Индентификация отдельных витаминов

В настоящее время, согласно методикам, приведенным в Государственной фармакопеи республики Беларусь, каждый витамин определяется отдельно [1].

♦ Для идентификации фолиевой кислоты используют тонкослойную хроматографию.

Готовят:

· испытуемый раствор: 50 мг испытуемого образца растворяют в смеси из раствора аммиака концентрированного и метанола (2:9) и доводят до объема 100,0 мл этой же смесью растворителей;

· раствор сравнения: 50 мг фолиевой кислоты растворяют в смеси из раствора аммиака концентрированного и метанола (2:9) и доводят до объема 100,0 мл этой же смесью растворителей.

Пластинка: ТСХ пластинка со слоем силикагеля GP.

Подвижная фаза: раствор аммиака концентрированного – пропанол – 96% спирт (20:20:60).

Наносимый объем пробы: 2 мкл.

Фронт подвижной фазы: не менее ¾ высоты пластинки.

Высушивание: на воздухе.

Проявление: пластинку просматривают в УФ-свете при длине волны 365 нм.

Результаты: на хроматограмме испытуемого раствора обнаруживается пятно, соответствующее по расположению, флуоресценции и размеру основному пятну на хроматограмме раствора сравнения [6].

♦ Для идентификации цианкобаламина также используют тонкослойную хроматографию. Испытания проводят с защитой от света.

Готовят:

· испытуемый раствор: 2 мг испытуемого образца растворяют в 1 мл смеси 96% спирт – вода (1:1);

· раствор сравнения: 2 мг цианкоболамина растворяют в 1 мл смеси 96% спирт – вода (1:1).

Пластинка: ТСХ пластинка со слоем силикагеля GP.

Подвижная фаза: раствор аммиака разведенный – метанол – метиленхлорид (9:30:4%) (камеру не насыщают парами подвижной фазы).

Наносимый объем пробы: 10 мкл.

Фронт подвижной фазы: не менее 12 см от линии старта.

Высушивание: на воздухе.

Проявление: пластинку просматривают при дневном свете.

Результаты: на хроматограмме испытуемого раствора обнаруживается основное пятно, соответствующее по расположению, цвету и размеру основному пятну на хроматограмме раствора сравнения [6].

♦ Для идентификации витамина Е (α-токоферола) используют тонкослойную хроматографию. Испытания проводят с защитой от света.

Готовят:

· испытуемый раствор: 10 мг испытуемого образца растворяют в 2 мл циклогексана;

· раствор сравнения: 10 мг ФСО α-токоферола растворяют в 2 мл циклогексана.

Пластинка: ТСХ пластинка со слоем силикагеля F₂₅₄.

Подвижная фаза: эфир-циклогексан (20:80, об/об).

Наносимый объем пробы: 10 мкл.

Фронт подвижной фазы: не менее ⅔ высоты пластинки.

Высушивание: на воздухе.

Проявление: пластинку просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм.

Результаты: на хроматограмме испытуемого раствора обнаруживается основное пятно, соответствующее по расположению, флуоресценции и размеру основному пятну на хроматограмме раствора сравнения [6].

Дата добавления: 2015-08-17