Студопедия
Случайная страница | ТОМ-1 | ТОМ-2 | ТОМ-3
АвтомобилиАстрономияБиологияГеографияДом и садДругие языкиДругоеИнформатика
ИсторияКультураЛитератураЛогикаМатематикаМедицинаМеталлургияМеханика
ОбразованиеОхрана трудаПедагогикаПолитикаПравоПсихологияРелигияРиторика
СоциологияСпортСтроительствоТехнологияТуризмФизикаФилософияФинансы
ХимияЧерчениеЭкологияЭкономикаЭлектроника

Процедура выделения ДНК

Читайте также:
  1. Выделения
  2. Выделения относительно активной ячейки
  3. Вычислительная процедура симплексного метода
  4. Гл. 6. Сертификация как процедура подтверждения соответствия.
  5. Глава 29. ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ О ТАМОЖЕННЫХ ПРОЦЕДУРАХ
  6. Глава 29. ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ О ТАМОЖЕННЫХ ПРОЦЕДУРАХ
  7. Глава 31. ТАМОЖЕННАЯ ПРОЦЕДУРА ЭКСПОРТА

 

 

Шаги 1 и 2: сбор и лизис клеток

 

Чтобы собрать достаточное количество эпителиальных клеток со слизистой ваших щек, вы должны осторожно жевать внутренние части вашего рта в течение 30 секунд, и потом прополоскать рот небольшим количеством воды. Для успеха работы важно собрать нужное количество клеток, поэтому удостоверьтесь в том, что вы достаточно долго жевали ваши щеки.

 

  1. Возьмите с вашего стола 15 мл пробирку, содержащую 3 мл воды. Подпишите ее вашими инициалами.

 

 

 

  1. Осторожно пожуйте внутренние поверхности ваших щек в течение 30 секунд. НЕ НАДО кусать щеки до крови!

 

  1. Наберите воду из 15-мл пробирки в рот и тщательно полощите его в течение 30 секунд. Не глотайте воду!

 

  1. Аккуратно выплюньте воду обратно в пробирку

 

 

  1. Найдите на вашем столе 15-мл пробирку с надписью «лизис». Используя чистую одноразовую пластиковую пипетку, добавьте 2 мл буфера для лизиса в вашу пробирку.

 

 

6. Закрутите пробирку крышкой и аккуратно переверните пробирку 5 раз (не трясите ее!). Посмотрите на пробирку. Вы заметили какие-то изменения? Если да, запишите их.

 

 

 

Шаг 3: удаление белков

 

1. Возьмите с вашего стола маленькую пробирку с протеазой («прот»). Добавьте 5 капель протеазы (5x250 мкл) к вашему образцу.

 

 

  1. Закройте пробирку и несколько раз переверните ее, чтобы перемешать содержимое

 

 

3. Поместите вашу пробирку в штатив или стакан на водяную баню, нагретую до 50°С на 10 минут. По истечении этого времени выньте пробирки.

 

Шаги 4 и 5: сделайте вашу ДНК видимой

 

 

1. (Возможно, вам нужно будет сделать этот шаг на столе учителя.) Возьмите у вашего преподавателя пробирку с холодным спиртом. Наполните одноразовую пластиковую пипетку холодным спиртом

 

 

3. Держа пробирку с вашим образцом под углом 45º, добавьте туда 10 мл спирта, так чтобы он медленно стекал по стенке пробирки. Завинтите крышку на пробирке.

 

 

4. Поставьте пробирку прямо перед вами в стакан или штатив, и оставьте ее на 5 минут, не трогая.

 

5. Через 5 минут, снова посмотрите на пробирку. Обратите внимание на границу слоев воды и спирта. Вы видите что-нибудь? Запишите свои наблюдения. Сравните ваш образец с образцами ваших одноклассников.

 

6. Медленно переверните пробирку 5 раз, чтобы ускорить осаждение ДНК. Обратите внимание на плавающие в пробирке нити, белые или прозрачные. Это ваша ДНК!

 

 

7. Если вы хотите сделать кулон со своей ДНК, учитель даст вам стеклянную бутылочку. Вы должны одноразовой пипеткой осторожно перенести туда вашу ДНК вместе с 750 мкл-1 мл раствора. Учитель покажет вам, как запечатать бутылочку и сделать кулон.

 

Если вы не хотите делать кулон,вы можете перенести свою ДНК в микропробирку и хранить ее там. Просто перенесите одноразовой пипеткой ДНК вместе с 1 мл раствора спирта в микропробирку. Закройте крышку и удивите ваших близких и друзей вашей собственной ДНК!

 

 

Руководство для учеников: продвинутый уровень

 

 

Гены на ладони: ваша сущность у вас в руках

 

Содержание

 

Урок 1 Введение

Урок 2 Выделение и осаждение ДНК из клеток слизистой щеки

Урок 3 Изготовление ДНК-кулона (по желанию)

 


Дата добавления: 2015-08-10; просмотров: 79 | Нарушение авторских прав


Читайте в этой же книге: Учебное руководство | Ключи к успеху | ДНК-профилирование | Использование пипетки | Замечания для преподавателя | Введение | Шаг 1. Собрать эпителиальные клетки с поверхности щеки | Наглядное объяснение работы | Ниже приведено схематическое изображение эпителиальной клетки. Обозначьте различные структуры клетки, включая ядро, цитоплазму и мембрану. | філія пгт. Апостолове вул Каманіна 56а т. 05656-9-80-87,0963145972 |
<== предыдущая страница | следующая страница ==>
Шаг 2. Разрушить (лизировать) клетки| Структура ДНК

mybiblioteka.su - 2015-2024 год. (0.007 сек.)