Студопедия
Случайная страница | ТОМ-1 | ТОМ-2 | ТОМ-3
АвтомобилиАстрономияБиологияГеографияДом и садДругие языкиДругоеИнформатика
ИсторияКультураЛитератураЛогикаМатематикаМедицинаМеталлургияМеханика
ОбразованиеОхрана трудаПедагогикаПолитикаПравоПсихологияРелигияРиторика
СоциологияСпортСтроительствоТехнологияТуризмФизикаФилософияФинансы
ХимияЧерчениеЭкологияЭкономикаЭлектроника

Носители для иммобилизации.

Читайте также:
  1. Наноразмерные структуры как перспективные носители для иммобилизованных ферментных препаратов
  2. Носители информации
  3. НОСИТЕЛИ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ ДЛЯ ЗАПУСКА КОСМИЧЕСКИХ АППАРАТОВ СЕРИИ ЗЕНИТ
  4. ПРИНЦИПЫ ОРГАНИЗАЦИИ РЕАБИЛИТАЦИОННОЙ РАБОТЫ С СОЦИАЛЬНО-ДЕЗАДАПТИРОВАННЫМ КОНТИНГЕНТОМ (НОСИТЕЛИ ВИРУСА СПИД И БОЛЬНЫЕ СПИД)
  5. Теплоносители
  6. ТЕПЛОНОСИТЕЛИ И ИХ ПАРАМЕТРЫ

Вариант 1.

Существует два основных метода иммобилизации ферментов: физический и химический.
Физическая иммобилизация ферментов представляет собой включение фермента в такую среду, в которой для него доступной является лишь ограниченная часть общего объема. При физической иммобилизации фермент не связан с носителем ковалентными связями.

Преимущества иммобилизованных ферментов перед нативными предшественниками:

1. Гетерогенный катализатор легко отделим от реакционной среды, что дает возможность остановить реакцию в любой момент, использовать фермент повторно, а также получать чистый от фермента продукт.

2. Ферментативный процесс с использованием иммобилизованных ферментов можно проводить непрерывно, регулируя скорость катализируемой реакции и выход продукта.

3. Модификация фермента целенаправленно изменяет его свойства, такие как специфичность (особенно в отношении макромолекулярного субстрата), зависимость каталитической активности от рН, ионного состава и других параметров среды, стабильность к денатурирующим воздействиям.

4. Можно регулировать каталитическую активность иммобилизованных ферментов путем изменения свойств носителя действием физических факторов, таких как свет и звук. Иммобилизовать ферменты можно как путем связывания на нерастворимых носителях, так и путем внутримолекулярной или межмолекулярной сшивки белковых молекул низкомолекулярными бифункциональными соединениями, а также путем присоединения к растворимому полимеру

Существует четыре типа связывания ферментов:

- адсорбция на нерастворимых носителях;
- включение в поры геля;
- пространственное отделение фермента от остального объема реакционной системы с помощью полупроницаемой перегородки (мембраны);
- включение в двухфазную среду, где фермент растворим и может находиться только в одной из фаз.

Требования к носителям:

u высокая химическая и биологическая стойкость;

u высокая химическая прочность;

u достаточная проницаемость для фермента и субстратов, пористость, большая удельная поверхность;

u возможность получения в виде удобных в технологическом отношении форм (гранул, мембран);

u легкая активация;

u высокая гидрофильность; невысокая стоимость.

а - адсорбция на нерастворимых носителях, б – включение в поры геля, в – отделение фермента с помощью полупроницаемой мембраны, г – использование двухфазной реакционной среды

Классификация носителей:

Неорганические макропористые носители:

u Силикагель

u Глины

u Цеолиты

u Металлические носители

u Оксиды металлов (порошки)

Органические полимерные носители:

u Полисахариды (природные - целлюлоза, хитин, хитозан, декстраны, агароза, коллаген; синтетические – полимеры на основе стирола, акриловой к-ты, поливинилового спирта, полиамидные и полиуретановые носители)

Адсорбционная иммобилизация:

u является наиболее старым из существующих способов иммобилизации ферментов, начало ей было положено еще в 1916 г. способ достаточно прост и достигается при контакте водного раствора фермента с носителем.

Преимущества метода адсорбционной иммобилизации:

К недостаткам адсорбционной иммобилизации следует отнести:

u прочность связывания фермента с носителем не всегда достаточно высока, что ограничивает применение метода.

u отсутствие общих рекомендаций, позволяющих сделать правильный выбор носителя и оптимальных условий иммобилизации конкретного фермента.

