS?		GACGC	Hha I		CUTS#		G CG ‘ С
FnuD 1Г		cuts#		CG " CG	S f a N I	1 420	CUTS?		GCATC
Mnl I	9S0	CUTS?		GAGG	Ava I,	1 424	CUTS#		С TCGGC*
Fok I		CUTS?		GGATG	Bbv I	1 429	CUTS?	1 429	GCAGC ■
Нае I		cuts#		TGG'CCT	Fnu4H I		CUTS#		GC"NGC
Hae lit		curse		GG " CC	Asu I		CUTS#		G'GNCC
H i nF I		cuts#		G^ANTC	A v a II		CUTS#		G*GTCr;
Mbo II		CUTS?		TCTTC	ScrF I	144 1

Дата добавления: 2015-08-29