Методы диагностики кожи

Методы диагностики кожи

Методы функциональной диагностики

Методы структурно-функциональной диагностики

Конфокальная лазерная микроскопия

Лазерная доплеровская флоуметрия

Оптическая когерентная томография

Термометрия

Дерматоскопия

Визиосканирование

Флюоресцентрия

Полярография

Когезиометрия

Теваметрия

Микроволновая диэлектрометрия

Фрикциометрия

Кутометрия

Ревискозиметрия

рН-метрия

Себуметрия

Корнеометрия

Мексаметрия

Структурно-функциональная диагностика.

Конфокальная лазерная микроскопия (КЛМ).

Конфокальная флуоресцентная микроскопия отличается от обычной флуоресцентной микроскопии, в первую очередь, улучшенным разрешением вдоль оптической оси объектива (ось z), которое достигается за счет использования принципа конфокальной фильтра­ции флуоресценции, излучаемой образцом. Рис. 1 поясняет этот принцип. Если в обычных флуоресцентных микроскопах в качестве источника света, возбуждающего флуоресценцию, используется ртутная или ксеноновая лампа, то в современных конфокальных микроскопах - это лазер (рис. 1). Преимущество лазеров по сравне­нию с ламповыми источниками света - это монохроматичность генерируемого света (ширина линии генерации значительно меньше 1 нм) и малая расходимость (т.е. высокая параллельность) пучка света. Монохроматичность возбуждающего флуоресценцию света дает возможность расширить спектральный диапазон регистрируемой флуоресценции и улучшить подавление светорассеяния на длине волны возбуждения. Малая расходимость пучка света способствует более эффективной работе оптической системы микроскопа, умень­шает число бликов, связанных с отклонением света от расчет­ного оптического пути, улучшает точность фокусировки пучка света и уменьшает объем, в который можно сфокусировать свет на образце. Луч лазера заводится на образец через объектив с использованием, так называемого, селективного зеркала (СЗ, рис. 1). Специальное многослойное напыление из диэлектрических материалов обеспечивает высокоэффективное отражение света на длине волны генерации лазера и почти 100% пропускание света в остальном спектральном диапазоне. На образце лазер освещает не все поле зрения, как в ламповом флуоресцентном микроскопе, а фокусируется в точку. Флуоресцентное излучение, возбуждаемое лазером, собирается тем же объективом. СЗ отражает рассеянный образцом лазерный свет, пропуская через себя к системе детекции (фотоэлектронный умножитель, ФЭУ) флуоресцентное излучение, очищенное от паразитного светорассеяния. Очевидно, что лазерный луч возбуждает флуоресценцию во всех слоях образца, через которые он проходит (рис. 1). Флуоресценция, излучаемая слоями, расположенными выше и ниже фокальной плоскости, если она попадает на ФЭУ, регистрируется вместе с основным сигналом из фокуса объектива и ухудшает разрешение оптической сис­темы. Чтобы улучшить разрешение, используется конфокальная диафрагма, которая помещается в сопряженной фокальной плоскости объектива, точнее, в той плоскости, где микроскоп фокусирует флуо­ресценцию, собранную из фокуса объектива (рис. 1). Через диаф­рагму проходит только та флуоресценция, которая излучается из небольшого объема вблизи фокуса лазерного луча под объективом (рис. 1, а). Флуоресценция, испускаемая слоями выше и ниже фокуса, оказывается дефокусированной на конфокальной диафрагме и через нее к ФЭУ не проникает (рис. 1, б, в).

Рис.1. – Принцип конфокальной фильтра­ции сигнала.

Метод КЛСМ позволяет получать изображения эпидермиса и поверхностной части дермы с разре­шением, приближенным к традиционной световой микроскопии. С помощью данного метода можно получить изображения не только придатков кожи, но и отличить клетки различных слоев эпидермиса, волокна сосочкового слоя дермы, оценить состоя­ние капилляров дермы. Можно исследовать морфо­логию разных клеток, определять размер, форму клеточных и субклеточных структур.

Лазерная доплеровская флоуметрия (ЛДФ).

ЛДФ ис­пользуется в качестве метода диагностики состоя­ния кровотока на капиллярном уровне, оказываю­щего непосредственное влияние на метаболические процессы в органах и тканях, течение различных воспалительных и репаративных процессов.

Метод лазерной допплеровской флоуметрии заключается в ре­гистрации отраженного от движущихся эритроцитов света (рис. 2). При взаимодействии с тка­нью в отраженном сигнале появляется составляющая, пропорциональная скорости движения эритроцитов в сосудах, которая вычисляется по закону /_н =-/и (эффект Допплера). Све­товодный зонд анализатора обеспечивает доставку зондирующего излучения от лазера к области исследований и транспортировку к фотоприемникам отраженного от ткани излучения. Поскольку в световое пятно попадает большое количество сосудов разного калибра и направления, полез­ный сигнал представляет собой суперпозицию отраженных от большого количества эритроци­тов световых квантов. Глубина просвечивания тканей в случае неинвазивных измерений через кожу составляет от 1 до 3 мм, поэтому основной вклад в сигнал вносит капиллярный кровоток.

Лазерный допплеровский сигнал назы­вается показателем микроциркуляции и ха­рактеризует среднюю скорость движения эри­троцитов в исследуемом участке ткани. Он вы­числяется по формуле

ПМ =N х V,

где N—количество эритроцитов в зондируемом

объеме; V — средняя скорость эритроцитов.

На мониторе ПМ представляет собой кривую зависимости скорости кровотока от времени. Значение ПМ зависит от оптической проницаемости и индивидуальных особенностей васкуляризации кожи, вычисляется в относительных единицах. Функциональную зависимость в оценке состояния микроциркуляции имеют частотные составляющие сигнала, которые определяются из спектров.

Рис.2. – Принцип действия метода ЛДФ

Кутометрия

Суть метода кутометриив том, что при прикладывании датчика в его полости создается отрицательное давление, и участок кожи всасывается в полость (рис. 3). Оптичес­кой системой регистрируется величина деформации под воздействием вакуума, а также способность кожи возвра­щаться в исходное положение после снятия нагрузки. Важ­но подчеркнуть, что показания этого датчика зависят от рельефа и толщины кожи: чем больше складчатость кожи, тем меньше ее упругость.

Дата добавления: 2015-09-30