Тема: Изучение устройства микроскопа, техники микроскопирования. Приготовление препаратов из различных культур микроорганизмов. Изучение морфологических признаков бактерий.

Лабораторная работа №1

Тема: Изучение устройства микроскопа, техники микроскопирования. Приготовление препаратов из различных культур микроорганизмов. Изучение морфологических признаков бактерий.

Цель: Сформировать умение приготавливать препараты для микроспорирования, определять морфологические признаки бактерий.

Материалы и оборудование:

1.	Микроскоп
2.	Мазки с различными окрашеннымивидами м.о. микроорганизмов микроорганизвидами мииороллоддтолл ооььилолорлорлд ггроооомикроорганизмов мдмикроомикроорганизмов
3.	Предметные и покровные стекла, петли, пипетки, спиртовки
4.	Пробирки с культурами бактерий
5.	Раствор фуксина и метиленовой сини

Общие положения и методика выполнения работы:

Микроскоп, его устройство и основные правила пользования.

МИКРОСКОП-это оптический прибор с одной или несколькими линзами для получения увеличенных изображений объектов, не видимых невооруженным глазом.

Рисунок 1. Устройство микроскопа

1 - окуляр, 2 - тубус, 3 - тубусодержатель, 4 - винт грубой наводки, 5 - микрометренный винт, 6 - подставка, 7 - зеркало, 8 - конденсор, ирисовая диафрагма и светофильтр, 9 - предметный столик, 10 - револьверное устройство, 11 - объектив, 12 - корпус коллекторной линзы, 13 - патрон с лампой, 14 - источник электропитания.

В микроскопе выделяют две системы: оптическую и механическую. К оптической системе относят объективы, окуляры и осветительное устройство (конденсор с диафрагмой и светофильтром, зеркало или электроосветитель).

Устройство микроскопа:

Микроскоп - это оптический прибор, состоящий из механической, осветительной и оптической частей.

Механическая часть. НОЖКА - подковообразной формы, служащая опорой микроскопа.

ТУБУСОДЕРЖАТЕЛЬ имеет форму дуги и используется в качестве ручки при переноске микроскопа. ТУБУС- зрительная трубка микроскопа. РЕВОЛЬВЕРНАЯ НАСАДКА крепится к нижней стороне тубуса. Вращая насадку, можно быстро менять ввинченные в нее объективы во время работы. ПРЕДМЕТНЫЙ СТОЛИК - устройство, на которое помещают изучаемые предмет. Препарат закрепляют имеющимися на столике зажимами (клеммами). В центре предметного столика находится отверстие для прохождения лучей света, освещающих препарат.ВИНТЫ - макроскопический и микроскопический. С их помощью можно передвигать тубус вверх и вниз для установлении его на необходимом расстоянии от препарата. Макроскопическим винтом пользуются для ориентировочной установки на «фокус».

Осветительная часть: состоит из зеркала, конденсора и ирис - диафрагмы, расположенных под предметным столиком микроскопа. ЗЕРКАЛО имеет две поверхности: плоскую и вогнутую. Оно отражает световые лучи и направляет их к конденсору. Конденсор представляет собой систему сильных линз и служит для усиления яркости освещения рассматриваемого объекта. ИРИС - ДИАФРАГМА, расположенная под конденсором, состоит из тонких металлических пластинок, которые при помощи рычажка можно сдвигать или раздвигать, в результате чего отверстие может суживаться или расширяться.

Оптическая часть: представлена объективом и окуляром. ОБЪЕКТИВ состоит из линз, заключенных в металлическую оправу. На оправе каждого объектива нанесены цифры, указывающие на увеличение. Объективы подразделяются на сухие и иммерсионные. При рассматривании препарата с сухим объективом (8,20,40) между фронтальной линзой и препаратом находится воздух. При работе с иммерсионным объективом (90) для устранения светорассеивания расстояние между фронтальной линзой объектива и препаратом заполняют иммерсионным маслом. ОКУЛЯР вставляется в верхний конец тубуса и представляет собой систему двух плосковыгнутых линз, обращенных выпуклостью в сторону объектива.

Правила пользования микроскопом:

1. Микроскоп вынимают из футляра и переносят к рабочему столу, держа его одной рукой за ручку штатива, а другой поддерживают за ножку штатива. Наклонять микроскоп в сторону нельзя, т.к. окуляр может выпасть из тубуса.

2. Микроскоп помещают на рабочем столе на расстоянии 3-5 см от края стола ручкой к себе.

3. Устанавливают правильное освещение поля зрения микроскопа. Для этого, смотря в окуляр микроскопа, зеркалом направляют луч света от источника света в объектив.

4. На предметный столик помещают препарат и закрепляют его клеммами.

