Посев на элективные культуральные среды

Микробиологический анализ

Определение численности микроорганизмов и их активности, изучение их видового разнообразия проводится при оценке роли микроорганизмов в процессах круговорота веществ и энергии в водоемах.

Изучение микробного пейзажа

Структуру микробного сообщества в воде, осадках и почве изучают при помощи стекол обрастания.

Для этого обезжиренное предметное стекло помещают в воду, осадки и почву от 1 до 10 суток в зависимости от активности микроорганизмов и экспедиционных условий. Затем снимают и высушивают. При транспортировке беречь одну сторону стекла от механического повреждения. В лаборатории одну сторону очищают, на второй стороне красят (метиленовым синим, акридиновым оранжевым или другими красителями) микробные клетки и под микроскопом просматривают. Для изучения распределения клеток бактерий необходимо провести непрерывный просмотр по профилю, что дает возможность изучения пространственного распределения, подсчет и фотографирование клеток.

Отбор проб для микробиологического анализа в лаборатории

Пробы воды, осадков и мата отбирают в стерильную посуду. Для микробиологических посевов пробы должны хранится при низкой температуре, в темноте. Для микроскопии пробы осадков, почвы и мата (2-5 мл) фиксируют этанолом (1:2), глутаральдегидом, глицерином. Воду 5-50 мл в зависимости от численности микроорганизмов фильтруют через фильтр с порами диаметром 0,4 мк при определении водорослей и цианобактерий, 0,2 мк при определении эу- и архебактерий.

Определение общей численности бактерий

1. Пробу ила фиксируют этанолом (1:2). На обезжиренное предметное стекло нанести 0,1 мл ил на площади 1 см². Добавить 0,5 мл 5% эритрозина в 5% растворе карболовой воды. Промыть стерильной водой до исчезновения краски. Высушить над пламенем спиртовки или зажигалки. Транспортировать в лабораторию в коробке, предохраняя от механического повреждения.

2. Пробу ила или мата 1-10 мл развести в 10 раз стерильной дистиллированной водой. Добавить Твин - 80 и интенсивно трясти в течение 1 ч для десорбции клеток бактерий. Затем отобрать 10-20 мл водного раствора и фильтровать через мембранный фильтр. На фильтр капнуть 0,5 мл 5%-ного раствора эритрозина, приготовленного в 5%-ном растворе карболовой воды, и положить в чашку Петри с мокрой фильтровальной бумагой на 1 сутки. Затем краску отмыть, перекладывая фильтр на мокрую фильтровальную бумагу и высушить. Транспортировать в лабораторию в коробке, предохраняя от механического повреждения.

Посев на элективные культуральные среды

В экспедиционных условиях проводят посев проб воды, осадков, матов на готовые культуральные среды для выявления и учета представителей различных физиологических групп бактерий. Посев проводится с использованием пламени спиртовки. Пробирки с посевом инкубируют при температуре от 25 до 30°С, если позволяют условия, или при температуре окружающей среды, избегая резких перепадов температуры.

Дата добавления: 2015-07-08