Способы постановки

А. Реакция кольцепреципитации

Б. Реакция преципитации в геле (или агаре)

v Двойная или встречная иммунодиффузия (метод Оухтерлони)

v Радиальная иммунодиффузия (метод Манчини)

v Иммуноэлектрофлорез

******

Комплемент - это система белков сыворотки крови, которые являются неспецифическими гуморальными факторами защиты организма (состоит из 20 белков, из которых 9 компонентов являются основными; они обозначаются как С1, С2…, С9). Эти белки обычно находятся в неактивном состоянии и становятся активными при образовании комплекса «антиген-антитело» (классический путь активации комплемента) или при воздействии липополисахарида клеточной стенки грамотрицательных бактерий или клеточной стенки грибов (альтернативный путь активации комплемента).

Иммунодиагностические реакции с участием комплемента называют реакциями лизиса. Механизм этих реакций основан на том, что комплемент прикрепляется к комплексу антиген-антитело, и в присутствии комплемента происходит лизис антигена в составе этого иммунного комплекса. Если антигеном являются бактерии, то реакция носит название реакция бактериолиза, если эритроциты – реакция иммунного гемолиза.

Реакция связывания комплемента (РСК) – применяется для определения неизвестного антигена или антитела.

Механизм. Комплемент, полученный из сыворотки крови морской свинки, присоединяется к любому иммунному комплексу, образующемуся в реакции. В случае, если антиген-антитело, взятые в реакцию, специфичны и образуют иммунный комплекс, то комплемент присоединяется к этому комплексу (первый этап). Если этого не происходит, то комплемент присоединяется к иммунному комплексу в гемолитической системе (эритроциты барана и гемолитическая сыворотка крови кролика против эритроцитов барана) - второй этап реакции.

Если РСК положительная, то наблюдается отсутствие гемолиза (осадок из эритроцитов), если РСК отрицательная, то отмечается гемолиз. (ЗАПОМНИТЕ: гемолиз «+», а РСК «-», гемолиз «-», а РСК «+»)

Компоненты РСК:

Первый этап	Второй этап (индикаторная гемолитическая система)
1. Антиген(чистая культура бактерий, выделенная от больного или диагностикум) 2. Антитело(диагностическая сыворотка или сыворотка крови больного) 3. Комплемент(сыворотка крови морской свинки)	4. Антиген(эритроциты барана) 5. Антитело(гемолитическая сыворотка кролика против эритроцитов барана)

Применение РСК:

А. Определение неизвестного антигена по известному антителу (т.е. идентификация возбудителя по антигенным свойствам с помощью диагностических сывороток)

Б. Определение неизвестного антитела по известному антигену (т.е. определение наличия антител к микробу в сыворотке крови человека с помощью диагностикума при серологической диагностике заболевания)

Титрование комплемента применяют для определения его активности (при оценке иммунного статуса человека) или для определения количества комплемента, необходимого для постановки РСК. Титр комплемента – это его минимальный объем, вызывающий гемолиз эритроцитов барана в составе гемолитической системы (измеряется в мл). Рабочая доза комплемента – это количество комплемента, которое больше титра на 20-25%.

**********

Дата добавления: 2015-07-18