Студопедия
Случайная страница | ТОМ-1 | ТОМ-2 | ТОМ-3
АрхитектураБиологияГеографияДругоеИностранные языки
ИнформатикаИсторияКультураЛитератураМатематика
МедицинаМеханикаОбразованиеОхрана трудаПедагогика
ПолитикаПравоПрограммированиеПсихологияРелигия
СоциологияСпортСтроительствоФизикаФилософия
ФинансыХимияЭкологияЭкономикаЭлектроника

Заряженные группы ионообменников

Хроматографические методы очистки биомолекул | Анализ состава многокомпонентных образцов | Обессоливание | Концентрирование | Иммуноаффинная хроматография |


Читайте также:
  1. Амортизация основных фондов, амортизация группы.
  2. Амфотерными называются такие гидроксиды, которые способны отдавать в реакциях с другими соединениями как атомы (ионы) водорода, так и гидрокси-группы (анионы гидроксила).
  3. Антенатальная охрана плода в условиях акушерско-педиатрического-терапевтического комплекса (АТПК). Группы риска в антенатальном и неонатальном периодах.
  4. Большая часть мышц передней группы предплечья иннервируется (1)
  5. Возрастные группы и номинации
  6. Возрастные группы участников
  7. Времен группы Perfect

Наличие и свойства заряженных функциональных групп определяют свойства всего ионообменника, такие как тип и сила. Концентрация ионообменных групп на поверхности матрицы определяет емкость хроматографического носителя.

Ионообменники можно разделить на катионообменники и анионообменники (рис. 6), которые могут быть сильными и слабыми (табл. 1).

Рис. 6. Схематическое изображение гранул ионообменников


Табл. 1. Типичные группы, используемые для получения ионообменников

Анионообменники Функциональная группа
Слабые Диэтиламиноэтил (DEAE, ДЭАЭ) -O-(CH2)2-N+H(CH2CH3)2
Сильные Четвертичный аминоэтил (QAE) -O-(CH2)2-N+(C2H5)2-CH2-CHOH-CH3
Четвертичный амин (Q) -O-CH2-CHOH-CH2-N+(CH3)3
Катионообменники  
Слабые Карбоксиметил (СМ) -О-СН2-СОО-
Сильные Сульфопропил (SP) -O-CH2-CHOH-CH2-O-CH2-CH2-CH2SO3-
Метилсульфонат (S) -O-CH2-CHOH-CH2-O-CH2-CHOH- CH2SO3-

Сульфогруппы и четвертичные амины используются для получения сильных ионообменников, остальные группы используются для слабых. Следует обратить внимание, что термины «сильные и слабые ионообменники» характеризуют способность к ионизации в зависимости от рН, а не силу взаимодействия с сорбируемым веществом. Сильные ионообменники заряжены в широком диапазоне рН, в то время, как степень диссоциации слабых ионообменников, и, следовательно, емкость, меняется при различных значениях рН.

Из вышесказанного можно сделать несколько выводов:

- Емкость сильных ионообменников не снижается при высоких или низких значениях рН из-за потери заряда ионообменником.

- Механизм сорбции между сильными ионообменниками и образцом достаточно простой, что существенно облегчает контроль процесса ионного обмена при различных значениях рН и улучшает воспроизводимость анализа.


Примеры разделения биомолекул методом ионообменной хроматографии.

Рис. 7. Двухстадийная схема выделения индивидуального фермента с использованием последовательной комбинации стадий анионообменной и катионообменной хроматографии

Рис. 8. Разделение нуклеотидов на анионообменной колонке высокого разрешения


Хроматофокусирование

Разделение белков по их изоэлектрической точке с помощью изоэлектрофокусировния является весьма эффективным и распространенным методом. Разрешение, достигаемое при аналитическом изоэлектрофокусировании, является одним из наиболее высоких, которые удается получить при помощи современных биохимических методов.

Хроматофокусирование – широко применяемый метод, удобный для решения биохимических проблем, связанных с препаративным разделением веществ.

Хроматофокусирование на колонках, основано на разделении белков, полипептидов в соответствии с их изоэлектрическими точками, и является уникальным методом высокого разрешения даже при низком давлении. Ширина получаемых пиков может быть 0,02-0,05 единиц рН, причем количество разделяемого белкового образца может измеряться несколькими десятками миллиграммов на каждом этапе выделения.

 


Дата добавления: 2015-10-02; просмотров: 85 | Нарушение авторских прав


<== предыдущая страница | следующая страница ==>
Матрицы для ионообменных носителей| Механизм хроматофокусирования

mybiblioteka.su - 2015-2024 год. (0.008 сек.)