Студопедия
Случайная страница | ТОМ-1 | ТОМ-2 | ТОМ-3
АвтомобилиАстрономияБиологияГеографияДом и садДругие языкиДругоеИнформатика
ИсторияКультураЛитератураЛогикаМатематикаМедицинаМеталлургияМеханика
ОбразованиеОхрана трудаПедагогикаПолитикаПравоПсихологияРелигияРиторика
СоциологияСпортСтроительствоТехнологияТуризмФизикаФилософияФинансы
ХимияЧерчениеЭкологияЭкономикаЭлектроника

Микробиологическая диагностика бактериальных пневмоний

Читайте также:
  1. IV. Лабораторная диагностика ВИЧ-инфекции
  2. Амиотрофический боковой склероз. Этиология. Патогенез. Классификация. Клиника. Диагностика. Лечение. Прогноз.
  3. Вирусологическая диагностика аренавирусных инфекций
  4. Вирусологическая диагностика герпеса
  5. Вирусологическая диагностика натуральной оспы
  6. Вирусологическая диагностика ОРВИ
  7. Вирусологическая диагностика острых респираторных вирусных инфекций и гриппа

И ОСТРЫХ РЕСПИРАТОРНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ (ОРЗ)

Основным возбудителем (около 60%) бактериальных пневмоний в настоящее время является пневмококк (Streptococcus pneumoniae), реже (30-40%) – клебсиеллы (Klebsiella pneumoniae), хламидии (Chlamydophila pneumoniae), микоплазмы (Mycoplasmapneumoniae), стафилококк (Staphylococcus aureus), гемофильные палочки (Haemophilus influenzae), легионеллы (Legionella pneumophila).

Подходы к лабораторной диагностике бактери­альных пневмоний и ОРЗ, независимо от вида возбудителя, принципиально, одинаковы.

Материалом для исследования являются мокрота, отделяемое слизистой оболочки трахеи и бронхов, промывные воды бронхов, экссудат из плев­ральной полости, кровь, спинномозговая жидкость при менин­гите, отделяемое зева и носа при ОРЗ.

Микроскопический метод (микроскопия мазков из исследуемого материала, окрашенных по Граму) имеет ориентировочное значение. Наличие в препаратах значительного количества удлиненных ланцетовидных, грамположительных диплококков, окруженных капсулой (Streptococcus pneumoniae – рис. 19 ), скоплений грамположительных кокков в виде гроздьев (S.aureus) или грамотрицательных коккобактерий (H.influenzae) позволяет поставить пред­варительный диагноз бактериальной пневмонии и служить ориентиром для назначения антибактериальной терапии.

Рис. 19. Пневмококк (Streptococcus pneumoniae). Окраска по Граму. х 900

Бактериологическое исследование явля­ется ведущим методом диагностики пневмоний и ОРЗ бактериальной этиологии, которое дает возможность не только выделить возбудителя инфекции, но и определить его чувствительность к антибиотикам.

Для выделения пневмококка (Streptococcus pneumoniae) осуществляют посев исследуемого материала на МПБ с глюкозой и на кровяной МПА. Посевы выращивают в термостате при 370 С в течение суток. Выросшие на кровяном МПА нежные колонии окружены зеленоватой зоной гемолиза. Из колоний готовят мазок, изучают морфологические и тинкториальные свойства, после чего остаток колонии пересевают на скошенный кровяной МПА или сахарный (или сывороточный) МПБ с целью выделения чистой культуры и ее идентификации на основании комплекса биологических свойств.

Дифференциация S.pneumoniae и S.pyogenes основывается на проверке чувствительности выделенной культуры к желчи и оптохину, а также способности ферментировать инулин.

Серотипирование пневмококка проводится с помощью РА на стекле с использованием типоспецифических пневмококковых сывороток (известно около 90 серова­ров пневмококка, из которых 23 играют важную роль в патологии человека). Для серотипирования пневмококков может использоваться реакция Нейфельда (фено­мен набухания капсулы стрептококка в присутствии типоспецифической сыворотки).

