Читайте также:
|
Исследуемый материал
| Посев на плотные среды: чашка с кровяным агаром чашка с бензидиновым агаром чашка со средой Виллиса-Хоббс пробирки со средой Вильсон-Блера Инкубация в анаэробных условиях при 370 в течение 1-7 суток. | Посев на жидкие среды для накопления (мясные, казеиновые). Инкубация при 370 в течение от 16 часов до 15 суток. Выросшие культуры, содержащие массу грамположительных палочек, пересевают на плотные среды, как указано. |
Микроскопия и пересев на мясную или казеиновую среду колоний, вызывающих гемолиз, покраснение, опалесценцию или почернение на одной из указанных сред и состоящих из грамположительных палочек, для получения чистых культур и последующего изучения их свойств.
Среда Виллиса-Хоббс: смесь (400 мл бульона Хоттингера + 4,8 грамма агара; 4,8 грамма лактозы и 1,3 мл 1% раствора нейтрального красного) автоклавируют, охлаждают до 55-50 и добавляют 15 мл суспензии яичного желтка и 60 мл стерильного обезжиренного молока.
Приложение к занятию 6.
Причины высокой чувствительности строгих анаэробов к кислороду объясняют следующими обстоятельствами:
1.Отсутствием у них каталазы (в присутствии кислорода накап
ливается" перекись водорода, которая и оказывает бактерицидное
действие на анаэробы).
2.В аэробных условиях тормозятся анаэробные энергетические
процессы.
3.Отсутствием у анаэробов систем регуляции окислительно-
восстановительного потенциала. В присутствии кислорода он повы-
шается, анаэробы не могут понизить его до необходимого уровня и
поэтому их рост подавляется.
Возможно, у разных видов анаэробов чувствительность к кислороду обусловлена разными механизмами.
ЗАНЯ ТИ Е 7
Дата_______________
Тема: ИНФЕКЦИЯ. ФАКТОРЫ ПАТОГЕННОСТИ
МИКРООРГАНИЗМОВ
План занятия
1. Исследование смеси бактерий. Проверка чистоты выросшей на
МПА культуры (макро- и микроскопия).
2. Методы культивирования анаэробов. Регистрация результатов
посева почвы. Макро- и микроскопия выросших культур.
3. Регистрация результатов опыта с посевами бактерий на среды
Плоскирева, Эндо и МПА.
4. Факторы патогенности. Экзотоксины.
а)Определение экзотоксина реакцией преципитации в геле. Демонстрация.
б)Мембраноповреждающие токсины (разрушают эритроциты, лейкоциты, тромбоциты, мастоциты, клетки культур тканей, протопласты и др.). Определение повреждающего действия на эритроциты (гемотоксина).
в)Определение некротоксического действия мембраноповреждающего токсина с помощью внутрикожной пробы на лабораторных животных - дермонекротическая проба. Демонстрация.
5.Факторы патогенности. Эндотоксин. Определение эндотоксина пробой на кролике. Демонстрация.
6.Факторы патогенности. Ферменты.
а)Гиалуронидаза. Определение гиалуронидазы - фактора проникновения в опыте на кролике. Демонстрация.
б)Фибринолизин. Определение фибринолизина на средах с плазмой крови. Разбор методики.
в)Плазмокоагулаза. Определение плазмокоагулазы, демонстрация опыта.
г)Лецитиназа. Определение лецитиназы на желточных средах. Демонстрация.
7.Методы заражения экспериментальных животных. Заражение белой мыши.
Дата добавления: 2015-12-07; просмотров: 93 | Нарушение авторских прав