5. Сначала предмет рассматривают на малом увеличении, затем переходят к большим увеличениям. Тубус микроскопа необходимо опускать осторожно вниз с помощью макрометрического винта, наблюдая за объективом сбоку, и приблизить его к препарату (не касаясь его) на расстояние, несколько меньшее фокусного. Затем, глядя в окуляр, тем же винтом, медленно вращая его неа себя, поднимают тубус до тех пор вниз, пока в поле зрения не появится изображение изучаемого объекта. После этого вращением микрометрического винта фокусируют объектив так, чтобы изображение объекта стало четким. Микрометрический винт можно вращать осторожно, но не более чем на пол-оборота в ту или иную сторону. При работе макрометрическим винтом осторожно погружают тубус микроскопа так, чтобы кончик объектива погрузился в каплю масла. Затем, глядя в окуляр, тем же винтом очень медленно поднимают тубус о тех пор, пока не появится изображение. Точную фокусировку производят микрометрическим винтом.

6. При смене объективов следует вновь отрегулировать интенсивность освещения объекта. Опуская или поднимая конденсор, получают желаемую степень освещенности.

7. Препарат рассматривают в нескольких местах, передвигая предметный столик боковыми винтами или передвигая стекло с предметом вручную.

8. Во время микроскопирования нужно держать оба глаза открытыми и пользоваться ими попеременно.

9. После окончания работы следует снять препарат с предметного столика, опустить конденсор, мягкой тканью удалить иммерсионное масло с фронтальной линзы объектива и убрать микроскоп в футляр.

Основные правила хранения микроскопа и ухода за ним

1. Микроскоп от проникновения внутрь пыли должен быть пок­рыт чехлом, лучше полиэтиленовым (или стеклянным колпаком). Микроскоп может храниться в ящике или шкафу.
2. Вынимая прибор из ящика, снимая с полки, а также при переносе с места на место микроскоп необходимо одной рукой держать за штатив, а другой придерживать за основание.
3. Необходимо оберегать микроскоп от механических ударов.
4. Каждый объектив должен быть ввинчен до конца в гнездо револь­верного устройства, и четко зафиксировать в ходе лучей в рабо­чем состоянии микроскопа.
5. Необходимо предохранять фронтальные линзы объективов и конденсора, а также глазные линзы окуляров от соприкосновения с различными реактивами.
6. Нельзя без необходимости снимать бинокулярную насадку и при­касаться к поверхности тубусной линзы.

7. Нельзя касаться любой стеклянной поверхности пальцами рук, поскольку на поверхности остаются жирные следы. Это потребу­ет проведения внеплановой чистки оптики, которая может пов­лечь за собой повреждение просветляющих поверхностей.
8. Категорически запрещается снимать «рубашку» (металлический корпус) объектива и заниматься его разборкой.
9. Во внерабочем состоянии микроскопа объективы должны быть опущены (при чем в ход лучей должен быть установлен объектив малого увеличения). При этом объектив не должен касаться пред­метного столика.
10. Для предохранения попадания пыли внутрь микроскопа (если от­сутствует чехол) окуляры должны быть вставлены в окулярные труб­ки, а объективы ввинчены в гнезда револьверного устройства. Если окуляры отсутствуют, то на окулярные трубки необходимо сделать бумажный чехол, а там где нет объективов — необходимо в оставше­еся гнездо вставить заглушку или заклеить его широким скотчем.
11. Рекомендуется перед началом или в конце работы оценить чис­тоту основных оптических поверхностей объектива, окуляров и конденсора микроскопа и в случае загрязнения немедленно под­вергнуть их чистке.

Для исследования морфологии микроорганизмов готовят специальные препараты, которые в зависимости от задач исследования могут содержать как живые клетки, так и неживые.

Препараты готовят, как правило, на предметных стёклах толщиной не более 1,2 – 1,4 мм. Поверхность стекла должна быть очищена и обезжирена.
Для приготовления препаратов живых микроорганизмов применяют покровные стёкла толщиной 0, 17 мм, которыми накрывают препарат. Чистые стёкла хранят в сухом состоянии.

Задание1

Изучить устройство микроскопа, правила пользования микроскопом

Задание 2

Приготовить: а) прижизненный препарат

б) фиксированный и окрашенный препарат.

Задание 3

Изучить с помощью микроскопа и зафиксировать следующие формы бактерий:

а) шаровидные

б) палочковидные

в) извитые

Контрольные вопросы

1. Опишите строение бактериальной клетки.

2. Объясните правила работы с микроскопом.

3. Объясните технику приготовления прижизненных препаратов.

4. Объясните технику приготовления фиксированного препарата.

5. Сравните способы приготовления прижизненных препаратов.

6. Охарактеризуйте группы бактерии по форме.

Список литературы:

1. Азаров, В.Н. Основы микробиологии и санитарии / В.Н. Азаров. – М.: Экономика, 1986. – 349 с.

2. Березин, И.В. Биотехнология и ее перспективы / И.В. Березин. – М.: Знание, 1986. – 294 с.

3. Богданов, В.М. Техническая микробиология пищевых продуктов / В.М. Богданов. – М.: Пищевая промышленность, 1968. – 395 с.

Дата добавления: 2015-11-04