Для изоляции клебсиелл выполняют посев исследуемого материала на МПА с пенициллином (для подавления сопутствующей микрофоры) в чашках Петри или на дифференциально-диагностические среды с лактозой и индикатором бром-тимоловым синим, на которых спустя сутки культивирования при 370 С образуются блестящие выпуклые слизистые колонии (на дифференциально-диагностической среде колонии имеют желтый цвет в результате разложения лактозы). На 2 день колонии исследуют визуально и с помощью микроскопического метода (окраска по Граму и Гинсу-Бурри для выявления капсул), после чего пересевают типичные колонии на среду Ресселя или скошенный МПА для выделения чистой культуры возбудителя. На 3 день учитывают рост на указанных средах (окрашивание столбика и скошенной части среды Ресселя в желтый цвет с разрывами агара в результате расщепления глюкозы и лактозы с образованием газа) и проводят идентификацию культуры клебсиелл по основным биологическим свойствам (образование капсулы, отсутствие подвижности, биохимические и антигенные свойства).

Для выделения микоплазм производят посев на специальные питательные среды с добавлением сыворотки, на которых они не ранее чем через месяц после образуют характерные микроскопические колонии с ровными краями и зернистой структурой. Выделенную чистую культуру микоплазм идентифицируют по биохими­ческим и антигенным свойствам.

Выделение легионелл, являющихся медленно рас­тущими микроорганизмами, осуществляют с применением селективных питательных сред сложного состава, содержащих дрожжевой экстракт и другие факторы роста, а также различные антибиотики для подавления роста сопутст­вующей микрофлоры. Легионеллы относятся к медленно растущим микроорганизмам, однако микроколонии, видимые под мик­роскопом, появляются на 2-е сутки роста, тогда как макроскопически видимые мелкие колонии (2-4 мм) правильной округлой формы, с ровными краями и блестящей поверхностью с характерным ро­зовым или сине-зеленым ободком и опалесцирующим центром - через 3-5 суток. Идентификацию выделенной чистой культуры до уровня рода проводят на основании изучения биологических свойств. Для видовой идентификации разработаны ИФМ, газожидкостная хрома­тография, генодиагностика (рестрикционный анализ, метод ДНК-зондов).

Серологический метод диагностики пневмоний, вызванных пневмококками, микоплазмами, хламидиями и легионеллами при исследовании парных сывороток крови больных (в остром периоде и в стадию реконвалесценции) с помощью РСК, РНГА, ИФА не является клинически обязательным и имеет эпидемиологическое значение. Для определения антител к легионеллам используют, кроме того, непрямой ИФМ с антигеном из легионелл (диагностический титр 1:32 и более).

Экспресс-методы. Разработан иммуноферментный тест для определения в моче специфичного антигена легионелл, а также иммунохроматографический тест для выявления в моче пневмококкового антигена, однако широкое применение этих методов ограничено.

Генодиагностика. Предложена ПЦР для диагностики хламидиозов и микоплазмозов, однако метод широко в клинической практике не используется.

Биопроба. Исследуемыйматериал для выделения пневмококков вводят внутрибрюшинно белым мышам или морским свинкам. Культуру пневмококка выделяют из крови и органов погибшего или забитого животного, а также проводят бактериоскопию мазков-отпечатков, сделанных из его органов. В настоящее время метод практически не применяется.


Дата добавления: 2015-09-03; просмотров: 108 | Нарушение авторских прав


Читайте в этой же книге: Микробиологическая диагностика иерсиниозов | Микробиологическая диагностика кампилобактериозов | Микробиологическая диагностика геликобактериоза | Самостоятельная работа студентов | Лабораторная диагностика бактериальной дизентерии. | Микробиологическая диагностика холеры | Лабораторная диагностика ботулизма | Самостоятельная работа студентов | Лабораторная диагностика дифтерии | Микробиологическая диагностика коклюша и паракоклюша |
<== предыдущая страница | следующая страница ==>
Микробиологическая диагностика гемофильной инфекции| Лабораторная диагностика туберкулеза и микобактериозов

mybiblioteka.su - 2015-2024 год. (0.007 сек.)