Студопедия
Случайная страница | ТОМ-1 | ТОМ-2 | ТОМ-3
АвтомобилиАстрономияБиологияГеографияДом и садДругие языкиДругоеИнформатика
ИсторияКультураЛитератураЛогикаМатематикаМедицинаМеталлургияМеханика
ОбразованиеОхрана трудаПедагогикаПолитикаПравоПсихологияРелигияРиторика
СоциологияСпортСтроительствоТехнологияТуризмФизикаФилософияФинансы
ХимияЧерчениеЭкологияЭкономикаЭлектроника

Отбор на устойчивость к антибиотикам

Читайте также:
  1. II. Порядок медицинского отбора и направления детей на санаторно-курортное лечение
  2. VI. Порядок приема заявлений и документов для участия в конкурсном отборе в высшие учебные заведения
  3. А) Аспирационный метод отбора проб
  4. А,4. Эмоциональная устойчивость 231
  5. Авторская концепция эволюции Земли и естественного отбора.
  6. Б) Седиментационные методы отбора проб
  7. Биологического отбора природы и создание своих концепций.

 

Плазмида pGLO, содержащая ген зеленого флуоресцентного белка, также содержит ген бета-лактамазы, фермента, дающего бактериям устойчивость к антибиотику ампициллину. Бета-лактамаза производится и выбрасывается наружу бактериями, содержащими плазмиду. Секретированная бета-лактамаза инактивирует ампициллин, что позволяет только трансформированным клеткам расти в его присутствии (См. схему ниже).

 

 

 

Регуляция генов

 

Одна из самых важных концепций работы по трансформации бактерий это концепция регуляции работы генов. Экспрессия зеленого флуоресцентного белка находится под контролем арабинозного промотора. Таким образом, когда бактерии высевались на среду, содержащую арабинозу (LB/amp/ara) экспрессировался GFP и колонии выглядели ярко-зелеными. Напротив, когда бактерии высевались на среду без арабинозы (LB/amp) ген выключался и колонии были белыми (см. Приложение D для дополнительных деталей).

 

Теперь если взять белую колонию (которая содержит ген GFP, но не экспрессирует его в отсутствие арабинозы) и инокулировать жидкую среду LB/amp/ara, присутствующая в среде арабиноза будет поглощаться клетками и ген GFP заработает. Таким образом, ученики сеют белую колонию со спящим геном GFP в среду,содержащую арабинозу, она включает ген и культура приобретает способность светиться зеленым. Также ученики сеют зеленую колонию в жидкую среду LB/amp/ara, в этом случае ген остается активным и жидкая культура также будет светиться ярко-зеленым.

 


Дата добавления: 2015-08-10; просмотров: 117 | Нарушение авторских прав


Читайте в этой же книге: Найти иголку в стоге сена легче, если она светится | Руководство для преподавателей | Приготовьте жидкую питательную среду | Разлейте жидкую питательную среду | Бактериальных культур | Урок 3 Первая стадия очистки | Урок 4 Вторая стадия очистки | Урок 5 Третья стадия очистки | Макромолекула, состоящая из цепи аминокислот | Потому что супернатант состоит из среды выращивания и не содержит GFP. |
<== предыдущая страница | следующая страница ==>
Урок 4 Вторая стадия очистки: удаление бактериального дебриса| Гидрофобная хроматография

mybiblioteka.su - 2015-2024 год. (0.006 сек.)