Проверил преподаватель: Рукосуева Т.В.

Проверил преподаватель: Рукосуева Т.В.

Протокол-отчет № 27, от 25 октября 2008, --

Тема: Лабораторная диагностика полиомиелита и заболеваний, вызываемых вирусами полиомиелита, Коксаки, ЕСНО.

Цель

Метод и его содержание

Полученные результаты

Выводы

I. провести вирусологическое
исследование с целью диагностики полиомиелита

1.1 Провести индикацию вируса

1.2 Идентифицировать культуру цитопатогенного вируса

II. провести вирусологическое
исследование с целью герпетической ангины

2.1 Провести индикацию гемагглютинирующего вируса

2.2 Провести культуры гемагглютинирующего вируса

I. Диагностика полиомиелита

1.1 Учёт и оценка результатов заражения культуры ткани исследуемым материалом от обследуемого с диагнозом «полиомиелит»

Материалом для вирусологической диагностики полиомиелита являются: фекалии в первые 10 дней заболевания, отделяемое носоглотки – в первые 3 дня заболевания; из СМЖ – полиовирус выделяют редко. После приготовления проб и проверки их на отсутствие бактерий заражают культуры клеток (фибробластов человеческого эмбриона или почек обезьян, HeLa и др.).

Индикацию вируса проводят по ЦПД; для полиовируса – это полная или частичная дегенерация клеток, выявляемая на 2-3 день инкубации.

Учет результатов осуществляется микроскопически или по ЦП (протокол №25).

Контролем служит интактная культура клеток ткани.

1.2 РН в культуре ткани по ЦП с поливалентной и типовыми полиомиелитными сыворотками и вирусосодержащим материалом

Идентификацию полученной культуры цитопатогенного вируса осуществляют в РН с поливалентной, а затем с типоспецифическими сыворотками I, II, III.

В качестве культуры вируса используют культуральную жидкость первично зараженной культуры ткани, которую смешивают с равным объемом диагностической сыворотки, разведенной 1:5 или 1:10, оставляют на 1-1,5 ч при комнатной t° и после этого заражают культуру ткани. Для этого в пробирку с культурой ткани вносят 0,2 мл смеси и 0,8 мл питательной среды 199.

Критерием достоверности результатов РН являются контроли:

- контроль тканевых культур (незараженная культура ткани с добавлением 1 мл среды 199) для выявления возможной неспецифической дегенерации клеток;

- контроль токсичности сыворотки (наименьшее разведение сыворотки, используемое в опыте, в объеме 0,1 мл вносят в пробирку с культурой ткани и добавляют 0,9 мл среды 199);

- контроль вируса (0,1 мл культуры вируса вносят в пробирку с культурой ткани и добавляют 0,9 мл среды 199).

Учет результатов РН осуществляется на 5-7 день. При этом следует иметь ввиду, что во флаконах с вирусом культура ткани погибает и цвет среды 199 не меняется (остается красным). Там же, где вирус нейтрализуется, среда 199 становится желтой. Положительный и достоверный результат РН свидетельствует о принадлежности вируса к соответствующему виду и типу.

II. Диагностика герпетической ангины

2.1 Учёт и оценка результатов РГА с вирусосодержащим материалом, полученным при заражении культур ткани содержимым везикул обследуемого с клиническим диагнозом «герпетическая ангина».

Диагноз ставится на основе использования вирусологического метода. Материалом служит содержимое везикул. Для индикации гемагглютинирующего вируса в культуральной жидкости используют РГА с эритроцитарными I (0) группы человека (протокол № 26)

2.2 Учёт и оценка результатов РТГА с поливалентной, типовыми диагностическими сыворотками Коксаки А и полученной культурой вируса

Для сероидентификации культуры гемагглютинирующего вируса используют РТГА с диагностическими сыворотками Коксаки А, разведенными 1:5 или 1:10 и культурой вируса в дозе 4 АЕ.

Для проверки достоверности результатов РТГА ставят контроли:

- контроль эритроцитов на отсутствие спонтанной агглютинации;

- контроль сывороток на отсутствие неспецифических факторов агглютинации;

- контроль гемагглютинирующих свойств полученной культуры вируса.

Наименование	Что содержит	Для чего применяется	Как применяется
живая полиомиелитная вакцина	аттенуированные (ослабленные) штаммы Сэбина вируса полиомиелита типов 1,2,3.	Специфическая иммунопрофилактика	Вакцина предназначена для перорального применения
диагностические поливалентные и типовые сыворотки полиомиелитные, Коксаки, ЕСНО	сыворотку крови лошади, кролика, хорька или крысы, содержащую антитела к одному из серотипов (сероподтипов) Коксаки вируса или ЕСНО, очищенную от неспецифических ингибиторов гемагглютинации	Для дифференцировки и типирования соответствующих вирусов	в РТГА

Приложение №2

Медицинская документация

Форма № 204/у

Утв. МЗ СССР 04.10.80 № 1030

НАПРАВЛЕНИЕ №__ 23 __

на микробиологическое исследование

«_ 27 _»___ сентября ___2008 г. _ 9 __час._ 40 __мин.

дата и время взятия материала

В __ ЦНИЛ ___лабораторию

Вид исследования__ МПР, РПГА ___

Ф. И. О. __ Иванов Иван Иванович ____Возраст___ 26 ____

Отделение __ кожно-венерологический диспансер ___

Диагноз, дата заболевания___ сифилис (?), 27.09.08 ___

Показания к обследованию: больной, переболевший, реконвалесцент, бактерионоситель, контактный, профобследование (нужное подчеркнуть)

Материал: кровь, мокрота, кал, дуоденальное содержимое, пунктат, спинномозговая жидкость, раневое отделяемое, гной, выпот, секционный материал, мазок (подчеркнуть, вписать) ____________

Должность, фамилия, подпись лица, направляющего материал __ <KRASGMU.NET>, врач ________

____________________________________________________________________________________

Медицинская документация

Форма № 239/у

Утв. МЗ СССР 04.10.80 № 1030

РЕЗУЛЬТАТ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ №___ 23 __

«_ 27 _»___ сентября __2008 г.

дата взятия биоматериала

Ф. И. О. __ Иванов Иван Иванович ____Возраст___ 26 ____

Отделение __ кожно-венерологический диспансер ___

Серологические реакции, с сывороткой крови больного:МПР+, РПГА+ __

указать материал и результат

----------------------------

«_____»____________________2008г. Подпись________________________

дата выдачи результата

Дата добавления: 2015-11-04