Порядок работы. 1)пронумеровать все пробирки;

1)пронумеровать все пробирки;

2)разлить по 0,5 мл физиологического раствора во все пробирки, за исключением первой;

3)налить в первую и во вторую пробирки по 0,5 мл сыворотки в разведении 1:25;

4)перемешать сыворотку с физиологическим раствором во второй пробирке и перенести пипеткой (емкостью I мл) 0,5 мл в третью про бирку, после перемешивания 0,5 мл разведенной сыворотки переносится таким же образом из третьей пробирки в четвертую, из четвертой в пятую и т.д. до седьмой пробирки, из седьмой пробирки 0,5 мл жидкости удаляется. В восьмой пробирке сыворотки не должно быть. Она служит контролем антигена. После такого разведения сыворотки во все пробирки, но уже другой пипеткой, добавляют антиген по 0,5 мл. Пробирки энергично встряхивают вместе со штативом (для перемешивания антигена с антителом) и помещают в термостат при 37⁰ на 2 часа, после чего читают предварительный результат. Окончательный результат опыта регистрируют через 24 часа.

Рис.1 Реакция агглютинации (1. O-агглютинация; 2. H-агглютинация).

Рис.2 Гемагглютинация (1.Опыт; 2.Контроль)

Контрольные вопросы

Какие виды антигенов имеются в микробной клетке?

Как готовится 0-диагностикум?

Как готовится Н-диагностикум?

Можно ли макроскопически отличить 0-агглютинацию от Н-агглю-тинации, если да, то по каким признакам?

Какое различие между поливалентными и моновалентными диагностическими агглютинирующими сыворотками?

Как получают поливалентные и моновалентные агглютинирующие сыворотки?

Каким образом можно очистить сыворотку от групповых антител? Что понимается под титром агглютинирующей сыворотки?

Какова методика постановки развернутой реакции агглютинации? Какие приемы используются для ускорения капельной агглютинации на стекле?

Почему 0-агглютинация имеет мелкозернистый, а Н-агглютинация
крупнохлопчатый характер?

Как получают иммунную сыворотку, агглютинирующую эритроциты?

ЗАНЯТИЕ 11

Дата___________________

Тема: ИММУНИТЕТ. РЕАКЦИИ ИММУННОЙ СЫВОРОТКИ

План занятия

1.Регистрация результатов опыта по определению титра агглютинирующей сыворотки.

2.Использование классического пробирочного метода реакции
агглютинации для:

а) определения титра антител в сыворотке больного (серологический метод диагностики);

б) определения антигенного строения выделенного возбудителя (серологическая идентификация возбудителя в ходе бактериологического исследования).

3.Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА), или непрямой гемагглютинаций (НПГА). Варианты использования РПГА.

4.Варианты реакций агглютинации на стекле, которые используют
в качестве методов экспресс-диагностики:

а) реакция коагглютинации;

б) реакция летекс-агглютинации;

в) реакция агрегат-гемагглютинации (РАГА) и др.

5.Реакция преципитации. Получение бактериального гаптена и
постановка реакции кольцепреципитации.

6. Реакция преципитации в геле (агаре) для определения:

а)природы антигена;

б)природы антител.

7.Применение методов иммуносорбентного анализа твердой фазы:

а)применение иммуноферментного метода (ИФМ);

б)применение радиоиммунного метода (РИМ).

8.моноклональные антитела и их применение.

Дата добавления: 2015-12-07