Студопедия
Случайная страница | ТОМ-1 | ТОМ-2 | ТОМ-3
АрхитектураБиологияГеографияДругоеИностранные языки
ИнформатикаИсторияКультураЛитератураМатематика
МедицинаМеханикаОбразованиеОхрана трудаПедагогика
ПолитикаПравоПрограммированиеПсихологияРелигия
СоциологияСпортСтроительствоФизикаФилософия
ФинансыХимияЭкологияЭкономикаЭлектроника

Схема постановки реакции преципитации

Тема занятия. Иммунологические методы диагностики. | Этапы проведения практического занятия. | Тестовый контроль итоговый | МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ВЫПОЛНЕНИЮ ПРАКТИЧЕСКОЙ РАБОТЫ С ПОЛНЫМ РЕГЛАМЕНТОМ ПРОТОКОЛА ЗАНЯТИЯ | Приложение 1 | ИНТЕНСИВНОСТЬ ОБРАЗОВАНИЯ АГГЛЮТИНАТА | СХЕМА ПОСТАНОВКИ РЕАКЦИИ | МЕТОД ФЛЮОРЕСЦИРУЮЩИХ АНТИТЕЛ (РИФ) | Приложение 12 | Единицы измерения токсина и антитоксина |


Читайте также:
  1. I. Завершенные постановки
  2. II. Неосуществленные постановки
  3. Анализ биоэнергетического состояния человека по методу ГРВ (газоразрядная визуализация) Схематичное представление
  4. Ассоциативные воспоминания вызывают автоматические реакции
  5. Биотические факторы среды. Гомо- гетеротипические реакции
  6. Блок-схема коррелатного способа уравнивания
  7. Блок-схема параметрического способа уравнивания

1. По типу реакции флоккуляции. Реакция ставится в узких преципитационных пробирках диаметром 0,5 см, высотой 7— 10 см.

Ингредиенты Опыт Контроль
Преципитирующая сыворотка, мл 0,5 -
Нормальная сыворотка того же вида животного, мл - 0,5
Преципитиноген в различных или одних разведениях 0,5 0,5
Встряхнуть, инактивировать при +37 С° 2 часа или 18 – 20С° 18 – 20 часов
Учет реакции по наличию хлопьев преципитации + -

 

При положительной реакции на дно пробирки выпадают хлопья преципитата (флокулята — рыхлые хлопьевидные агрегаты).

2. По типу реакции кольцепреципитации. В 2 узкие (преципитационные) пробирки налить по 0,1 — 0,2 мл иммунной преципитирующей сыворотки (опыт) и нормальную неиммунную сыворотку того же вида (контроль), затем осторожно по стенке пробирки наслоить термопреципитиноген (например, гаптен). Реакцию учитывают при содержании пробирок либо в термостате, либо при комнатной температуре. В опытной пробирке на границе обеих жидкостей в течение З — 10 минут образуется плотное мутно-белое кольцо — кольцо преципитации. В контроле такого кольца нет.

З. Диффузионный метод преципитации в геле. Принцип метода: вещества (антиген, антитела), диффундирующие в геле навстречу друг другу, реагируя между собой, образуют преципитат беловатого цвета разной конфигурации. В контроле он не наблюдается.

Ингредиенты и техника постановки реакции:

- Готовят 1 - 1,5 % голодный агар - агар, разливают его в горячем расплавлен­ном виде в любые стеклянные объекты: в чашки, на отмытые фотопластины, на предметные стекла (для микрометода). Дают застыть.

- Под объекты подкладывают бумажные расчерченные ориентиры и специальным пробойником делают на равном расстоянии друг от друга лунки. Дно их заливают 1 каплей жидкого агара для избежания затекания реагентов под агар.

- Вносят в лунки 0,1 - 0,5 мл испытуемого вещества (антигена) и напротив специфические преципитирующие сыворотки с антителами.

 

АТ-6
АТ-1
АТ-2
АТ-3
АТ-4
АТ-5
АГ
а)
б)
в)
АГ-1
АГ-2
АГ-3
АГ-4
АТ

 


- Выдержать в термостате 18 - 24 часа, накрыв реагенты крышкой или стеклом для предохранения от испарения.

- Учет результатов ведут по появлению линии преципитата между содержи­мым лунок.

- Метка позволяет дифференцировать родство между антигенами (рис. справа). Концевое слияние полос свидетельствует о полной идентичности антигенов; (а) при стыке полос - неполное родство (б) перекрест - разные антигены, но есть групповые антигены (в).

 

4. Капиллярная реакция преципитации подобна первым методам, но ставится в капиллярах из комплекта для определения СРБ (С реактивного белка).

ОПЫТ
КОНТРОЛЬ
АГ
СЫВОРОТКА
АТ-(N)
+АТ

 

 


 


Методика: В отличие от пробирочного метода первым набирают лёгкий по массе АГ, затем сюда же – сыворотку с тяжелым АТ. После этого оба капилляра вертикально фиксируют в пластине.

Учёт результата производят в опытной пробе по кольцу преципитации на границе АГ и АТ. В контроле его нет.


Дата добавления: 2015-09-05; просмотров: 89 | Нарушение авторских прав


<== предыдущая страница | следующая страница ==>
Постановка реакции нейтрализации токсина антитоксином ин виво| ВОПРОС 1. Местное управление и самоуправление: соотношение понятий. Основные модели местного управления.

mybiblioteka.su - 2015-2024 год. (0.006 сек.)