Студопедия
Случайная страница | ТОМ-1 | ТОМ-2 | ТОМ-3
АрхитектураБиологияГеографияДругоеИностранные языки
ИнформатикаИсторияКультураЛитератураМатематика
МедицинаМеханикаОбразованиеОхрана трудаПедагогика
ПолитикаПравоПрограммированиеПсихологияРелигия
СоциологияСпортСтроительствоФизикаФилософия
ФинансыХимияЭкологияЭкономикаЭлектроника

Идентификация ПЦР

Буферные системы тканей и крови. Кислотно-основное равновесие. | ВИТАМИН В6 (пиридоксин). | ВИТАМИН К (филлохинон). | ВИТАМИН “С” (аскорбиновая кислота, антицинготный, антискорбутный). | В И Т А М И Н Ы | Врожденные наруш обмена АК-фенилаланин и тирозин | Гем. Распад гемоглобина. | Глюкокортикоиды. Регуляция обменов веществ. | Гниение аминокислот в толстом кишечнике | Гормональная регуляция липидного обмена |


Читайте также:
  1. А) Половая идентификация дошкольников
  2. ИДЕНТИФИКАЦИЯ И РЕКЛАМА
  3. Идентификация клиента не проводится
  4. ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПАТТЕРНОВ ГИПНОТИЧЕСКОЙ РАБОТЫ ЭРИКСОНА.
  5. Идентификация с другим
  6. Идентификация сделки

Методом ПЦР осуществляют диагностику следующих заболеваний: ВИЧ –инфекции, гепатиты А, В, С, Д, цитомегаловирусную инфекцию, токсоплазмоз, хламидии, то есть многие вирусные и бактериальные инфекции.

ПЦР осуществляют в пробирке с помощью термостабильной ДНК-полимеразы при участии дезоксинуклезидтрифосфатов - субстратов и коротких олигонуклеотидных затравок - праймеров

Праймер - короткие, длиной в 20-30 нуклеотидов одноцепочечные фрагменты ДНК, комплементарные 3’-концевым последовательностям копируемой ДНК-матрицы

Реакция происходит в несколько стадий:

1)Денатурация.

Инкубационную смесь нагревают до 90о

При этом происходит разрушение слабых связей в ДНК и из одной двухцепочечной молекулы образуются две одноцепочечные

2)Гибридизация праймеров

Температуру снижают до 50о

При этом происходит гибридизация цепей ДНК с праймерами

3)Полимеризация

Инкубационную смесь нагревают до 70о

При этой температуре полимераза удлиняет оба праймера с их 3’-концов

Праймеры дорастают до размеров матрицы

В результате количество ДНК удваивается

 

Метод основан на том, что первичная структура ДНК разных видов организмов различна

Подбирается последовательности, характерные для ДНК возбудителей болезни и подобрать такие праймеры, которые будут гибридизоваться с ДНК возбудителя, но не с ДНК человека

В этом случае продуктом амплификации будет ДНК только возбудителя, а не пациента.

 

Для медицины имеет значение генно-инженерный способ Нужна плазмида(кольцевая днк) из поджелудочной железы животного выделают ген инсулина.Плазмиду растригают,вставляют.

1этап.Ген->образуется рекомбинантная плазмида.

2этап.внедряют в бактериальную клетку,образование нужного белка.

3этап.выделение готового синтезированного белка.

 


Дата добавления: 2015-08-02; просмотров: 55 | Нарушение авторских прав


<== предыдущая страница | следующая страница ==>
Жирные кислоты.Биороль| Классиф ферментов.Изоферменты.Энзимодиагностика

mybiblioteka.su - 2015-2024 год. (0.005 сек.)