Общие сведения

Возбудители гемофилезов включены в семейство Pasteurellaceae, род Haemophilus. Род имеет 16 видов, среди которых имеются птогнные для человека и животных. Это очень мелкие коккобактерии и палочки, облигатные паразиты слизистых оболочек, нуждаются в специфическом ростовом факторе, содержащемся в крови и в продуктах жизнедеятельности некоторых бактерий. Возбудитель гемофилезного полисерозита изолируют при полиартритах и полисерозитах свиней, нередко вместе с Mycoplasma hyorhinis, а также при пневмониях. Распространено носительство у клинически здоровых свиней. У поросят послеотъёмного возраста вызывает гемофилезный полисерозит (болезнь Глессера). Заражение происходит через носоглотку, а передача возбудителя-аэрогенно.

Доказано наличие четырех сероваров: A, B,C,D (Bakos et al., 1952).

Патогенез изучен недостаточно. Полагают, что проникший возбудитель заносится кровью на серозные оболочки, где размножается, вызывая воспаление. Далее под влиянием протеаз микроб разрушается, освобождаются эндотоксины, которые усугубляют патологические процессы в организме.

В настоящее время установлено 10 серологических вариантов возбудителя гемофилезной плевропневмонии, не отличающихся друг от друга по морфологическим, культуральным и биохимическим свойствам, а различных только по капсульному антигену.

Патогенез изучен недостаточно. Полагают, что возбудитель, обладает тропизмом к легочной ткани, попадает с вдыхаемым воздухом в альвеолы и паренхиму легких и начинает там размножаться и выделять токсины.

2.1 Гемофилезный полисерозит - септическое заболевание поросят раннего послеотьем ного периода. Характеризуется серозно-фибринозным воспалением плевры, перикарда, брюшины, суставов, иногда отмечают менингоэнцефалит.

Возбудитель гемофилезного полисерозита – Haemophilus parasuis.

Морфология (микроскопия). Мазки окрашивают по Граму и для обнаружения капсул. Н. parasuis - мелкие (0,2-0,5 мкм) грамотрицательные, некислотоустойчивые палочки, без спор и жгутиков, образуют капсулу. Возбудитель обнаруживают в виде полиморфных грамотрицательных палочек, диплобактерий, коротких цепочек из палочек, а также в виде нитей.

Материал для исследования. В лабораторию направляют и исследуют стерильно взятые серозно-фибринозный экссудат из перитонеальной, плевральной, перикардиальной полостей, пораженных суставов, а также пораженные серозные оболочки.

Определение культурально-биохимических свойств. Факультативный анаэроб, температурный оптимум 37...38°С. Так как возбудитель - ауксотроф по коферменту ДПН, он не растет на обычных питательных средах. Материал засевают на шоколадный агар, содержащий необходимые для роста гемофил ростовые факторы -V-фактор (ДПН) и Х-фактор (гемин) и кровяной МПА с бактерией - «кормилкой».

Шоколадный агар: к расплавленному МПА (рН 7,2...7,4) при температуре 80...90°С добавляют 10% стерильной дефибринированной крови барана или лошади. Компоненты перемешивают и после охлаждения до 50...80°С среду разливают по чашкам Петри, пробиркам.

На кровяной МПА (5 % крови барана, кролика, лошади) исследуемый материал засевают шпателем по всей поверхности среды. Затем по диаметру чашки в виде двух прямых линий под углом 90° засевают культуру негемолитического штамма S.epidermidis или Е. coli. Посевы инкубируют при 37...38 °С 24...48 ч в условиях обычной атмосферы.

На шоколадном МПА возбудитель формирует мелкие, круглые, прозрачные, с ровными краями и гладкой поверхностью колонии. На кровяном МПА возбудитель растет в виде мельчайших негемолитических колоний только вблизи «штриха» бактерии - «кормилки» на удалении не более 0,5...1,0 см. Такой рост H. parasuis называют «сателлитным»: он связан с тем, что бактерия - «кормилка» синтезирует ДПН, который диффундирует в толщу агаровой среды, и в этой зоне способен расти ауксотроф Н. parasuis. «Шоколадный» агар содержит ДПН, выделенный из разрушенных эритроцитов, и поэтому H.parasuis растет по всей поверхности питательной среды. Для проверки у культуры бактерий зависимости от ДПН ее дополнительно высевают на сывороточный «шоколадный» агар. Культуры возбудителя растут на «шоколадном» и не растут на сывороточном МПА, поскольку в последнем отсутствует ДПН.