Способы адсорбционной иммобилизации:

§ Статический способ

§ Способ с перемешиванием

§ Статический способ

§ Способ с перемешиванием

§ Нанесение на колонки

§ Электроосаждение

Факторы, влияющие на адсорбцию:

§ Удельная поверхность и размер пор носителя

§ рН

§ Температура

§ Ионная сила раствора

§ Концентрация фермента в растворе

Способы повышения эффективности адсорбции:

Включение в гель:

Суть метода иммобилизации состоит в том, что молекулы фермента включаются в трехмерную сетку из тесно переплетенных полимерных цепей, образующих гель. Гели могут быть органической и неорганической природы. ПРИМЕР – иммобилизация в агар. Существует два способа:

u Полимеризация в растворе фермента

u Внесение фермента в раствор готового полимера

Преимущества:

Недостатки:

Общий принцип иммобилизации ферментов с использованием мембран:

Водный раствор фермента отделяется от водного раствора субстрата полупроницаемой перегородкой. Полупроницаемая мембрана легко пропускает небольшие молекулы субстрата, но непреодолима для крупных молекул фермента. Методы:

u Микрокапсулирование

u Включение в волокна

u Включение в полые волокна

u Включение в липосомы

Способы получения липосом:

Достоинства:

Недостатки:

Использование двухфазной реакционной среды:

Субстрат и продукт ферментативного превращения распределяются между обеими фазами в соответствии с их растворимостями в этих фазах. Природа фаз подбирается таким образом, что продукт накапливается в той из них, где фермент отсутствует.

Ковалентная сшивка:

Путем химического взаимодействия на структуру фермента в его молекуле создаются новые ковалентные связи, в частности между белком и носителем.

 

 

 

 

Вариант 2:

Носители для иммобилизации.

Неорганические материалы:

l Адсорбция (Активированный уголь)

l Адсорбия, ковалентная связь (Оксид алюминия, Пористое стекло)

l Адсорбия, ковалентная связь включение (Силикагель)

l Адсорбия (Оксид титана, Оксид циркония, Оксид железа, Каолин, Бетонит, Вермикулит, Перлит)

Полисахариды:

l Адсорбия, ковалентная связь (Целлюлоза, Агароза)

l Включение (Альгинат кальция)

l Адсорбция (Декстраны)

l Включение (Каррагенаны)

Белки:

l Включение, ковалентная связь (Коллаген,Желатин)

Сополимеры акрила:

l Включение, ковалентная связь (Пголиакриламид,Глицедилметакриловые гели)

l ковалентная связь (Сферон, Энзакрил, Эупергит)

Сополимеры стирола:

l Адсорбция, ковалентная связь (Амберлит, Полиаминостирол)

Наноматериалы:

l Адсорбция, ковалентная связь (Наноалмазы, Фуллерены, Нанотрубки, Наностручки)

Первооткрывателями фуллеренов были Харольд Крото, Ричард Смолли, Роберт Кёрл. За свое открытие получили Нобелевские премии. Размеры фуллеренов различны: от С50 до С540.

Нанотрубочки могут быть обычными, многослойными, в виде пучков, на подложке.

Функциональнные группы на поверхности детонационных наноалмазов:

 

 

Целесообразно проводить их в следующих направлениях:

l = разработка и создание на основе НА новых нанотехнологий и новых наноматериалов для выделения белков, их адаптация и внедрение в промышленное производство белковых препаратов;

l = изучение взаимодействия НА с молекулами ДНК с целью применения наночастиц в новых технологиях для генной инженерии;

l = изучение возможностей транспорта биомакромолекул и веществ с помощью НА через мембраны к биологическим мишеням;

l = изучение влияния НА на сложноорганизованные биологические системы, включая организмы животных и человека;

l = разработка и создание биосенсорных систем на основе комплексов НА-маркерные биомолекулы;

l = изучение возможностей применения НА как новых наноматериалов медицинского назначения (энторосорбенты, носители лекарственных препаратов).


Дата добавления: 2015-07-12; просмотров: 284 | Нарушение авторских прав


<== предыдущая страница | следующая страница ==>
СИСТЕМЫ ФАЗОВОЙ АВТОПОДСТРОЙКИ ЧАСТОТЫ (ФАПЧ) В ТЕХНИКЕ СВЯЗИ| Прочие способы.

mybiblioteka.su - 2015-2024 год. (0.011 сек.)