Из подозрительных колоний на «шоколадном» агаре или «саллитных» колоний на кровяном агаре готовят мазки, окрашивают по Граму, на капсуле определяют наличие жгутиков в препарате «раздавленная капля»: H. parasuis неподвижен.

На жидких питательных в средах с V-фактором рост сопровождается слабым равномерным помутнением среды.

У культур исследуют уреазную активность посевом на среду Заксе. Раствор А: 96%-й -этанол - 2 мл и дистиллированная вода - 4 мл. Раствор Б: дистиллированная вода - 100 мл, дигидрофосфат калия - 0,1 г, гидрофосфат калия - 0,12 г, хлорид натрия - 0,5 г, добавляют 1 мл 2 %-го раствора фенолового красного. Смешивают растворы А и Б в соотношении 1: 19; смесь разливают по 0,1 мл в уленгутовские пробирки и вносят бактериологическую петлю исследуемой культуры. Пробирки выдерживают при 37...38°С в течение 30...40 мин и учитывают результат. В положительном случае раствор за счет расщепления мочевины и защелачивания среды приобретает малиново-красный цвет. H.parasuis уреазу не вырабатывает.

Патогенность (биопроба). Метод применяют для определения вирулентных свойств культур H. parasuis. Суточной агаровой культурой в дозе 1•109 микробных клеток заражают внутрибрюшинно (интраперетониально) морских свинок массой 300...350 г. Наблюдение ведут в течение 5 сут. Культуру признают вирулентной в случае гибели одной или более морской свинки и выделения от них исходной культуры.

Бактериологическая диагностика. Включает в себя обнаружение возбудителя в исходном материале методом световой микроскопии, выделение чистой культуры на питательных средах и идентификацию возбудителя по культурально-морфологическим, ферментативным и патогенным свойствам.

Иммунитет и средства специфической профилактики изучены слабо. В нашей стране предложена инактивированная вакцина для иммунизации супоросных свиноматок и молодняка. Для лечения используют антибиотики.

2.2 Гемофилезная плевропневмония - инфекционная, контагиозная болезнь свиней. Характеризуется развитием фибринозно-геморрагической некротизирующей пневмонии и фибринозного плеврита.

Возбудитель гемофилезной плеуропневмонии свиней бактерия Haemophilus pleuropneumoniae.

Микроскопия. Мазки-отпечатки окрашивают по Граму и одним из методов для выявления капсулы. Н. pleuropneumoniae - короткие (0,3-0,4 мкм) грамотрицательные, неподвижные палочки с закругленными концами, чаще располагаются в виде парных коккобактерий, могут образовывать короткие цепочки, нитевидные формы, формируют капсулу, спор нет. Возбудитель в исследуемом материале обнаруживают в форме мелких коккобактерий, коротких палочек, окруженных капсулой, расположенных единично, парами, в виде коротких цепочек.

Материал для исследования. В лабораторию направляют кусочки пораженных легких, средостенные и бронхиальные лимфатические узлы.

Бактериологическое исследование. Включает в себя обнаружение возбудителя в исходном материале методом световой микроскопии, выделение чистой культуры посевом на питательные среды и идентификацию возбудителя по культурально-морфологическим, ферментативным и серологическим свойствам.

Культуральные свойства. Возбудитель растет на кровяном, шоколадном и сывороточном агарах с наличием «баккормилки», в аэробных условиях. В жидкой среде с ростовым фактором вызывает равномерное помутнение, продуцирует бета-гемолизины и уреазу. На кровяном МПА образует мелкие, гладкие, выпуклые, круглые, с ровными краями колонии, слизистой консистенции, окруженные зоной гемолиза. Хорошо растет на шоколадном агаре. На обычном МПА с «баккормилкой» формирует колонии только вблизи штриха питающей кльтуры.

В отличие от Н.parasuis возбудитель плевропневмонии обладает гемолитической и уреазной активностью, образует сателлитные колонии на МПА с «баккормилкой», но не растет на МПА и МПБ без «баккормилки».

Вирулентность выделенной культуры определяют на белых мышах при внутрибрюшинном заражении.

Иммунитет изучен слабо. Для специфической профилактики предложена ГОА-формолвакцина. Вакцинируют супоросных свиноматок для создания клострального иммунитета.

Дата добавления: 2015-11-30